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[发明专利]一种葡萄糖脱氢酶突变体、其制备方法及其应用-CN202210566524.1有效
发明人： 景成宇;黄琪;俞志豪 -专利权人：可孚医疗科技股份有限公司
申请日： 2022-05-23 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明提供一种葡萄糖脱氢酶突变体，该葡萄糖脱氢酶突变体的氨基酸序列如SEQ IDNO.4所示，该葡萄糖脱氢酶突变体通过将位于362位和位于428位的酪氨酸进行突变成苯丙氨酸得到，既能提高底物专一性，又能保持良好的最大反应速率。本发明还提供一种葡萄糖脱氢酶突变体的制备方法，具体是将海枣曲霉中位于362位和位于428位的酪氨酸进行突变得到。本发明还提供一种含上述葡萄糖脱氢酶突变体的组合物。本发明还公开了上述葡萄糖脱氢酶突变体在血糖检测中的应用。
一种葡萄糖脱氢酶突变体制备方法及其应用

[发明专利]一种β受体阻滞剂类外消旋体药物的拆分方法-CN202310430322.9在审
发明人：蒋玉仁;杨婷婷;景成宇;熊芳姣;尹咏琪;陈祥雨 -专利权人：中南大学
申请日： 2023-04-21 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C07B57/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种β受体阻滞剂类外消旋体药物的对映选择性反胶团萃取拆分方法。所述拆分方法是以N‑烷酰基取代的手性氨基酸在难溶于水的有机溶剂中形成的反胶团为手性识别萃取剂，选择识别外消旋体水溶液中的一种β受体阻滞剂对映异构体而被萃取至反胶团，而不被识别的另一种对映异构体留在水相，分离反胶团相和水相得到β受体阻滞剂的两种光学异构体。所述的β受体阻滞剂拆分方法，具有对映选择性高、拆分工艺简单、工艺操作简便、反胶团可重复使用和拆分成本低等特点，适合规模化拆分的要求。
一种受体阻滞剂类外消旋体药物拆分方法

[发明专利]一种对映选择性反胶团萃取拆分外消旋体化合物的方法-CN202310430190.X在审
发明人：蒋玉仁;杨婷婷;景成宇;熊芳姣;陈祥雨;尹咏琪 -专利权人：中南大学
申请日： 2023-04-21 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： C07B57/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种对映选择性反胶团萃取拆分外消旋体化合物制备手性化合物的方法。所述拆分方法以手性氨基酸表面活性剂在难溶于水的非水溶剂中形成反胶团，对水相中外消旋体化合物中的对映体实现选择性萃取而分离外消旋体化合物。所述的对映选择性反胶束萃取拆分外消旋体化合物制备手性化合物的方法，具有拆分工艺简单、工艺操作简便、对映选择性高、反胶团可重复使用和拆分成本低等特点，适用规模化拆分的要求，为手性拆分开辟了新途径。
一种选择性反胶团萃取拆分外消旋体化合物方法

[发明专利]一种葡萄糖脱氢酶酶活测定方法-CN202211359401.7在审
发明人：俞志豪;景成宇 -专利权人：可孚医疗科技股份有限公司
申请日： 2022-11-02 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12Q1/32 文献下载
摘要：本发明公开了一种葡萄糖脱氢酶酶活测定方法，包括以下步骤：S1.在PMS反应溶液中加入待测的葡萄糖脱氢酶液，反应完成后立即加入酸调节溶液pH≤3.0终止葡萄糖脱氢酶反应，离心、去除上清液保留沉淀；S2.取DCIP检测溶液，测量DCIP检测溶液在600nm处的初始吸光值，在S1的沉淀中加入DCIP检测溶液，得到混合溶液，反应结束后再次测量混合溶液在600nm下的反应后吸光值，将反应后吸光值与初始吸光值的差值代入DCIP标准曲线计算得参与反应的DCIP摩尔质量，计算得葡萄糖脱氢酶的酶活数值。本发明使测量数据保持真实性，不会因操作过快过慢或者设备反应时间等其他因素导致实验结果的偏差过大。控制反应进行方向，最大限度的控制副反应，避免其影响实验结果。
一种葡萄糖脱氢酶测定方法

[发明专利]一种可溶性微针的制备方法及所得可溶性微针-CN202211503684.8在审
发明人：左慧;景成宇 -专利权人：可孚医疗科技股份有限公司
申请日： 2022-11-28 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： A61K9/00 文献下载
摘要：本申请涉及一种可溶性微针的制备方法及所得可溶性微针，可溶性微针的制备方法包括依次进行的制备针头、填充温度敏感凝胶和制备背衬。利用离心、半凝胶状材料的表面张力，形成具有空穴的微针。再将能够负载水溶性药物的温度敏感混合液填充空穴；且这种具有特殊浓度的温度敏感混合液在制备、填充过程中始终以膏状凝胶的状态存在，不会溶解微针主体，但在正常人体温度下，温度敏感混合液发生相变，从膏状凝胶变为液态，一方面释放足量的水以溶解微针，另一方面，若负载药物，则将药物释放。同时，温度敏感混合液制备、填充时所需温度不会造成蛋白、多肽类药物失活。具有快速溶解微针、提高释放药物速率、不影响负载药物活性等优点。
一种可溶性制备方法所得

[发明专利]一种磁珠法纯化复性包涵体蛋白的方法-CN202211057812.0在审
发明人：俞志豪;景成宇 -专利权人：可孚医疗科技股份有限公司
申请日： 2022-08-30 - 公布日： 2022-10-14 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明提供了一种磁珠法纯化复性包涵体蛋白的方法，具体包括：对样品蛋白的预处理：将包涵体蛋白置于变性液中变性溶解，离心，取上清液，获得处理好的样品蛋白；GSH偶联磁珠纯化复性样品蛋白：将GSH偶联磁珠置于离心管中，用第一缓冲液进行清洗；将清洗后的GSH偶联磁珠与样品蛋白混合，加入还原稀释液，磁吸附，弃去上清液；用还原稀释液清洗GSH偶联磁珠，磁吸附，弃去上清液；加入第二缓冲液，磁吸附，取出上清液，获得纯化复性后的样品蛋白。本发明的优点在于，采用本发明提供的磁珠法纯化复性包涵体蛋白的方法，能够提高纯化复性的效率，避免常规复性方法的复性时间较长、溶液消耗量大的问题。
一种磁珠法纯化复性包涵蛋白方法

[发明专利]一种去除重组蛋白内毒素的方法-CN202210686277.9在审
发明人：黄微;黄琪;景成宇;廖经练;刘丽霞 -专利权人：可孚医疗科技股份有限公司
申请日： 2022-06-16 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C07K1/16 文献下载
摘要：本发明提供了一种去除重组蛋白内毒素的方法，包括步骤S1、对第一填料柱进行第一预处理；步骤S2、上样；步骤S3、去除待处理样品中的内毒素，先采用第二平衡液冲洗上样后的第一填料柱，直至流穿液280nm紫外吸收回到基线，再采用体积分数为10％‑60％的异丙醇冲洗上样后的第一填料柱，直至流穿液280nm紫外吸收回到基线，以去除待处理样品中的内毒素，获得结合在第一填料柱上的粗制蛋白；所述第二平衡液包括体积分数为0.5％‑1.25％的曲拉通X‑114。本发明将TritonX‑114与异丙醇组合使用，以提高对内毒素的去除率，且降低去除成本。
一种去除重组蛋白内毒素方法

[发明专利]一种湿粘接固化剂及其制备方法和应用-CN202210776210.4在审
发明人：蒋玉仁;韩婷;景成宇;杨婷婷;熊芳姣 -专利权人：中南大学
申请日： 2022-07-01 - 公布日： 2022-08-26 - 主分类号： C07C217/28 文献下载
摘要：本发明公开了一种湿粘接固化剂及其制备方法和应用，包括:(1)将二胺类化合物、缩水甘油醚类化合物按摩尔比1:(0.1～1.1)进行反应，制得所述湿粘接固化剂；(2)将湿粘接固化剂与环氧树脂、增韧剂、促进剂、偶联剂按(30～70):100:(0～40):(0～10):(0～5)的重量份配比，混合均匀，制得胶粘剂；(3)通过将胶粘剂涂覆到潮湿或水下待粘结物表面实现粘结。本发明的湿粘接固化剂疏水性适当、水下不流失、固化速度快、固化性能好，制备简单，原料来源广泛、环保性好。
一种湿粘接固化剂及其制备方法应用

[发明专利]一种微氧诱导大肠杆菌发酵重组蛋白质的方法-CN202210613419.9在审
发明人：黄琪;黄微;景成宇;廖经练;刘丽霞 -专利权人：可孚医疗科技股份有限公司
申请日： 2022-05-31 - 公布日： 2022-08-05 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种微氧诱导大肠杆菌发酵重组类人源胶原蛋白质的方法，包括菌种活化、种子液的培养和分批补料发酵，其特征在于，所述分批补料发酵的过程包括：细胞快速繁殖阶段：将二级种子液接种至基础发酵培养基中进行培养；在培养过程中，溶氧维持在30％‑33％，通过向发酵液中补加第一种补料培养基来控制基因工程菌的比生长速率在0.1‑0.5之间；微氧诱导表达重组蛋白阶段：向发酵液中流加乳糖诱导基因工程菌表达蛋白，并将第一种补料培养基更换为第二种补料培养基；根据发酵液中的溶氧量进行反馈补料以及流加乳糖诱导剂，溶氧维持在0％‑5％，直至发酵结束。
一种诱导大肠杆菌发酵重组蛋白质方法

[实用新型]一种微生物发酵尾气处理装置-CN202220541976.X有效
发明人： 景成宇;俞志豪;廖经练 -专利权人：可孚医疗科技股份有限公司
申请日： 2022-03-14 - 公布日： 2022-08-05 - 主分类号： B01D5/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种微生物发酵尾气处理装置，包括废气处理腔，所述废气处理腔一端设置有快拆式法兰接口，所述废气处理腔远离所述快拆式法兰接口的一端设有用于过滤尾气的过滤装置，所述废气处理腔的内部于快拆式法兰接口与所述过滤装置之间设置有冷凝片，所述冷凝片上设置有用于流通尾气的通孔；本实用新型基于“小孔注入”理论以及阻抗扩展和吸声的扩声原理，使噪音逐步衰减以达到静音的目的；利用增大接触面，提高热交换效率以达到冷凝蒸汽目的；以高效便捷的更换过滤填料的方式去除异味和残留水分，保证滤器使用效果的同时提高滤器使用寿命。
一种微生物发酵尾气处理装置

[发明专利]一种重组类人胶原蛋白工程菌的构建方法-CN202110299465.1在审
发明人：张敏;景成宇;康俪义;刘丽霞 -专利权人：可孚医疗科技股份有限公司
申请日： 2021-03-22 - 公布日： 2021-06-18 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开一种重组类人胶原蛋白工程菌的构建方法，具体包括：重组类人胶原蛋白基因序列的设计，具体是：以选取的类人胶原蛋白III的氨基酸序列为基础；根据大肠杆菌的偏好密码子设计出编码重组类人胶原蛋白的基因序列；将重组类人胶原蛋白片段与载体的酶切连接，得到酶切产物；将酶切产物用琼脂糖凝胶进行电泳得到目的条带；将目的条带切胶，进行纯化回收得到类人胶原蛋白片段；将类人胶原蛋白片段与载体进行连接得到类人胶原蛋白片段连接产物；将类人胶原蛋白片段连接产物热转化大肠杆菌感受态细胞得到重组类人胶原蛋白工程菌。采用本发明方法所得重组类人胶原蛋白对人皮肤成纤维细胞和人皮肤角质形成细胞均具有诱导增殖的作用。
一种重组胶原蛋白工程构建方法

[发明专利]一种纳米金－纤维素纳米复合体的制备方法-CN201711273751.0有效
发明人：刘志明;吴文健;胡碧茹;叶宗煌;景成宇;王文浩 -专利权人：中国人民解放军国防科技大学
申请日： 2017-12-06 - 公布日： 2020-06-30 - 主分类号： C08L1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种纳米金－纤维素纳米复合体的制备方法，利用金的含氯酸或盐与NMMO之间发生的氧化还原反应，通过生成的纳米金粒子表面与再生纤维素分子间的物理、化学结合作用，实现纳米金－纤维素纳米复合体的原位制备。本发明制备过程简单易行、操作方便、制备技术可控、无污染、成本低。所制备的纳米金－纤维素纳米复合体纯度高、尺寸均一、分散性好，可制备用于催化、吸附的气凝胶纳米材料，或作为支架材料高效负载活体细胞，并通过纳米金网络化形成灵敏的电化学传感网络，从而作为生化传感基质与组织工程支架材料用于仿生视网膜等人工组织的构造和传感。
一种纳米纤维素复合体制备方法

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