本发明提供了一种禽流感病毒血凝素抗原及表达其的CHO细胞株、制备方法和疫苗,涉及生物技术领域,该禽流感病毒血凝素抗原为具有如SEQ ID NO.1所示序列表达的血凝素蛋白,作为抗原具有广谱性的优点,并且该血凝素蛋白为真核细胞表达的蛋白,避免了损失该抗原的构象型的抗原表位。上述禽流感病毒血凝素抗原的制备方法和表达上述禽流感病毒血凝素抗原的细胞株可以获得具有广谱性和抗原免疫原性好的血凝素蛋白。上述禽流感病毒血凝素抗原的疫苗,该疫苗生产成本低,免疫效力高,免疫3‑4周龄SPF鸡后,14日即可检测到H5亚型抗原测定HI抗体几何平均滴度(GMT)均不低于1:64,优于常规疫苗。