本发明提供了一种酶催化合成含有保护基的核苷的方法及组合物。其中,该方法包括:利用嘧啶核苷磷酸化酶或尿嘧啶核苷磷酸化酶,以及嘌呤核苷磷酸化酶,催化底物合成含有保护基的核苷;底物包括底物核苷、底物碱基和底物磷酸盐,底物碱基上含有保护基;嘧啶核苷磷酸化酶包括与SEQ ID NO:1所示的蛋白质PyNP具有80%以上同源性的蛋白质;尿嘧啶核苷磷酸化酶包括与SEQ ID NO:2所示的蛋白质UP具有80%以上同源性的蛋白质;嘌呤核苷磷酸化酶包括与SEQ ID NO:3、7或8所示的蛋白质PNP具有80%以上同源性的蛋白质。能够解决现有技术中的尚无生物合成法生产含有保护基的核苷的问题,适用于酶催化领域。
本发明提供了一种阿糖类核苷一锅法生物合成的方法及组合物。其中,阿糖类核苷一锅法生物合成的方法包括:底物、尿嘧啶核苷磷酸化酶或嘧啶核苷磷酸化酶、以及嘌呤核苷磷酸化酶,共同混合后进行生物合成,一锅法直接制备获得阿糖类核苷。尿嘧啶核苷磷酸化酶包括SEQ ID NO:1所示的UP;嘧啶核苷磷酸化酶包括SEQ ID NO:2所示的PyNP;嘌呤核苷磷酸化酶包括SEQ ID NO:3所示的PNP;底物包括阿糖尿苷和底物碱基。能够解决现有技术中生物合成两步法制备阿糖类核苷操作复杂的问题,适用于酶催化领域。
本发明提供了一种酶催化合成嘌呤核苷的方法及组合物。其中,该方法利用嘌呤核苷磷酸化酶以及如下任一种酶:嘧啶核苷磷酸化酶或胸苷磷酸化酶,催化底物合成嘌呤核苷;底物包括底物核苷和底物碱基;嘧啶核苷磷酸化酶包括PyNP,PyNP为SEQ ID NO:1所示的蛋白质;胸苷磷酸化酶包括TP,TP为SEQ ID NO:2所示的蛋白质;嘌呤核苷磷酸化酶包括PNP,PNP为SEQ ID NO:3所示的蛋白质。能够解决现有技术中的利用酶法合成嘌呤核苷产量低的问题,适用于酶催化领域。