本发明涉及分子生物学检测领域，提供了一种具有单碱基特异性的转基因作物鉴定方法。该方法包括：以靶标DNA为模板，使用带生物素标记的PCR引物组、RPA引物组进行反应，得到PCR或RPA扩增产物；PCR引物组包括序列如SEQ ID NO：1所示的第一正向引物和序列如SEQ ID NO：2所示的第一反向引物；RPA引物组包括第一、第二、第三RPA引物组，三个RPA引物组的正向引物序列分别如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示，第二反向引物的序列如SEQ ID NO：4所示；将PCR或RPA扩增产物加入存在单碱基特异性探针的检测体系中进行检测，得到鉴定结果。本发明具有单碱基特异性，可实现转基因作物的鉴定，具有准确性高、灵敏度好、检测速度快、操作简便和成本低等优点。
本发明提供了一种双T‑DNA载体pBID‑RT Enhanced及其构建方法和应用，涉及转基因技术领域；所述载体以pCAMBIA3300的质粒为基础，包含两个反向独立的T‑DNA区，第一T‑DNA区的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，第二T‑DNA区的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。利用所述载体可降低T‑DNA整合到连锁位点的频率，T1代和F1代中无标记转基因植株占76.92％；利用所述载体可获得抗草铵膦转基因油菜以及既抗草铵膦又抗草甘膦转基因油菜。利用本发明的所述载体可以成功并且高效的生产无标记转基因甘蓝型油菜植株，并创造两种抗除草剂品种。
本发明公开了一种转基因油菜及其产品筛查阳性质粒分子pYCSC‑1905的设计及其应用，涉及转基因安全领域中转基因油菜的安全监管和筛查检测技术。pYCSC‑1905的碱基序列如SEQ ID NO.1所示。利用pYCSC‑1905作为阳性对照和质控样品，能对油菜及其产品进行转基因成分的普通PCR和实时荧光PCR筛查检测，对目前已知遗传信息的转基因油菜的覆盖率为100％；本发明解决了转基因油菜筛查检测中缺乏阳性对照或标准品的技术难题，避免了筛查检测中针对多个检测靶标设置多个阳性对照的问题，降低了制备多个阳性对照的人力成本和经济成本。
本发明涉及一种甘蓝型油菜雄性不育基因BnMS5e、cDNA、蛋白、载体、工程菌及其应用，属于生物育种技术领域。所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述基因BnMS5e功能缺失会严重影响雄配子减数分裂过程中染色体的行为，最终导致小孢子发育缺陷。该突变体结合保持系和恢复系可应用于油菜杂交新品种的培育。基因BnMS5e可作为一个油菜减数分裂调控的功能基因应用于油菜基因工程雄性不育系统的创制。
