本发明涉及基因工程领域,具体涉及一种含CD3启动子序列和CAR序列的可分离的核酸及应用。所述核酸中具有CD3启动子序列和CAR序列,所述CD3启动子序列和所述CAR序列相连,其中所述CAR序列具有胞外区域序列和胞内区域序列,所述胞外区域序列和所述胞内区域序列相连,所述胞外区域序列为抗CD19免疫球蛋白scFV片段序列,所述CD3启动子序列为SEQ ID NO:14。根据该核酸得到了该核酸编码的多肽,含有该核酸的重组载体,含有重组载体的重组细胞以及在制药中的应用。本发明利用T细胞特异的CD3启动子调控嵌合抗原受体(CAR)的表达,从而实现CAR的高效表达。