本发明涉及鉴定黄颡鱼和瓦氏黄颡鱼及其杂交子一代的SRAP分子标记、试剂盒和鉴定方法及应用，属于水产养殖的杂交品种选育技术领域。本发明所述SRAP分子标记的扩增用引物为：核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物Me3和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的反向引物Em3。本发明提供的分子标记，能够较为简单、准确地区分出黄颡鱼、瓦氏黄颡鱼与其杂交子一代黄颡鱼，从而增加亲本选育与苗种培育效果。
本发明公开了鳜鱼生长性状相关的SNP分子标记、引物及应用，所述分子标记是位于序列SEQ ID NO:1自5’端起第131位的SNPg.131GA和150位的SNPg.150AC。与现有技术相比，本发明具有以下优点：(1)本发明所述的SNP位点可以进行分子标记辅助育种，不受鳜鱼的年龄、性别等限制，可用于鳜鱼的早期选育，显著促进鳜鱼的育种进程；(2)本发明采用两处SNP分子标记位点作为判断依据，且通过一对引物即可判断鳜鱼的生长性状，操作方便且结果准确可靠。
本发明公开了一种鳜鱼耐低氧性状相关SNP分子标记及其应用，包括分子标记SNP1和分子标记SNP2；所述分子标记SNP1位于如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列自5’端起的第1919位，该处碱基为T或C；所述分子标记SNP2位于如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列自5’端起的第4784位，该处碱基为T或C。本发明公开的SNP位点与低氧胁迫下鳜鱼存活率显著相关，该SNP 1919位TT基因型和4784位TC基因型的个体耐低氧能力显著强于基因型为TC和TT的个体，可以进行分子标记辅助育种，不受鳜鱼的年龄、性别等限制，可用于鳜鱼的早期选育，显著促进鳜鱼的育种进程和运输中低氧条件下的存活率，且方法准确可靠，操作简便。
本发明提供一种鉴定黄颡鱼脂肪肝程度的试剂盒及其鉴定方法，涉及水产生物技术领域，本发明所述鉴定黄颡鱼脂肪肝程度的试剂盒，包括miR‑484特异性上游引物和通用反向引物；所述miR‑484特异性上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明研究表明，黄颡鱼体内miR‑484的表达量与脂肪肝发生程度呈负相关，通过本发明提供的miR‑484特异性上游引物以及通用下游引物可快速检测出黄颡鱼的miR‑484表达量，进而精确的判断黄颡鱼脂肪肝程度，为精确给药提供基础。
本发明提供了一种反义RNA序列组合及其在生产败育罗非鱼中的应用，属于分子生物学与繁育生物学技术，所述反义RNA序列组合包括类固醇生成因子SF1‑1和SF1‑2的反义RNA；所述Anti‑SF1‑1‑I、Anti‑SF1‑1‑II、Anti‑SF1‑2‑I和Anti‑SF1‑2‑II的核苷酸序列分别如SEQ ID No.1～SEQ ID No.4所示。本发明所述方法将反义RNA片段通过受精孔导入卵子，实现有效而精确的靶向干预调控基因的表达，操作简单，卵子损伤极小，成功率高，繁育后代表型稳定，具有极强的应用前景。
本发明提供了一种miR‑92促进剂及其注射剂的制备方法和应用，属于水产生物技术领域，所述miR‑92促进剂为单链小RNA；所述单链小RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，具体为：5’‑AAUUGCACUCGUCCCGGCCUGC‑3’；所述单链小RNA的3’末端进行胆固醇修饰，3’末端四个碱基CUGC位置分别加入四个硫代骨架进行修饰，5’末端两个碱基AA位置加入两个硫代骨架进行修饰，全链进行2’甲基化修饰。本发明的miR‑92促进剂能够有效增强鱼体内miR‑92的表达，从而抑制其靶基因CaSR的表达；通过精准靶向分子生理干预，可以有效的增强巨噬细胞活性，提高其抗链球菌感染能力。
