一种茎环引物辅助的等温核酸扩增技术，其特征在于，按下列步骤进行：a、SPA的引物设计：首先针对模板设计两条普通引物，即正向引物FP和反向引物BP；b、设计好普通引物后，再在FP和BP的5’端添加茎环序列，形成一对茎环引物，即正向茎环引物SFP和反向茎环引物SBP；c、SPA引物混合液液配制：SPA的扩增引物由普通引物FP、BP和茎环引物SFP、SBP混合而成；d、SPA缓冲液配制2×SPAMix：称取氯化钾，硫酸铵，七水硫酸镁，甜菜碱，Tris‑HCl，dNTP，1.0mL100倍稀释的SYBR green Ⅰ，吐温‑20，充分溶解并定容，每管分装‑20°C保存；e、SPA反应液配制：SPA反应为10‑50µL体系。本方法具有操作简单、快速灵敏、经济实惠等优点，可实现核酸的快速扩增和检测，特别适用于现场检测和快速筛查。
