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[发明专利]基于斑点叉尾鮰EGFL9基因变异位点及其在生长性状调控方面的应用-CN202310377952.4在审
发明人：张世勇;张文平;陈校辉;刘洪岩;王明华;钟立强;徐思琪;边文冀 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2023-04-11 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明提供基于斑点叉尾鮰EGFL9基因变异位点及应用，包括基于斑点叉尾鮰EGFL9基因的SNPs标记、开发斑点叉尾鮰EGFL9基因变异位点的引物及其试剂盒，本发明在EGFL9上共发现27个多态位点，经过过滤，获得22个有效突变位点，其中4个变异位点(g.142、g.573、g.3079、g.7409)对斑点叉尾鮰的生长性状具有显著影响，位点g.142、g.3079、g.7409为内含子，位点g.573为外显子，位于外显子上的InDel位点g.573使EGFL9基因编码蛋白减少了一个苏氨酸残基，对蛋白质三级结构产生较为明显的影响，从而使该位点的TACC/T型个体的平均体重显著性高于TACC/TACC型个体（P0.05），平均体长显著性高于TACC/TACC型与T/T型个体（P0.05）。
基于斑点叉尾鮰 egfl9 基因变异及其生长性状调控方面应用

[发明专利]基于斑点叉尾鮰雄性特异基因zbtb38-Y的性别连锁SNPs标记开发方法及应用-CN202110688122.4有效
发明人：张世勇;陈校辉;钟立强;王明华;边文冀 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2021-06-21 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了基于斑点叉尾鮰雄性特异基因zbtb38‑Y开发的性别连锁SNPs标记，及其开发方法与应用。开发出的13个新的斑点叉尾鮰性别连锁SNPs标记在雄性中均为杂合型，在雌性中为纯合型。本发明提供了一种全新的斑点叉尾鮰遗传性别鉴定方法，根据SNPs标记位置设计了一对雄性特异扩增引物和一对对照引物，两重PCR扩增使得在雄性个体中能够扩增出1005bp特异条带和220bp对照条带，在雌性个体中仅能扩增出对照条带。本发明开发的斑点叉尾鮰遗传性别鉴定方法准确率达100％，能够高效、科学地实现斑点叉尾鮰遗传性别的鉴定。
基于斑点叉尾鮰雄性特异基因 zbtb38 性别连锁 snps 标记开发方法应用

[发明专利]一种基于SNP位点特异性引物延伸反应快速检测斑点叉尾鮰遗传性别的方法-CN202110796789.6有效
发明人：徐思琪;张世勇;陈校辉;段永强;钟立强;王明华;边文冀 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2021-07-14 - 公布日： 2023-05-23 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于SNP位点特异性引物延伸反应快速检测斑点叉尾鮰遗传性别的方法，该方法设计扩增斑点叉尾鮰性别连锁SNP位点的外围引物、特异性延伸引物(ASE)和DNA探针(ASE‑DP)，利用所述待测斑点叉尾鮰的DNA、引物和DNA探针进行延伸反应和核酸杂交，再根据快速核酸检测试纸条显色结果判断待测样本的遗传性别。本发明的准确率达100％，具有很好的应用前景。
一种基于 snp 特异性引物延伸反应快速检测斑点叉尾鮰遗传性别的方法

[发明专利]一种与斑点叉尾鮰生长相关的rrp44基因SNP位点的分子标记及其检测方法和应用-CN202211160717.3在审
发明人：刘洪岩;陈校辉;张世勇;王明华;钟立强;边文冀 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2022-09-22 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明提供一种与斑点叉尾鮰生长相关的rrp44基因SNP位点的分子标记及其检测方法和应用，设计覆盖rrp44基因全区域的引物并获取20个单倍型SNP分子标记，用于筛选快速生长的斑点叉尾鮰个体。筛选基因型为A/A和G/G个体作为亲本，产生A/G单倍型的个体。本发明的方法，操作简单、检测迅速，提高了斑点叉尾鮰亲本筛选的准确性，可以快速获得生长速度快且遗传稳定的斑点叉尾鮰鱼亲本。
一种斑点叉尾鮰生长相关 rrp44 基因 snp 分子标记及其检测方法应用

[发明专利]与斑点叉尾鮰性别连锁的SNP分子标记及遗传性别鉴定方法-CN202010177166.6有效
发明人：张世勇;陈校辉;边文冀;王明华;钟立强;刘洪岩;邵俊杰 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2020-03-13 - 公布日： 2023-03-31 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明属于鱼类遗传育种技术领域，涉及SNP分子标记技术领域。本发明公开了一种与斑点叉尾鮰性别连锁的SNP分子标记及遗传性别鉴定方法，包括斑点叉尾鮰性别连锁的SNP标记的筛选、验证、雄性特异DNA序列的克隆、序列分析、特异引物设计以及遗传性别鉴定的PCR方法；根据获得的斑点叉尾鮰性别连锁的SNP标记引物及雄性特异DNA序列，创建了斑点叉尾鮰遗传性别的PCR鉴定方法。本发明首次筛选到斑点叉尾鮰性别连锁的SNP标记及雄性特异序列，建立了基于PCR和Sanger测序技术的斑点叉尾鮰遗传性别鉴定方法。本发明具有高效、准确和稳定的特点，在斑点叉尾鮰单性苗种培育等方面具有重要应用价值，同时在定位性别决定基因及性别决定机制研究中也具有重要应用前景。
斑点叉尾鮰性别连锁 snp 分子标记遗传鉴定方法

[发明专利]一种诱导斑点叉尾鮰性别分化的方法-CN202211049770.6在审
发明人：张世勇;徐思琪;陈校辉;王明华;钟立强;边文冀 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2022-08-30 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明提供一种诱导斑点叉尾鮰性别分化的方法，其包括以下步骤，选择卵黄囊苗在斑点叉尾鮰鱼卵流水孵化装置中孵化出苗，培育至30日龄，培育期间控制水体温度为36±0.5℃，上调foxl2基因的表达实现性别逆转；待卵黄囊褪去，仔鱼上游觅食后，先投喂卤虫开口饵料，然后根据体长投喂对应的微粒饲料；30日龄试验鱼养殖至室外水泥池中，饲料更换为商品饲料，每日上、下午各投喂一次，日投喂量为鱼体重的3％，继续培育即可。本发明分别探究温度对斑点叉尾鮰生长及性腺分化的影响及不同温度对性腺分化影响的潜在机制，为温度影响斑点叉尾鮰分化机制奠定基础，同时为日后建立环境友好型的斑点叉尾鮰性别控制育种模式提供前期探索。
一种诱导斑点叉尾鮰性别分化方法

[实用新型]一种提高斑点叉尾鮰产卵率的繁殖生产系统-CN202122656469.9有效
发明人：陈校辉;王明华;钟立强;张世勇;姜虎成;边文冀;张继业;邓年均;刘炬 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2021-11-02 - 公布日： 2022-03-18 - 主分类号： A01K63/00 文献下载
摘要：本实用新型提供一种提高斑点叉尾鮰产卵率的繁殖生产系统，其包括第一亲本池、第二亲本池、产后培育池、消毒池和产卵桶，所述产卵桶设置在所述第一亲本池和/或第二亲本池内并呈错位排列，所述产后培育池和所述消毒池均设置在所述第一亲本池、所述第二亲本池外，所述第一亲本池、第二亲本池和产后培育池之间通过水管连接。本实用新型大幅提高了单位池塘的繁殖生产能力，卵块都在产卵桶内，且产卵时期相对集中，便于收集，可实现批次批量生产，且亲本可追溯，提高产后亲本的培育效果。
一种提高斑点叉尾鮰产卵繁殖生产系统

[发明专利]一种提高斑点叉尾鮰产卵率的繁殖生产方法及系统-CN202111287926.X在审
发明人：陈校辉;王明华;钟立强;张世勇;姜虎成;边文冀;张继业;邓年均;刘炬 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2021-11-02 - 公布日： 2021-12-31 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明提供一种提高斑点叉尾鮰产卵率的繁殖生产方法，该方法包括（1）在亲本池中进行亲本选择与培育；（2）在亲本池内设置若干产卵桶和增氧机以及精细的（3）产卵期管理。本发明的繁殖生产方法其产卵率可达到90%以上，相比较产卵率有明显提高，亲本池密度达到120~180尾/亩，雌鱼密度达72~108尾，大大提高了单位池塘的繁殖生产能力，产卵集中度高，可实现批次批量化生产，批量苗种规格整齐度高。
一种提高斑点叉尾鮰产卵繁殖生产方法系统

[发明专利]一种斑点叉尾鮰伪雌鱼培育方法-CN202110924437.4在审
发明人：张世勇;徐思琪;段永强;陈校辉;钟立强;王明华;边文冀 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2021-08-12 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种斑点叉尾鮰伪雌鱼培育方法，其包括以下步骤，（1）斑点叉尾鮰卵黄囊苗完全消耗卵黄囊长成仔鱼时，开始投喂经雌性激素处理的丰年虫，投喂3天或投喂至仔鱼开口；（2）继续投喂经雌性激素处理的饲料至30日龄；（3）继续投喂常规饲料至60日龄以上，该方法创新的研究了受精卵孵化、伪雌鱼培育饵料的制作、鱼苗饲养与管理、性逆转评估、伪雌鱼筛选等培育环节，实现雄性遗传性别斑点叉尾鮰100%逆转成伪雌鱼，即遗传性别为雄性。
一种斑点叉尾鮰伪雌鱼培育方法

[发明专利]一种用于选择斑点叉尾鮰增重性状的SNP分子标记及应用-CN202110687624.5在审
发明人：张世勇;陈校辉;钟立强;王明华;刘洪岩;邵俊杰;边文冀 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2021-06-21 - 公布日： 2021-08-24 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于选择斑点叉尾鮰增重性状的SNP分子标记及应用，通过全基因组关联分析（GWAS）技术方法，首次在斑点叉尾鮰基因组上筛选到位于20号染色体上的2个与增重性状相关联的SNP分子标记。该SNP位点的多态性与斑点叉尾鮰的增重性状显著关联，所述的SNP分子标记连锁遗传，具有增重优势的斑点叉尾鮰基因型为TG/TG型。
一种用于选择斑点叉尾鮰增重性状 snp 分子标记应用

[发明专利]一种检测斑点叉尾鮰HSP4基因隐性致白化突变的方法-CN201810575835.8有效
发明人：钟立强;张世勇;王明华;陈校辉;边文冀;秦钦;姜虎成 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2018-06-06 - 公布日： 2021-06-04 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测斑点叉尾鮰HSP4基因隐性致白化突变的方法。本发明方法采用一对特异引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，对斑点叉尾鮰HSP4基因进行PCR扩增，扩增产物进行凝胶电泳，依据电泳图谱中出现的条带数及大小判定基因分型的结果。白化个体有99bp的碱基缺失，只有一条较小的150bp条带；正常个体HSP4基因没有变化，只有一条较大的249bp条带；隐性致白化突变携带者个体该基因单链缺乏99bp，导致同时存在150bp和249bp一大一小两条带。本发明能够快速、准确地检测HSP4基因隐性致白化突变携带者的个体，在斑点叉尾鮰育种过程中具有重要应用价值。
一种检测斑点叉尾鮰 hsp4 基因隐性白化突变方法

[发明专利]斑点叉尾鮰性别连锁的微卫星标记引物及遗传性别鉴定方法-CN201811283757.0有效
发明人：张世勇;陈校辉;边文冀;王明华;钟立强;秦钦;王江 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2018-10-31 - 公布日： 2021-06-04 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了斑点叉尾鮰性别连锁的微卫星标记引物及遗传性别鉴定方法。本发明根据获得的斑点叉尾鮰性别连锁的微卫星标记引物及雄性特异等位基因序列，创建了斑点叉尾鮰遗传性别的PCR鉴定方法。本发明首次筛选到斑点叉尾鮰性别连锁的微卫星标记及雄性特异等位基因，建立了斑点叉尾鮰遗传性别鉴定的PCR技术。本发明具有高效、准确和稳定的特点，在斑点叉尾鮰性别控制和单性苗种生产中具有重要应用价值，同时在克隆斑点叉尾鮰性别决定基因及性别分化机制研究中也具有重要应用前景。
斑点叉尾鮰性别连锁卫星标记引物遗传鉴定方法

[发明专利]一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法-CN202011253224.5在审
发明人：张世勇;陈校辉;王明华;钟立强;段永强;徐思琪;边文冀 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2020-11-11 - 公布日： 2021-02-09 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明提供一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法，通过设计CRISPR序列，制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接，再通过体外转录方法制备sgRNA，将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵，以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列，特异性强且敲除效率高，敲除流程简单快捷，为后续解析斑点叉尾鮰zbtb38基因功能提供动物材料。
一种靶向斑点叉尾鮰 zbtb38 基因 sgrna 序列及其筛选方法

[发明专利]一种靶向敲除斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列及其筛选方法-CN202011255641.3在审
发明人：张世勇;陈校辉;王明华;钟立强;徐思琪;段永强;边文冀 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2020-11-11 - 公布日： 2021-02-09 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种靶向敲除斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列及其筛选方法，通过设计CRISPR序列，制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接，再通过体外转录方法制备sgRNA，将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵，以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰mstna基因的sgRNA序列，特异性强且敲除效率高，敲除流程简单快捷，为后续解析斑点叉尾鮰mstna基因功能提供动物材料。
一种靶向斑点叉尾鮰 mstna 基因 sgrna 序列及其筛选方法

[发明专利]一种用于斑点叉尾鮰基因敲除和过表达研究的受精卵及其制备方法-CN202011161332.X在审
发明人：张世勇;陈校辉;段永强;徐思琪;王明华;钟立强;边文冀 -专利权人：江苏省淡水水产研究所
申请日： 2020-10-27 - 公布日： 2021-02-09 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于斑点叉尾鮰基因敲除和过表达研究的受精卵及其制备方法，该方法包括亲鱼培育、强化促熟培育、亲鱼选择、雌性亲鱼的催产、精子溶液制备、卵子收集、人工授精，通过该方法制备的受精卵经显微注射后，孵化率超过80％。本发明还提供了促进斑点叉尾鮰雌性亲鱼排卵的催产剂及其剂量，注射催产剂后可促进雌性亲鱼产卵并可实现人工取卵。根据本发明制备的斑点叉尾鮰受精卵可以保证其同步的发育，满足基因敲除、过表达等研究需要。
一种用于斑点叉尾鮰基因表达研究受精卵及其制备方法

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