本发明公开了一种林蛙油的DNA提取及鉴定方法,东北林蛙COI3基因,它的碱基序列如SEQ ID NO.1所示;COI3基因在鉴定东北林蛙油方面的应用;它包括:用特异性引物和探针,PCR扩增目的基因;反应结束后取5μL PCR产物,琼脂糖凝胶电泳检测;扩增产物回收测序结果:16个东北林蛙样品经线粒体COI引物的PCR后得到的扩增产物经正向反向测序各得到两个311bp左右片段,经DNAstar软件比对校正后获得230bp左右大小的序列片段,每个东北林蛙样品的序列片段经BLAST比对其序列与东北林蛙COI序列一致性为99%。