本发明公开了一种重组J亚群禽白血病病毒感染性克隆质粒及其制备方法和应用。本发明是将J亚群禽白血病病毒前病毒基因两端的长末端重复序列替换为E亚群禽白血病病毒前病毒基因两端的长末端重复序列,将其插入载体中,以此构建了重组J亚群禽白血病病毒感染性克隆质粒,得到序列如SEQ ID NO:1所示。本发明重组J亚群禽白血病病毒克隆质粒经转染得到的重组病毒株的复制能力和致病性明显弱于自然的J亚群禽白血病病毒,但可表达J亚群禽白血病病毒的结构蛋白,具备J亚群禽白血病病毒的抗原性,可被J亚群禽白血病病毒特异性单克隆抗体JE9所识别。本发明病毒克隆质粒为制备J亚群禽白血病病毒弱毒性活疫苗提供了材料和方法借鉴。
本发明公开一种血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒基因及其感染性克隆的构建。本发明J亚群禽白血病病毒全长基因组序列如SEQ IDNO:1所示,然后采用特异性引物对SEQ ID NO:1所示血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒基因进行扩增,并采用pBlueskript SK(-)为载体,鸡胚成纤维细胞为宿主细胞,构建得到血管瘤病变型型J亚群禽白血病病毒基因的感染性克隆,这为后续研究血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒的ALV-J的致病机理、基因结构以及功能的关系、病毒的复制及遗传变异规律等奠定了基础。