本发明公开了一种半滑舌鳎性腺细胞工程化外泌体及其制备方法和应用，属于生物技术中鱼类性腺调控技术领域，所述半滑舌鳎性腺细胞工程化外泌体为携带miR‑124a的半滑舌鳎性腺细胞外泌体，所述外泌体的膜有异硫氰酸荧光素标记多肽靶向修饰，所述的多肽为PEP1，所述PEP1的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。本发明还提供了所述工程化外泌体的制备方法和应用，可靶向作用于半滑舌鳎精巢以精确调节其性别决定基因以及精巢的精子发生。
本发明公开了一种海水青鳉母源效应基因org及其sgRNA片段，属于分子生物学技术领域，所述海水青鳉母源效应基因org的核苷酸序列为SEQ ID NO.1，sgRNA片段序列为SEQ ID NO.2‑3。本发明通过CRISPR/Cas9技术证明了org基因的缺失导致胚胎无法完成早期合子基因组的激活和母本向合子转变的遗传控制过程，造成早期胚胎发育停滞并最终死亡，基因org作为母源效应基因在早期胚胎发育中的重要作用。
本发明公开了半滑舌鳎卵母细胞特异分子标记circEPH6、引物、载体及应用，属于分子生物学技术领域。所述分子标记circEPH6的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供检测所述分子标记circEPHA6的检测引物和探针；本发明还提供了分子标记circEPHA6表达的过表达载体，在半滑舌鳎精巢细胞的细胞系中转染所述过表达载体，能够促使卵子发生相关基因Attesk1的表达变化。本发明为研究半滑舌鳎性逆转机制提供了卵母细胞的特异性分子标记，同时转染的过表达载体可以显著促进circEPHA6表达量，实验组过表达效率可提高500％，进而可以促进卵巢细胞分化。
