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[发明专利]细胞分选用链霉亲和素偶联微泡的冻干制剂和用途-CN201910678283.8有效
发明人：魏卿;肖海蓉;赵梦莲;牛翰婕 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2019-07-25 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明涉及细胞分选用链霉亲和素偶联微泡的冻干制剂和用途，该冻干制剂包括用胶塞密封的玻璃瓶，玻璃瓶内分装有能够在遇到水性载体液时形成微泡的冻干粉末，并且玻璃瓶内的空间气氛为选自下列的用于包裹到所述微泡中的包埋气体：C3F8、SF6、CF4、N2、CO2、空气；所述微泡与链霉亲和素偶联并且由选自下列的材料构成：聚乙二醇、磷脂、脂肪酸。冻干制剂用于从外周血中分离目标细胞的方法如说明书所详述的，其可从外周血简易、快速、高效地分离获取免疫细胞、造血干细胞等目标细胞，避免现有磁珠法的磁珠残留、流式分选引入荧光素的弊端等问题，不需要昂贵的仪器设备、成本低、并且对所结合的靶细胞毒性极小、不易使之失活；分选出的细胞纯度、活力高。
细胞选用亲和素偶联微泡制剂用途

[发明专利]制备用于细胞分选的链霉亲和素偶联微泡冻干制剂的方法-CN201910678276.8有效
发明人：许晓椿;魏卿;肖海蓉;牛翰婕;赵梦莲;刘庆喜 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2019-07-25 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明涉及制备用于细胞分选的链霉亲和素偶联微泡冻干制剂的方法，包括步骤：使磷脂和脂肪酸用有机溶剂溶解，接着旋转蒸发除溶剂，真空干燥；向烧瓶中加水，超声波振荡使形成混悬液；混悬液加聚乙二醇，混匀，加链霉亲和素，室温孵育；将混悬液分装到玻璃瓶中，用胶塞将玻璃瓶半加塞，抽真空、冷冻、升华、干燥，压塞密封；通过针头穿刺胶塞向密塞玻璃瓶内充入包埋气体，得到冻干制剂，其可用于从外周血简易、快速、高效地分离获取免疫细胞、造血干细胞等目标细胞，避免现有磁珠法的磁珠残留、流式分选引入荧光素的弊端等问题，不需要昂贵的仪器设备、成本低、并且对所结合的靶细胞毒性极小、不易使之失活；分选出的细胞纯度、活力高。
制备用于细胞分选亲和素偶联微泡冻干制剂方法

[发明专利]用于细胞分选的链霉亲和素偶联微泡的液体制剂-CN201910678274.9有效
发明人：许晓椿;魏卿;肖海蓉;赵梦莲;刘庆喜 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2019-07-25 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明涉及用于细胞分选的链霉亲和素偶联微泡的液体制剂，其为一种存在于水性载体液中的充气微泡悬浮液，其中的微泡与链霉亲和素偶联，微泡直径小于10μm，每1mL充气微泡悬浮液多达10^8个微泡的链霉亲和素偶联微泡，每1mL充气微泡悬浮液中微泡内的包埋气体量为1～200ug。还涉及该液体制剂在从外周血中分离目标细胞的方法中作为分离试剂的用途。液体制剂用于从外周血中分离目标细胞的方法如说明书所详述的，其可从外周血简易、快速、高效地分离获取免疫细胞、造血干细胞等目标细胞，避免现有磁珠法的磁珠残留、流式分选引入荧光素的弊端等问题，不需要昂贵的仪器设备、成本低、并且对所结合的靶细胞毒性极小、不易使之失活；分选出的细胞纯度、活力高。
用于细胞分选亲和素偶联微泡液体制剂

[发明专利]分泌表达PD-1、GM-CSF抗体的CAR-T细胞及其用途-CN202210040555.3有效
发明人：肖海蓉;许晓椿;刘庆喜;魏卿;任倩影 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2022-01-14 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及分泌表达PD‑1、GM‑CSF抗体的CAR‑T细胞及其用途。具体地说，一方面，本发明涉及一种嵌合抗原受体，包括：作为第一信号的抗原结合结构域、跨膜结构域、作为第二信号的细胞内传导结构域、以及分泌中和PD‑1、GM‑CSF的anti‑PD‑1、anti‑GM‑CSF scFv的第四信号域。本发明还涉及一种重组质粒，一种能够分泌表达IL‑7、CCL17因子和/或PD‑1、GM‑CSF抗体的CAR‑T细胞，这些CAR‑T细胞的制备方法以及它们在制备用于治疗肿瘤的细胞治疗剂中的用途。本发明细胞治疗剂具有如说明书所述优良技术效果。
分泌表达 pd gm csf 抗体 car 细胞及其用途

[发明专利]CD19-CAR-T细胞及其制备方法-CN202111157897.5有效
发明人：许晓椿;肖海蓉;刘庆喜;魏卿;赵梦莲;房帅 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2021-09-30 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及CD19‑CAR‑T细胞及其制备方法。一方面，本发明涉及一种编码的嵌合抗原受体，包括作为第一信号的抗原结合结构域、跨膜结构域、作为第二信号的细胞内传导结构域、表达IL‑7和CCL‑17细胞因子的第三信号域、以及分泌中和PD‑1、GM‑CSG的anti‑PD‑1、anti‑GM‑CSF scFv的第四信号域。另一方面，本发明涉及一种CAR‑T细胞，其能够分泌表达IL‑7、CCL17因子和/或PD‑1、GM‑CSF抗体。另一方面，本发明涉及制备CAR‑T细胞的方法，以及它们治疗肿瘤的用途。
cd19 car 细胞及其制备方法

[发明专利]靶向CD33的嵌合抗原受体和制备B16-CD33 CAR-NK细胞的方法-CN202211206295.9在审
发明人：刘庆喜;肖海蓉;魏卿 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2022-09-30 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及靶向CD33的嵌合抗原受体和制备B16‑CD33CAR‑NK细胞的方法。一方面，涉及一种嵌合抗原受体，其包括作为第一信号的抗原结合域、跨膜结构域、作为第二信号的细胞内传导结构域、以及表达CD16抗体的第三信号域。所述制备CAR‑NK细胞的方法包括步骤：质粒合成、病毒包装、病毒收获及浓缩、NK细胞的制备、慢病毒感染。本发明的各个方面呈现如说明书所述优良效果。
靶向 cd33 嵌合抗原受体制备 b16 car nk 细胞方法

[发明专利]无血清驯化培养间充质干细胞的方法和所用的培养基-CN202010980501.6有效
发明人：肖海蓉;魏卿;许晓椿;刘庆喜 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2020-09-17 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及无血清驯化培养间充质干细胞的方法和所用的培养基。一方面涉及3‑(2‑甲氧基苯氧基)‑1,2‑丙二醇和镁的组合在制备用于无血清驯化培养间充质干细胞的驯化培养基中的用途，所述驯化培养基中包含：转铁蛋白8～12ng/mL、胰岛素8～12ng/mL、3‑(2‑甲氧基苯氧基)‑1,2‑丙二醇0.08～0.12mg/mL等以及平衡量的DMEM/F12培养基。本发明还涉及无血清驯化培养间充质干细胞的方法；还涉及用于无血清驯化培养间充质干细胞的驯化培养基；还涉及制备无血清驯化培养间充质干细胞的驯化培养基的方法，该方法包括向DMEM/F12培养基添加转铁蛋白、胰岛素、胎牛血清或其它物质的步骤。本发明方法呈现说明书所述优良效果。
血清驯化培养间充质干细胞方法所用培养基

[发明专利]血小板裂解物无血清分离培养脐带间充质干细胞的方法-CN202011381203.1有效
发明人：肖海蓉 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2020-11-30 - 公布日： 2022-11-15 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及血小板裂解物无血清分离培养脐带间充质干细胞的方法。本发明方法包括如下步骤：处理脐带样本；充分清洗以去除表面血污，剪成小段，清除残留血块，清洗；剥除表皮，剔除动脉和静脉，得到华通氏胶组织，切割成小块；接种至培养瓶，添加原代完全培养基混匀，培养；至细胞融合度达80％以上后，去旧培养基，用D‑hanks液清洗细胞，加入重组胰酶溶液消化细胞，使细胞脱落，加入D‑hanks液稀释，离心，细胞沉淀用培养基重悬，即得。本发明还涉及一种培养基，其是以DMEM‑F12培养基为基质配制并包含：血小板裂解物、人血白蛋白、重组胰岛素、EGF、bFGF。本发明方法呈现如说明书所述优异技术效果。
血小板裂解血清分离培养脐带间充质干细胞方法

[发明专利]一种肿瘤干细胞向神经元方向分化方法-CN202210436760.1有效
发明人：肖海蓉;刘庆喜;魏卿;房帅 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2022-04-25 - 公布日： 2022-08-05 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本发明提供了一种肿瘤干细胞向神经元方向分化方法，该方法包括肿瘤干细胞获取，肿瘤干细胞向神经元诱导分化，分化后神经元的培养等；本发明并对分化后的神经元进行了一定的验证工作，证实了肿瘤干来源的神经元具备神经元的特异性标志物，并通过膜片钳验证了肿瘤干来源的神经元具有钠离子内流信号。
一种肿瘤干细胞神经元方向分化方法

[发明专利]一种肿瘤干细胞获取方法-CN202210180810.4在审
发明人：刘庆喜;肖海蓉;赵梦莲;任倩影 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司;齐鲁理工学院
申请日： 2022-02-25 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： C12N5/095 文献下载
摘要：本发明提供了一种肿瘤干细胞获取方法，该方法将胶质瘤细胞系进行干性培养，干性培养过程中对细胞进行低温刺激等手段，以激活并扩增起始肿瘤干种子细胞，然后利用干性相关标志物进行分选，分选后培养过程中去除贴壁的无干性特征的胶质瘤细胞，剩余悬浮细胞可进行重复多次的肿瘤球培养即肿瘤干细胞。本发明所述的肿瘤干细胞获取方法可以快速扩增干性较强的细胞，为后期的分选、培养提供大量的肿瘤干种子细胞，本方法适用于大规模肿瘤干细胞库建库使用，以满足常规肿瘤生物医学基础研究、临床研究以及抗肿瘤药物开发等工作需求。
一种肿瘤干细胞获取方法

[发明专利]制备CAR-T细胞的方法-CN202210119944.5有效
发明人：刘庆喜;许晓椿;肖海蓉;魏卿;赵梦莲 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2022-02-09 - 公布日： 2022-04-26 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及制备CAR‑T细胞的方法，该方法包括以下步骤：质粒合成，该质粒是由CD19单链可变区、CD8a铰链区、CD8a跨膜区、4‑1BB信号、CD3ζ的包浆信号、IL‑7、CCL17序列构成；病毒包装，得到慢病毒浓缩液，测定其病毒滴度；T细胞制备，制得T细胞为CD8+T细胞，对其进行激活、转导与扩增，收获CAR‑T细胞。本发明还涉及制备T细胞的方法。本发明呈现如说明书所述优异效果。
制备 car 细胞方法

[发明专利]血小板裂解物用于无血清分离和传代培养脐带间充质干细胞的方法-CN202011567586.1在审
发明人：肖海蓉;李新峰;王正;刘冰;汤乐 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2020-12-25 - 公布日： 2021-04-06 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及血小板裂解物用于无血清分离和传代培养脐带间充质干细胞的方法。一方面，本发明涉及传代培养脐带间充质干细胞的方法，包括如下步骤：接种原代P0代间充质干细胞于培养瓶中，补充传代完全培养基，置CO2培养箱中培养至细胞融合度达70～80％时，弃旧培养基，用D‑hanks液清洗细胞后，加重组胰酶溶液消化细胞使细胞脱落，加D‑hanks液稀释，合并所有细胞悬液至离心管内，离心，用传代完全培养基使细胞沉淀重悬，得到P1代间充质干细胞；继续照此从P0代到P1代的传代培养方法获得后续代次例如至P10代的脐带间充质干细胞。还涉及用于脐带间充质干细胞传代培养的传代完全培养基。本发明方法和所用的培养基呈现如说明书所述优异技术效果。
血小板裂解用于血清分离传代培养脐带间充质干细胞方法

[发明专利]治疗骨关节炎的方法-CN202011376640.4在审
发明人：肖海蓉;陆伟峰 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2020-11-30 - 公布日： 2021-03-09 - 主分类号： A61K9/10 文献下载
摘要：本发明涉及治疗骨关节炎的方法。具体地说，本发明涉及一种细胞治疗组合物，其包含：间充质干细胞(其来源例如可以是脐带或胎盘)、玻璃酸钠、氯化钠、磷酸钠盐和水。另一方面，本发明涉及所述细胞治疗组合物在制备用于治疗骨关节炎和软骨缺损的药剂中的用途。本发明细胞治疗组合物可以用于治疗骨关节炎，并且该细胞治疗组合物呈现如本发明所述优异技术效果。
治疗骨关节炎方法

[发明专利]治疗骨关节炎的间充质干细胞组合物及其制法和用途-CN202011376649.5在审
发明人：肖海蓉;陆伟峰 -专利权人： 深圳博雅感知药业有限公司
申请日： 2020-11-30 - 公布日： 2021-02-23 - 主分类号： A61K35/51 文献下载
摘要：本发明涉及治疗骨关节炎的间充质干细胞组合物及其制法和用途。具体地说，本发明一方面涉及一种可用于配制细胞治疗组合物的组合物，其包含氯化钠、磷酸钠和水等。进一步的，本发明涉及一种可用于治疗骨关节炎和软骨缺损的细胞治疗组合物，其包含：间充质干细胞、人血白蛋白、玻璃酸钠、氯化钠、磷酸钠盐和水等。此外，本发明还提供了所述细胞治疗组合物在制备用于治疗骨关节炎和软骨缺损的药剂中的用途。另外，还提供了前述组合物在制备用于治疗骨关节炎和软骨缺损的细胞治疗组合物中的用途。本发明组合物以及细胞治疗组合物可以用于治疗骨关节炎，并且这些组合物和细胞治疗组合物呈现如本发明所述优异技术效果，例如优良稳定性以一种或多种优良的药学效果。
治疗骨关节炎间充质干细胞组合及其制法用途

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