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[发明专利]一种从发酵液快速制备谷胱甘肽冻干粉的方法-CN202211535775.X在审
发明人：游云龙;卢殿广;金丹甜;付静;史佳栋 -专利权人：无锡福祈制药有限公司
申请日： 2022-12-02 - 公布日： 2023-04-04 - 主分类号： A61K38/06 文献下载
摘要：本发明提供了一种从发酵液快速制备谷胱甘肽冻干粉的方法，该方法包括如下步骤：(1)谷胱甘肽发酵液，通过板式换热器进行换热破壁，得到破壁发酵液；(2)破壁发酵液经过陶瓷膜过滤，除去菌体，得到谷胱甘肽提取清液；(3)谷胱甘肽提取清液经阳离子树脂交换吸附、解析，得到谷胱甘肽解析液；(4)谷胱甘肽解析液，经超纳滤，得到谷胱甘肽浓缩液；(5)谷胱甘肽浓缩液经冻干，得到谷胱甘肽冻干粉。本发明通过板式换热器和膜处理技术的结果，得到了谷胱甘肽的冻干粉，该方法获得的谷胱甘肽冻干粉，还原型谷胱甘肽含量高，氧化型谷胱甘肽水平低，方法环保污染少。
一种发酵快速制备谷胱甘肽干粉方法

[发明专利]一种制备他克莫司脂质体的方法-CN202211589882.0在审
发明人：付静;游云龙;史佳栋;金丹甜 -专利权人：无锡福祈制药有限公司
申请日： 2022-12-12 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C12P17/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种制备他克莫司脂质体的方法，包括以下步骤：步骤(1)、取他克莫司菌株产生菌孢子悬浮液，接种于种子培养基上，在26‑28℃下培养2‑4天；步骤(2)、种子培养基接种于发酵罐内并添加发酵培养基，发酵后，加入大孔吸附树脂，再发酵；步骤(3)、发酵液中树脂进行漂洗，漂洗后装柱洗脱，洗脱液浓缩；步骤(4)、浓缩液纯化浓缩析晶；步骤(5)、将步骤(4)的晶体与磷脂、胆固醇，在水浴中溶解于适量乙醇中，减压蒸发至干成膜，溶解，超声，滤膜过滤，得到他克莫司脂质体。在本发明中，将他克莫司菌株经过培养后得到的发酵液经过纯化处理，用薄膜法制成他克莫司脂质体，具有制备路线短，操作程序简单，制造成本较低的优点。
一种制备克莫司脂质体方法

[发明专利]一种多黏菌素B2的制备方法-CN202211556430.2在审
发明人：付静;游云龙;金丹甜;史佳栋 -专利权人：无锡福祈制药有限公司
申请日： 2022-12-06 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： C07K7/62 文献下载
摘要：本发明提供了一种多黏菌素B2的制备方法，包括如下步骤：(1)对多黏菌素B粗品使用乙腈水溶液进行溶解，滤膜过滤得到样品溶液；(2)使用液相色谱柱进行分离纯化得到纯化液；(3)对纯化液进行滤膜过滤，浓缩，冻干得到多黏菌素B2纯品。本发明提供是从多黏菌素B粗品中分离多黏菌素B2，得到的多黏菌素B2纯度高，可以更好对其进行质量研究和控制。
一种菌素 b2 制备方法

[发明专利]一种从庆大霉素B菌株制备硫酸异帕米星的方法-CN202111624427.5在审
发明人：游云龙;付静;金丹甜;史佳栋;张莹;张谨成 -专利权人：无锡福祈制药有限公司
申请日： 2021-12-27 - 公布日： 2022-05-10 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种自庆大霉素B菌株制备异帕米星的方法，包括以下步骤：将庆大霉素B菌株制成孢子悬浮液，接种于种子培养基中，33～37℃下摇床培养2～4天；将种子培养基接种于发酵罐里的发酵培养基中，33～37℃下发酵培养5～6天；发酵液经提取纯化后得到庆大霉素B。庆大霉素B上的羟基、氨基先经保护剂保护后再与侧链活性酯N‑取代苯酐‑(S)‑异丝氨酸‑N‑取代苯酐酯反应制备N‑取代苯酐异帕米星，在碱性条件下反应制备异帕米星，经酸化精制后得到硫酸异帕米星。制备出的硫酸异帕米星产品纯度高，收率高，且合成工艺路线操作过程简单，成本可控，并减少了高风险化学物质的使用，适合工业化批量生产。
一种庆大霉素菌株制备硫酸异帕米星方法

[发明专利]一种利用基因工程大肠杆菌生产谷胱甘肽的方法-CN202111680973.0在审
发明人：付静;游云龙;金丹甜;史佳栋;张谨成 -专利权人：无锡福祈制药有限公司
申请日： 2021-12-30 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用基因工程大肠杆菌生产谷胱甘肽的方法。该利用基因工程大肠杆菌生产谷胱甘肽的方法为将基因工程大肠杆菌接种至种子培养基中进行种子培养，得到种子液；将种子液按一定的接种量接种至发酵培养基中进行发酵培养，培养到一定阶段加入乳糖进行诱导，诱导后继续培养一定阶段加入用于合成谷胱甘肽的前体物质，继续培养一段时间，得到谷胱甘肽。本发明具有操作简便，反应条件温和，且产物易于分离、反应规模可放大的效果。
一种利用基因工程大肠杆菌生产谷胱甘肽方法

[发明专利]一种西罗莫司粗品的制备方法-CN202111620811.8在审
发明人：游云龙;付静;金丹甜;史佳栋 -专利权人：无锡福祈制药有限公司
申请日： 2021-12-27 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C07D498/18 文献下载
摘要：本发明提供了一种西罗莫司粗品的制备方法，包括以下步骤：S1、西罗莫司发酵液通过陶瓷膜浓缩过滤，除去发酵液中的水溶性物质，得到浓缩菌体；S2、浓缩菌体加入溶媒抽提，抽提溶媒为醇类或酮，抽提菌液通过陶瓷膜过滤，收集抽提清液；S3、西罗莫司抽提清液经减压浓缩后，用酯类溶剂萃取，萃取液脱色后得到脱色液；S4、脱色液经柱层析分离后，减压浓缩，加入非极性溶剂结晶，得西罗莫司粗品。本发明所述的西罗莫司粗品的制备方法所制得的西罗莫司粗品，西罗莫司含量高，异构体水平低。
一种西罗莫司粗品制备方法

[发明专利]一种可消除关键杂质的酶法制备S-腺苷甲硫氨酸方法-CN202111682700.X在审
发明人：付静;游云龙;金丹甜;史佳栋;张谨成 -专利权人：无锡福祈制药有限公司
申请日： 2021-12-30 - 公布日： 2022-04-05 - 主分类号： C12P19/40 文献下载
摘要：本发明公开了一种可消除关键杂质的酶法制备S‑腺苷甲硫氨酸方法。该方法，步骤如下：步骤1，构建一种基因缺失的大肠杆菌：将大肠杆菌BL21(DE3)中的speD基因进行敲除，得到不产生S‑腺苷甲硫氨酸脱羧酶的基因缺失大肠杆菌；步骤2，再将含有目的基因的重组质粒转化该大肠杆菌：利用此基因缺失菌表达S‑腺苷甲硫氨酸合成酶基因metK，经培养和诱导剂诱导，表达后提取的粗酶液可直接用于酶反应生产S‑腺苷甲硫氨酸。本发明具有能够大幅度降低后续SAM纯化成本的效果。
一种消除关键杂质法制腺苷甲硫氨酸方法

[发明专利]一种从他克莫司分离废液中回收子囊霉素、他克莫司8-丙基类似物的方法-CN202010818238.0有效
发明人：游云龙;付静;吴东奇;李明青;金丹甜 -专利权人：卓和药业集团股份有限公司
申请日： 2020-08-14 - 公布日： 2022-03-15 - 主分类号： C07D498/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种从他克莫司分离废液中回收子囊霉素、他克莫司8‑丙基类似物的方法。该方法包括将他克莫司分离废液回收，他克莫司纯化废液中的组分主要为他克莫司、子囊霉素、他克莫司8丙基类似物，通过浓缩挂柱富集废液中的有效成分，银离子硅胶分离将他克莫司组分和子囊霉素、他克莫司8丙基类似物混合组分分离，再由反相填料将子囊霉素、他克莫司8丙基类似物混合组分进行精细纯化，得到高纯度的子囊霉素、他克莫司8‑丙基类似物的单体。本发明具有能够将他克莫司废液中的组分进行充分的回收利用，并且操作程序简单，方法稳定，重现性好的效果。
一种克莫司分离废液回收子囊霉素丙基类似物方法

[发明专利]一种高纯度米卡芬净前体FR901379的制备方法-CN202010819066.9在审
发明人：吴东奇;付静;金丹甜;李明青;游云龙 -专利权人：卓和药业集团有限公司
申请日： 2020-08-14 - 公布日： 2020-11-10 - 主分类号： C07K7/56 文献下载
摘要：本发明公开了一种高纯度米卡芬净前体FR901379的制备方法。该高纯度米卡芬净前体FR901379的制备方法包括将米卡芬净前体发酵浸提液通过陶瓷膜过滤，大孔吸附树脂吸附、解吸。解吸液浓缩用极性溶剂萃取洗晶，得到米卡芬净前体粗提物，将粗提物用聚合物纳米硅胶进行分离，将分离米卡芬净前体FR901379主成分去除极性溶剂后冻干得到高纯度米卡芬净前体FR901379产品。本发明具有能够得到高纯度米卡芬净前体产品，操作工艺简单，质量高，溶剂易回收的效果。
一种纯度米卡芬净前体 fr901379 制备方法

[发明专利]一种腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法-CN202010819067.3在审
发明人： 金丹甜;付静;李明青;吴东奇;游云龙 -专利权人：卓和药业集团有限公司
申请日： 2020-08-14 - 公布日： 2020-11-06 - 主分类号： C12P19/40 文献下载
摘要：本发明公开了一种腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法。该腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取的方法包括将酿酒酵母在发酵罐中培养30‑80h，期间补加葡萄糖及L‑蛋氨酸，直接将发酵液用于后提取；将酵母发酵液通入陶瓷膜中；经过浓缩后；菌浓浓度在30％～60％；将高菌浓浓度料液补水继续浓缩至透析液无色透明，将有机溶剂添加至陶瓷膜中，循环20‑50min，继续浓缩取清液得抽提液；其中，有机溶剂与含固量比为1:1.3～1.8。本发明具有步骤简单，对设备的要求偏低，大大节约人力、物力、生产周期等生产成本，且提取收率高，有效提高了产品利润的效果。
一种腺苷蛋氨酸发酵液破壁提取方法

[发明专利]一种麦考酚酸的提纯方法-CN202010812857.9在审
发明人：李明青;付静;金丹甜;吴东奇;游云龙 -专利权人：卓和药业集团有限公司
申请日： 2020-08-13 - 公布日： 2020-10-30 - 主分类号： C07D307/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种麦考酚酸的提纯方法。该麦考酚酸的提纯方法步骤为将麦考酚酸加入酯类溶剂中，加热搅拌溶解，加热温度为60‑90℃；加入活性炭，搅拌脱色；过滤；加入适量的水进行萃取；浓缩；降温析晶；过滤、洗涤、干燥，得到麦考酚酸纯品。本发明具有显著提高了麦考酚酸的纯度，避免了酮类溶剂的使用，且减少了溶媒的损耗，同时工艺简单，安全，成本低，适合于大规模工业生产的效果。
一种麦考酚酸提纯方法

[发明专利]一种自麦考酚酸菌株制备麦考酚钠的方法-CN201611065059.4有效
发明人：游云龙;付静;曹峥;杨亮;赵永俊;蔡云洁;金丹甜 -专利权人：无锡福祈制药有限公司
申请日： 2016-11-28 - 公布日： 2019-05-07 - 主分类号： C12P17/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种自麦考酚酸菌株制备麦考酚钠的方法，包括：取麦考酚酸菌株产生菌孢子悬浮液，接种于种子培养基上在26～28℃下培养2～4天；种子培养基接种于发酵罐内并添加发酵培养基，26～28℃下发酵9～11天；向发酵液中添加酸使发酵液的pH呈3～4，然后向发酵液中添加氢氧化钠溶液使发酵液的pH呈8～9，脱色重结晶后得到麦考酚酸；将麦考酚酸与氢氧化钠或甲醇钠于醇类溶剂中合成麦考酚钠。在本发明中，将麦考芬酸菌株经过培养后得到的发酵液经过酸碱处理，并用氢氧化钠或者甲醇钠合成生成麦考酚钠，具有制备路线短，操作程序简单，制造成本较低的优点；同时，避免使用酮类有机溶剂，降低了对环境及人体的危害。
一种麦考酚酸菌株制备麦考酚钠方法

[发明专利]一种他克莫司8‑差向异构体的提纯方法-CN201711050000.2在审
发明人：游云龙;赵永俊;金丹甜;徐新冬;吴东奇;郑缘;成梁;付静 -专利权人：无锡福祈制药有限公司
申请日： 2017-10-31 - 公布日： 2018-02-23 - 主分类号： C07D498/18 文献下载
摘要：本发明提供了一种他克莫司8‑差向异构体的提纯方法，包括以下步骤(1)对他克莫司粗品使用有机溶剂进行溶解，滤膜过滤，得样品溶液；(2)使用液相色谱柱进行分离纯化，得纯化液；(3)对纯化液进行浓缩，冷却结晶，过滤得到他克莫司8‑差向异构体粗品；(4)将他克莫司8‑差向异构体使用有机溶剂进行溶解，滤膜过滤，得他克莫司8‑差向异构体纯品溶液；(5)将他克莫司8‑差向异构体纯品溶液浓缩后，冷却结晶，得他克莫司8‑差向异构体纯品。通过本发明揭示的一种他克莫司8‑差向异构体的提纯方法，实现了对他克莫司粗品中的他克莫司8‑差向异构体的实现有效分离，从而可显著地提高他克莫司的纯度。
一种克莫司差向异构提纯方法

[发明专利]一种从发酵液中分离提纯西罗莫司的方法-CN201711050054.9在审
发明人：赵永俊;付静;郑缘;游云龙;金丹甜;徐新冬;吴东奇;王同意 -专利权人：无锡福祈制药有限公司
申请日： 2017-10-31 - 公布日： 2018-01-12 - 主分类号： C07D498/18 文献下载
摘要：本发明提供了一种从发酵液中分离提纯西罗莫司的方法，其采用冷冻破壁，有机溶剂加热浸提冷冻破壁处理后的菌丝体，及对西罗莫司粗品进行动态轴向高压层析柱进行分离，洗脱剂梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液进行浓缩后的得浓缩液，并采用两次有机溶剂溶解结晶得到西罗莫司。本发明所揭示的一种从发酵液中分离提纯西罗莫司的方法，降低了从发酵液中分离并纯化西罗莫司的生产成本，避免了两次硅胶柱层析，从而简化了西罗莫司的纯化工艺，大大降低了柱损耗液大等缺陷，因此比较适合于工业化量产。
一种发酵分离提纯西罗莫司方法

[发明专利]一种提高庆大霉素B发酵产量的方法-CN201711046906.7在审
发明人：杨亮;付静;郑缘;曹峥;游云龙;金丹甜;徐新冬;吴东奇 -专利权人：无锡福祈制药有限公司
申请日： 2017-10-31 - 公布日： 2018-01-12 - 主分类号： C12P19/48 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高庆大霉素B发酵产量的方法，其中，将种子培养基上培养的菌株接种于发酵罐的发酵培养基上，33～37℃下进行发酵，罐压0.03～0.05Mpa，通气量为10.5～11.5vvm；发酵进行至20～30h补加无机盐溶液，发酵进行至40～50h再次补加无机盐溶液，发酵进行至60～70h进行补料培养，通过改变转速的方式维持发酵罐内的溶解氧浓度保持在设定值之上，对发酵液采用上柱解析、浓缩冻干，制得庆大霉素B。在本发明中，采用补料分批发酵的方法进行培养，在发酵不同的时间段，向发酵培养基中添加无机盐溶液，增加了庆大霉素B的产量，本发明可将庆大霉素B的产量提高80％～90％，并缩短了发酵周期，降低了采用发酵法制备庆大霉素B的生产成本。
一种提高庆大霉素发酵产量方法

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