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[发明专利]高质量核酸的无细胞生物合成及其用途-CN200580046723.4无效
发明人：陈寅;弗雷德里克·肯德希;弗兰克·瓦兹奎斯;马尔科姆·斯考尼克 -专利权人： 西托吉尼克斯公司
申请日： 2005-12-12 - 公布日： 2008-01-09 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明提供了一种改进的能产生大量治疗品质的核酸无细胞扩增方法以及在研究、治疗学和其他的应用中使用该合成的核酸的方法。该方法联合了本领域内几种不同的最先进方法并协调了它们的应用以经济地合成用于治疗目的核酸。其联合了体外滚环扩增、高保真度聚合酶、高亲和性引物以及特别设计用于特殊用途的精简模板。为了表达的目的，模板包含一包括真核启动子的试剂盒、目的基因的编码序列、以及真核终止序列。扩增后，随后根据预期的用途处理多联体，可能包括限制酶消化得到短表达试剂盒产物(SECs)、使SEC(CNAs)环化的连接步骤和/或产生sCNAs的超螺旋化步骤。最终产物包含几乎是非检测水平的细菌内毒素。
质量核酸细胞生物合成及其用途

[发明专利]单链抗微生物寡核苷酸及其用途-CN200580036505.2无效
发明人：陈寅;谭新星 -专利权人： 西托吉尼克斯公司
申请日： 2005-09-28 - 公布日： 2007-11-21 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明涉及分离命名为rbl－1(SEQ ID NO.19)序列的寡核苷酸序列，这些序列可以杀死微生物、抑制微生物的生长或者阻止微生物产生内源性表达的毒素。这些ssDNA序列，经由筛选法鉴定，似乎充当基本生长功能的调节子，可能在三螺旋结构、反义抑制水平起作用，或者充当改变基因功能的适体。这些序列被称为最小功能域或者MFRs，除其他功用外，可用作治疗剂治疗脓毒症和其他由微生物引起的病症如脓毒症和/或微生物对其有促进作用的病症。
单链抗微生物寡核苷酸及其用途

[发明专利]预防和治疗细菌以及真菌病理学的核苷酸-CN200480021868.4无效
发明人：陈寅;谭新星 -专利权人： 西托吉尼克斯公司
申请日： 2004-06-03 - 公布日： 2006-09-06 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：一种可选择性诱导、单链DNA(ssDNA)表达文库，一种构建ssDNA表达文库的方法，一种使用表达文库筛选ssDNA的方法，和一种用于鉴定改变细菌和真菌基因的表达的ssDNA分子，所述基因涉及细胞生长和毒素产生及分泌。所述筛选文库用于特别是鉴定有效阻止细胞生长、杀死细菌或真菌，或阻止细菌和/或真菌免于合成和分泌它们的毒素的ODNs，和/或发现有效用于在真核(例如哺乳动物)细胞中靶基因功能改变的ODNs。所述文库还有效用于鉴定用作治疗剂的ssDNAs或ODNs，从而例如提供治疗细菌感染诸如脓毒症的方法。
预防治疗细菌以及真菌病理学核苷酸

[发明专利]利用ssDNA治疗HSV相关病理-CN200380109539.0无效
发明人：陈·印 -专利权人： 西托吉尼克斯公司
申请日： 2003-12-06 - 公布日： 2006-05-10 - 主分类号： A01N43/04 文献下载
摘要：一种用于治疗HSV相关病理的组合物，其包括通过在活体细胞中产生单链cDNA(ssDNA)以改变HSV感染细胞中一或多个目标序列表达的表达载体，该组合物悬浮于合适的递送媒介中以对感染部位进行局部施用。表达载体由含有目的序列、反向串联重复序列、反向串联重复序列3′端的引物结合位点、和反转录酶/RNAase H编码基因的基因盒组成，其转染入受感染细胞以抑制HSV的复制或对靶细胞的同化作用。所产生的ssDNA与目的序列结合从而改变该目的序列的表达，其目的在于通过核酸的双螺旋或三股螺旋结合活化或钝化基因、定点诱变、通过结合特异的细胞蛋白中断细胞功能、或干扰RNA剪接功能。
利用 ssdna 治疗 hsv 相关病理

[发明专利]用体内产生的ssDNA改变基因表达-CN00815856.8无效
发明人：查尔斯·A·康拉德;陈印 -专利权人： 西托吉尼克斯公司
申请日： 2000-10-04 - 公布日： 2003-02-26 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供了经过在靶细胞中体内产生单链cDNA(ss－cDNA)改变靶细胞中靶核酸序列表达的方法。靶细胞用含有目的序列，反向串联重复序列，和反向串联重复序列3’端的引物结合位点的序列盒转染。靶细胞对该序列盒的转录产生RNA模板，该模板逆转录产生特定序列的ss－cDNA。逆转录酶/RNAseH的编码基因也可以转染进靶细胞。利用ss－cDNA的茎－环结构可修饰ss－cDNA以去掉所有的侧翼载体序列，该茎－环结构是由于反向串联重复序列使得ss－cDNA进行自身折叠形成双链DNA茎而形成的。双链茎含有一个或多个限制性核酸内切酶识别位点且保留了ssDNA形式的环由目的序列组成，该目的序列可以是任意所需的核苷酸序列。这种设计允许茎环中间体的双链茎被所需的相应限制性核酸内切酶裂解，然后以线性化单链DNA片断的形式释放出环部分，或目的序列。释放的(或裂解的)ssDNA片断含有上述双链茎5′上游或3′下游的最少(如果有的话)序列信息。所得的ssDNA与内源性靶核酸序列结合以改变该序列的表达，其用于如下治疗目的，例如使用核酸的双链或三链结合，定点诱变使基因灭活，经过与特定细胞蛋白质结合和干扰RNA剪接功能使细胞功能被破坏。
体内产生 ssdna 改变基因表达

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