本发明公开了一种禾柄锈菌几丁质脱乙酰酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示，利用全基因合成方法获得禾柄锈菌的几丁质脱乙酰酶编码基因序列。进一步利用毕赤酵母表达系统对所述优化的几丁质脱乙酰酶编码基因进行分泌表达，获得几丁质脱乙酰酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的几丁质脱乙酰酶可对几丁质、壳聚糖及壳寡糖中的乙酰基进行脱除，从而获得特定结构的壳聚糖或壳寡糖。这些特定结构的壳聚糖或壳寡糖可具有新的或更高的生物活性。因此，该禾柄锈菌几丁质脱乙酰酶及其脱乙酰产物均具有良好的工业应用前景。
本发明公开了一种新型隐球菌几丁质脱乙酰酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示，利用全基因合成方法获得新型隐球菌的几丁质脱乙酰酶编码基因序列。进一步利用毕赤酵母表达系统对所述优化的几丁质脱乙酰酶编码基因进行分泌表达，获得几丁质脱乙酰酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的几丁质脱乙酰酶可对几丁质、壳聚糖及壳寡糖中的乙酰基进行脱除，从而获得特定结构的壳聚糖或壳寡糖。这些特定结构的壳聚糖或壳寡糖可具有新的或更高的生物活性。因此，该新型隐球菌几丁质脱乙酰酶及其脱乙酰产物均具有良好的工业应用前景。
本发明公开了一种环状芽孢杆菌壳聚糖酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，利用全基因合成方法获得了环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)中的壳聚糖酶编码基因序列，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的壳聚糖酶编码基因进行高效分泌表达，获得环状芽孢杆菌壳聚糖酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的壳聚糖酶对壳聚糖底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.77mg)降解5g壳聚糖的水解能力，而降解相同量的壳聚糖约需要来源于枯草芽孢杆菌的中性蛋白酶150mg，理论上效率提高近200倍；具有良好的工业应用前景。
本发明公开了一种番木瓜几丁质酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，利用全基因合成方法获得了番木瓜(Carica Papaya)中的几丁质酶编码基因序列，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的几丁质酶编码基因进行高效分泌表达，获得番木瓜几丁质酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的番木瓜几丁质酶对低脱乙酰度的壳聚糖底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.18mg)降解0.5g壳聚糖的水解能力，而降解相同量的壳聚糖约需要木瓜蛋白酶20mg，理论上效率提高100倍以上；具有良好的工业应用前景。
