本发明公开了一种用于扩增鸟类IFNA基因CDS序列的引物及其方法,所述引物包括序列号为SEQ ID NO.1的DNIFNA‑F和序列号为SEQ ID NO.2的DNIFNA‑R。所述方法包括:(1)提取待测样品的总基因组DNA;(2)采用所述引物对步骤(1)中提取的总基因组DNA进行PCR扩增;(3)对步骤(2)扩增后的产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。本发明通过设计一对特异性PCR引物,对待测样品通过一次PCR扩增,经琼脂糖凝胶电泳检测是否有条带,从显示判定扩增效果,且所用的模板可从动物肌肉组织中提取,大大降低了取样的难度。
本发明公开了一种红嘴相思鸟核基因引物及其测序方法和应用,所述引物包括第一引物对、第二引物对和第三引物对,所述第一引物对包括序列号为SEQ ID NO.1的RAG‑F1‑17和序列号为SEQ ID NO.2的RAG‑R1‑533;所述第二引物对包括序列号为SEQ ID NO.3的RAG‑F2‑996和序列号为SEQ ID NO.4的RAG‑R2‑2024;所述第三引物对包括序列号为SEQ ID NO.5的RAG‑F3‑1945和序列号为SEQ ID NO.6的RAG‑R3‑2779。本发明所得到的引物有着非常好的扩增功能,对红嘴相思鸟核基因rag1的扩增,最后均能获得明亮的条带,有利于后续研究大规模用该引物进行扩增。
本发明公开了一种用于扩增星头啄木鸟磁感应受体蛋白基因ISCA1片段的引物及其方法,所述引物包括第一引物对和巢式PCR引物,所述第一引物对包括序列号为SEQ ID NO.1的PIC‑2L‑F和序列号为SEQ ID NO.7的PIC‑2L‑R。所述方法包括如下步骤:(1)提取待测样品的总基因组DNA;(2)将总基因组DNA采用第一引物对进行PCR扩增;(3)步骤(2)扩增后的产物采用巢式PCR引物进行二次扩增;(4)对步骤(3)二次扩增后的产物进行检测。本发明可准确、简便、快速获取星头啄木鸟ISCA1基因的长片段序列。
本发明公开了一种粘质沙雷氏菌磷脂酶A1基因扩增、测序方法及其引物,所述引物包括第一引物对和第二引物对,所述第一引物对包括序列号为SEQ ID NO.1的KLSERF3和序列号为SEQ ID NO.2的KLSERR3;所述第二引物对包括序列号为SEQ ID NO.3的KLPERF4和序列号为SEQ ID NO.4的KLSERR4。所述方法包括粘质沙雷氏菌的总DNA的提取;设计两对专用引物;对PCR产物进行测序;对测序结果进行序列拼接,获得plaA、plaS全基因序列。本发明方法技术具有速度快,实用性强,成本低,重复性好,能快速有效地获得plaA、plaS全基因序列。