本发明提供了一株马立克病病毒MDV特超强毒株HN302及其基因编辑缺失毒株的构建和应用。本发明HN302毒株于2021年11月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC NO.21929。本发明提供的MDV毒株HN302是从国内疫苗免疫鸡群爆发马立克病MD临床病例鸡群中分离得到的，可代表当前国内优势流行毒株。通过病毒分离培养、基因克隆测序、遗传进化分析、间接免疫荧光实验、SPF鸡攻毒致病性分析以及MDV致病型鉴定等，将HN302毒株定义为MDV特超强毒株。该毒株的病毒基因组序列SEQ ID NO.1全长175700bp。本发明是国内第一个致病型鉴定依据最充分的MDV特超强毒株，可作为亲本毒株用于MD新型高效基因工程疫苗、多联多价疫苗和传代致弱疫苗的研发、创制和应用。
本发明属于基因编辑技术在动物免疫学技术领域中的新应用，公开了一种基于CRISPR/Cas9基因编辑技术筛选和鉴定抗血清1型马立克病病毒特异性pp38蛋白单克隆抗体的方法及应用。其中抗MDV‑1特异性pp38蛋白的单克隆抗体31G7由小鼠杂交瘤细胞株pp38‑31G7产生，该细胞株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No:23025，单克隆抗体31G7的重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO.3，轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO.4。该单克隆抗体31G7可以鉴别区分MDV‑2和MDV‑3毒株，适用于临床中疑似病例的MDV不同血清型流行毒株的鉴别诊断。本发明方法大大提高了筛选针对MDV特定病毒蛋白的单克隆抗体的效率和准确性，同时也为其它疱疹病毒蛋白单克隆抗体的研制提供一种全新思路和可靠的技术手段。
本发明公开一种抗马立克病病毒gB蛋白的单克隆抗体及制备方法和应用。所述的抗MDV gB蛋白的单克隆抗体5E8由小鼠杂交瘤细胞株gB‑5E8产生，该细胞株保藏编号为CGMCC No:23024，该单克隆抗体重链及轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示。本发明其分泌的单克隆抗体5E8可用于所有不同血清型和致病型MDV毒株的IFA和Western blot等免疫学检测分析，在MDV免疫学检测中具有普适性和通用性，具有良好的应用前景。该方法大大提高了筛选针对MDV特定病毒蛋白的单克隆抗体的效率和准确性，同时也为其它疱疹病毒蛋白单克隆抗体的研制提供一种全新思路和可靠的技术手段。
