本发明公开了一种酮还原酶基因及其应用。本发明酮还原酶基因,序列如SEQ ID NO.1所示,其编码的酮还原酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种生产酮还原酶的基因工程菌,其中包含本发明所述的酮还原酶基因。一种酮还原酶的制备方法,包括如下步骤:培养本发明生产酮还原酶的基因工程菌,获得重组表达的酮还原酶。以该重组表达制备的酮还原酶为催化剂,不对称还原酮类化合物制备光学活性手性醇,底物转化率达96.8%,还原产物的ee大于99%。
本发明公开了一种卤醇脱卤酶基因突变体及其应用。一种卤醇脱卤酶基因突变体,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其编码的卤醇脱卤酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种卤醇脱卤酶的制备方法,包括培养本发明所述的含有卤醇脱卤酶基因突变体的基因工程菌,获得重组表达的卤醇脱卤酶。利用本发明所述的卤醇脱卤酶基因突变体构建基因工程菌,并表达制备卤醇脱卤酶,以所述的卤醇脱卤酶为催化剂催化邻卤醇化合物脱卤素反应。将制得的卤醇脱卤酶应用于(R)-4-氰基-3-羟基丁酸乙酯的生产,在相同的生产条件下,产品的产率也有较大提高,达到93.6%;且卤醇脱卤酶用量较少,仅为20.2kg,极大的降低了生产成本。