本发明公开了一种裂解性多糖单加氧酶EbLPMO10A，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开裂解性多糖单加氧酶EbLPMO10A在裂解甲壳素中的应用，裂解甲壳素可得到聚合度4～10的几丁质醛酸。本发明还公开了裂解性多糖单加氧酶EbLPMO10A在制备N‑乙酰化壳二糖中的应用，具体应用时，协同甲壳素酶SmChi B处理甲壳素，制备得到N‑乙酰化壳二糖。本发明还公开了一种降解甲壳素或制备N‑乙酰化壳二糖的方法。本发明的裂解性多糖单加氧酶EbLPMO10A具有优良的酶学性质和高效解聚β‑甲壳素活性，在酶法预处理甲壳素和制备甲壳寡糖中具有重要的工业应用价值及经济价值。
本发明公开了一种制备壳寡糖的方法：（1）取壳聚糖，在2.0～2.5 MPa的蒸汽压力下爆破4分钟后快速降压，得到预处理的壳聚糖；（2）向浓度为2%～10%的预处理的壳聚糖溶液中加入SEQ ID NO.1所示的壳聚糖酶CsnBUT，在50～58℃条件下孵育20～80小时，得到降解产物，降解产物中包括壳二糖、壳三糖和壳四糖，以壳三糖为主。本发明的壳寡糖的制备方法，可高效地降解壳聚糖，过程中不使用酸，绿色无污染；制备得到的壳寡糖中壳三糖的纯度高，可大大减少寡糖精制过程后期产品分离纯化的耗时和操作成本。本发明的方法可一步制备生产具有理想DP的COS，具有巨大的经济效益。
本发明公开了壳聚糖酶OUC‑CsnCA联合甲壳素酶SaChiA4在降解中度乙酰化壳聚糖中的应用，壳聚糖酶OUC‑CsnCA的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；甲壳素酶SaChiA4的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述中度乙酰化壳聚糖是指脱乙酰度为40%～75%的壳聚糖。本发明还公开了一种降解中度乙酰化壳聚糖的方法。本发明利用壳聚糖酶OUC‑CsnCA和甲壳素酶SaChiA4联合降解中度乙酰化壳聚糖，水解更彻底，水解产物中全脱乙酰壳寡糖含量更多，且以完全脱乙酰的壳二糖与甲壳单糖为主。本发明对于降解中度乙酰化壳聚糖、酶法制备乙酰化低聚糖的研究具有重要的工业应用价值以及经济价值。
本发明公开了一种利用甲壳素酶SaChiZg制备高纯度甲壳二糖的方法：采用甲壳素酶SaChiZg降解胶质甲壳素，所述甲壳素酶SaChiZg的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用甲壳素酶SaChiZg降解甲壳素，降解产物主要为甲壳二糖，乙酰产物的聚合度明确且可控制；且降解时间越长，甲壳二糖在降解产物中的比例越高。本发明的利用甲壳素酶SaChiZg制备甲壳二糖的方法，可在较短时间内得到纯度更高的甲壳二糖，对工业化生产甲壳二糖有着重要意义。
