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[发明专利]一种人工microRNA干扰载体及其构建方法和应用-CN201910137196.1有效
发明人： 李佛生;唐琳;徐莺;陈放 -专利权人：四川大学
申请日： 2019-02-25 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种针对水稻OsAGO17基因的人工microRNA干扰载体，该干扰载体以pre‑amiR‑OsAGO17159质粒和pHB质粒为原料，经过酶切和酶接处理并转化大肠杆菌感受态后得到。本发明中干扰载体的构建是先根据osa‑miR159a设计引物并以水稻为模板进行扩增；再筛选出特异靶向水稻OsAGO17基因的人工小分子RNA；然后合成相应引物并进行PCR扩增，用筛选出的amiRNA替换pre‑miR159a中成熟miR159a/miR159a*的序列，并转化大肠杆菌感受态，得重组质粒；最后对重组质粒和pHB质粒进行酶切和酶接处理，并转化大肠杆菌感受态，得人工microRNA干扰载体。
一种人工 microrna 干扰载体及其构建方法应用

[发明专利]一种快速灵敏检测小分子RNA的方法-CN201410471164.2有效
发明人：陈放;李佛生;毛强;詹诚;唐琳 -专利权人：四川大学
申请日： 2014-09-16 - 公布日： 2017-03-29 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速灵敏检测小分子RNA的方法，属于分子生物领域，包括以下步骤（1）提取、纯化待检测小分子RNA；（2）探针设计探针用生物素或地高辛进行标记；（3）液相杂交将所述待检测小分子RNA与所述探针在缓冲液中进行杂交，用外切酶切除未杂交的多余单链后进行凝胶电泳；（4）转膜将电泳后的凝胶上的杂交产物转移到固相支持物（如尼龙膜，纤维素膜）上；（5）抗体孵育将步骤（4）所得到的含有杂交产物的固相支持物与特异性抗体进行孵育杂交；（6）信号检测。本方法最低可以检测0.005fmol的miRNA，灵敏度比现有技术提高了至少10倍。本方法检测速度快，可实现高通量检测和定量检测。
一种快速灵敏检测分子 rna 方法

[实用新型]高熔点金属原子束发射源-CN99227855.4无效
发明人：蔡惟泉;曾庆林;李传文;李佛生;霍芸生;王育竹 -专利权人：中国科学院上海光学精密机械研究所
申请日： 1999-07-15 - 公布日： 2001-03-14 - 主分类号： G01N21/71 文献下载
摘要：一种高熔点金属原子束发射源,含有置于顶上带炉盖的周围有冷却水管的炉体内部中心的加热管。加热管内有盛放原子束金属材料的坩埚。加热管管壁中部有原子束喷孔。对准原子束喷孔的加热管的防辐射层上有大开孔,对准大开孔的炉体上有侧筒。由加热管内发射的原子束流通过原子束喷孔,大开孔和侧筒喷向真空使用系统。本实用新型避免了大电流和冷却水的真空过渡,结构紧凑,操作方便,发射源中心温度可达到2300℃。
熔点金属原子束发