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[发明专利]一种利用生物酶制备腺苷二磷酸纯品的方法-CN202310876431.3在审
发明人：原海亮;陶晓阳;胡小垒;吴飞 -专利权人： 汇海（苏州）生物技术有限公司
申请日： 2023-07-18 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12P19/32 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用生物酶制备腺苷二磷酸纯品的方法，包括以下步骤：S1、酶蛋白制备a、GLK酶蛋白工程菌株构建；b、GLK重组酶蛋白发酵；c、GLK酶液的制备；S2、酶催化反应；S3、反应液脱色；S4、层析柱分离；S5、纳滤除盐浓缩；S6、结晶；S7、重结晶；S8、干燥成品。本发明通过筛选获得的葡萄糖激酶(GLK，EC:2.7.1.2)作为催化剂，利用廉价易得的三磷酸腺苷(ATP)以及葡萄糖为原料，在体外进行ADP产品的生物合成，并经过简单的分离纯化工艺获得较高纯度的ADP原料，整个生物合成过程在水相中进行，反应调节温和易控，副产物较少，极大的降低了分离纯化工艺的难度，减少其产业化的生产成本及环保压力，且最终的ADP纯度99％。
一种利用生物酶制备腺苷二磷酸纯品方法

[发明专利]一种利用生物酶制备N1-甲基-假尿苷单磷酸的方法-CN202310510232.0在审
发明人：原海亮;陶晓阳;高懿琪;吴飞 -专利权人： 汇海（苏州）生物技术有限公司
申请日： 2023-05-08 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12P17/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用生物酶制备N1‑甲基‑假尿苷单磷酸的方法，包括S1.酶蛋白的制备：a.重组酶蛋白工程菌株构建:工程菌株使用真核宿主，也是原核表达系统宿主，选用优质的表达宿主分别构建脱氧核糖核苷激酶工程菌株、多聚磷酸激酶工程菌株，b.重组酶蛋白发酵:使用的发酵培养基为TB液体培养基，利用异丙基硫代半乳糖苷或者乳糖进行蛋白诱导表达，重组酶蛋白可为多种物体，本发明使用筛选制备的脱氧核糖核苷激酶蛋白，以N1‑甲基‑假尿苷为底物，利用磷酸供体再生系统减少磷酸供体的用量以及副产物的生成，实现了N1‑甲基‑假尿苷单磷酸生物合成，并研究开发非常简单的分离纯化工艺，获得了高纯度的N1‑甲基‑假尿苷单磷酸产品。
一种利用生物酶制备 n1 甲基假尿苷单磷酸方法

[发明专利]重组人金属硫蛋白Ⅲα片段纯品的制备方法-CN201810000449.6有效
发明人：冯永良 -专利权人： 汇海（苏州）生物技术有限公司
申请日： 2018-01-02 - 公布日： 2022-02-22 - 主分类号： C07K14/825 文献下载
摘要：一种重组人金属硫蛋白Ⅲα片段纯品的制备方法，步骤：制备融合蛋白溶液；制备融合蛋白粗品；制备巯基峰流穿液；制备酶切液；制备含重组人金属硫蛋白IIIα片段的上清液；制备穿透液；对得到的穿透液用超滤膜超滤脱盐，再上样于经缓冲液平衡的阴离子交换层析柱，再由洗脱液进行梯度洗脱，分瓶收集，取巯基峰洗脱液超滤脱盐，冷冻干燥成冻干粉，得到成品。在获得高纯度重组人金属硫蛋白Ⅲα片段的同时，降低制备成本；促进金属硫蛋白空间结构的正确折叠，减少金属硫蛋白活性损失；使得获得的重组人金属硫蛋白IIIa片段具有正确的空间结构及理想的生物活性。
重组金属蛋白片段纯品制备方法