本发明公开了一种用于单核细胞增生李斯特菌检测的引物组、试剂、试剂盒及检测方法。本发明所述的引物组包括CRISPR/Cas12a引物组及crDNA引物组，其碱基序列分别如SEQ ID No.1、2、3和4所示。该检测方法使用RPA扩增技术进行靶标DNA扩增，再与CRISPR/Cas12a体系偶联，等温条件下扩增，用荧光检测仪检测扩增结果的荧光曲线，以判断待测样品里是否存在单核细胞增生李斯特菌。本发明的检测方法快捷迅速、特异性强、灵敏度高、不需要特殊仪器,在疾病监测、临床诊断和食品安全监测等领域具有重要的应用价值。
本发明公开了一种用于空肠弯曲杆菌检测的CRISPR/Cas12a引物、试剂盒及其使用方法，所述CRISPR/Cas12a引物包括如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的序列，所述试剂盒包括CRISPR/Cas12a引物、crRNA或crRNA制备试剂、核酸扩增试剂、探针和Cas12a酶。本发明的试剂盒及其使用方法对于志贺氏菌的检测具有快速、特异性强和灵敏度高等优点，其检测过程不需要特殊仪器,在疾病监测、临床诊断和食品安全监测等领域具有重要的应用价值。
本发明公开了一种用于克罗诺杆菌检测的试剂盒及检测方法，所述试剂盒CRISPR/Cas12a引物、crDNA序列、crRNA转录试剂、核酸扩增试剂、探针和Cas12a酶；其中，所述CRISPR/Cas12a引物包括如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的序列，所述crDNA序列包括如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的序列。本发明的试剂盒及其检测方法对于克罗诺杆菌的检测具有快速、特异性强和灵敏度高等优点、不需要特殊仪器,在疾病监测、临床诊断和食品安全监测等领域具有重要的应用价值。
本发明公开了一种检测大肠杆菌O157的试剂盒及检测方法，本发明所述的试剂盒包括CRISPR/Cas12a引物、crRNA或crRNA制备试剂、核酸扩增试剂、探针和Cas12a酶，所述crRNA制备试剂包括crDNA序列和crRNA转录试剂，所述的CRISPR/Cas12a引物及crDNA碱基序列见SEQ ID No.1、2、3和4。该检测试剂盒及检测方法快捷迅速、特异性强、灵敏度高、不需要特殊仪器,在疾病监测、临床诊断和食品安全监测等领域具有重要的应用价值。
本发明提供了一种检测产志贺毒素大肠埃希氏菌的实时荧光RAA的引物、探针、试剂盒和检测方法，stx1基因的引物序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，stx1基因探针的序列为如SEQ ID NO.3所示；stx2基因的引物序列分别如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示，stx2基因探针的序列为如SEQ ID NO.6所示；试剂盒包括引物、探针、缓冲液和纯化水；本发明的实时荧光RAA检测方法特异性达100％，灵敏度达1.6×103cfu/mL，15min内可得到结果，比实时荧光PCR方法更快速，灵敏简便，可用于疾病监测、食品安全检测，适合基层实验室推广应用。
本发明提供了一种检测大肠埃希氏菌O157的实时荧光RAA的引物、探针、试剂盒和检测方法，引物的序列中上游引物如SEQ ID NO.1所示，下游引物如SEQ ID NO.2所示；探针的序列为如SEQ ID NO.3所示；试剂盒包括引物、探针、缓冲液和纯化水，RAA检测方法：提取样品DNA，以样品DNA为模板，利用试剂盒进行RAA扩增，并在扩增过程中进行实时荧光检测；本发明的实时荧光RAA检测方法的特异性达100％，灵敏度达8.0×101cfu/mL，15min内可得到结果，比实时荧光PCR方法更快速。该方法简便、快速、灵敏、便携、价格低廉，可用于疾病监测、食品安全检测，适合基层实验室推广应用。
本发明提供了一种检测小肠结肠耶尔森菌的实时荧光RAA的引物、探针、试剂盒和检测方法，引物的序列中上游引物如SEQ ID NO.1所示，下游引物如SEQ ID NO.2所示；探针的序列为如SEQ ID NO.3所示；试剂盒包括上述引物、探针、缓冲液和纯化水，RAA检测方法包括如下步骤：提取样品DNA，以样品DNA为模板，利用试剂盒进行RAA扩增，并在扩增过程中进行实时荧光检测；本发明的实时荧光RAA检测方法特异性达100％，与其他物种无交叉反应，灵敏度达5.2×102cfu/mL，5min可得到结果，比实时荧光PCR方法更快速，便捷环保，从而适用于基层实验室对食品中小肠结肠耶尔森菌的快速检测。
本发明公开了用于高效检测新型冠状病毒的RAA‑CRISPR扩增引物组、试剂盒及方法，所述引物组为包含SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和/或SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5的核酸序列，或与其同源性大于90％的核酸序列；方法包括，采用进行新型冠状病毒的核酸扩增；向扩增后的产物中加入crRNA、T7转录酶、NTP、探针和缓冲液制成检测液；检测所述检测液的荧光强度，根据荧光曲线判断样品中是否含有新型冠状病毒；本发明提供了可代替荧光PCR方法，成为更加廉价、高效、应用范围广的检测新型冠状病毒的方法、扩增引物及试剂盒。
本发明公开了一种用于检测空肠弯曲菌的核酸免疫金标试纸条及试剂盒和方法。所述的试剂盒包括PCR反应体系，所述的PCR反应体系包括一引物对，所述的引物对的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明使用用于试纸条检测空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)的试剂盒检测空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)特异性强、灵敏度高。
本发明提供了一种用于检测金黄色葡萄球菌的引物组合和试剂盒，属于生物检测技术领域，引物组合包括内部引物组和外部引物组；内部引物组包括上游内部引物和下游内部引物，上游内部引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3、7、12或17所示，下游内部引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4、8、13或18所述；外部引物组包括上游外部引物和下游外部引物，上游外部引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1、5、10或15所示，下游外部引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2、6、11或16所示。本发明的引物组合对金黄色葡萄球菌具有高度的特异性，结合等温扩增方法能够缩短检测的时间，仅需45min就能够得出检测结果。
本发明公开了一种用于副溶血弧菌活菌检测的试剂、试剂盒及应用。所述的检测试剂包括：引物对，包括第一引物和第二引物，所述第一引物和第二引物的序列分别如SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3所示；以及，探针，其序列如SEQ ID NO：1所示；所述探针的3’端标记有荧光淬灭基团，5’端标记有荧光报告基团。本发明实施例提供的检测试剂、试剂盒在应用于检测副溶血弧菌时，具有特异性高、稳定性好等特点。
