本发明涉及一种大鼠细小病毒RPV‑1特异性VP2基因重组抗原、合成方法及试剂盒,大鼠细小病毒RPV‑1特异性VP2基因重组抗原氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明的大鼠细小病毒RPV‑1特异性VP2基因重组抗原,选用大鼠细小病毒VP2蛋白上的特异性序列段201‑450aa片段,并制备成抗原,同时建立了间接ELISA方法,实现低成本、高特异性且更安全的ELISA检测。本发明的大鼠细小病毒RPV‑1特异性基因重组抗原,能用于大鼠细小病毒的间接ELISA试剂盒或大鼠细小病毒的免疫学试剂盒,能对大鼠细小病毒RPV‑1进行单独检测,能避免与KRV和H‑1阳性血清的交叉反应,检测的准确性高,且与病毒分离培养和观察鉴定的检测方法相比,检测效率高,检测操作简便,检测成本低。