本发明的课题是提供具有优异性质的连接酶突变体。本发明的解决手段是下述(1)、(2)或(3)的连接酶突变体：(1)包含与SEQ ID NO:1的氨基酸序列显示95%以上的同一性的氨基酸序列且具有核酸的连接活性的连接酶突变体；(2)包含与SEQ ID NO:2的氨基酸序列显示90%以上的同一性的氨基酸序列且具有核酸的连接活性的连接酶突变体；或者(3)包含与SEQ ID NO:3的氨基酸序列显示97%以上的同一性的氨基酸序列且具有核酸的连接活性的连接酶突变体。
本发明提供一种在维持与向导RNA的结合能力的同时靶序列的限制得到缓解、且作为基因编辑中的工具有用的突变型SaCas9蛋白，所述突变型SaCas9蛋白是包含下述的氨基酸序列的蛋白等：在SEQ ID NO:2中782位的谷氨酸突变成赖氨酸(E782K)、800位的亮氨酸突变成精氨酸(L800R)、968位的天冬酰胺突变成精氨酸(N968R)、985位的天冬酰胺突变成丙氨酸(N985A)、991位的精氨酸突变成丙氨酸(R991A)、1021位的丙氨酸突变成丝氨酸(A1021S)、927位的苏氨酸突变成赖氨酸(T927K)、929位的赖氨酸突变成天冬酰胺(K929N)、1017位的异亮氨酸突变成苯丙氨酸(I1017F)而得到的氨基酸序列。
