本发明公开了一种检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的试剂盒,它包括SEQ ID NO1~2、SEQ ID NO3~4和SEQ ID NO5~6所示引物对,分别特异扩增猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的基因。本发明还公开了SEQ ID NO1~2、SEQ ID NO3~4和SEQ ID NO5~6所示引物对在制备检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的试剂中的用途。本发明检测试剂盒可以准确、有效的检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒,且特异性强、灵敏度高、耗时短,检测快速,应用前景良好。
本发明提供了一种重组猪流行性腹泻病毒ORF3蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了该蛋白的用途及一种ELISA检测试剂盒。本发明的重组蛋白,抗原性、免疫原性好;以其作为包被抗原建立的ELISA检测试剂盒,可以准确检测猪流行性腹泻病毒,同时本发明试剂盒的特异性强、灵敏度高、简单、快速,制备方法简单,成本低廉,为PEDV的诊断、普查和免疫检测提供一种新选择,临床应用前景良好。
本发明公开了包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的重组沙门氏菌在制备预防猪病毒性腹泻的药物中的用途,还公开了一种由包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的重组沙门氏菌和药学上可接受的辅料或者载体制备而成的预防猪病毒性腹泻的疫苗。本发明制备得到了同时携带PEDV和TGEV S双基因的重组减毒沙门氏菌SL7207(pVAXD-Sp/St),其免疫后可以同时激发产生针对PEDV和TGEV的特异性抗体,保护性好,将其制成疫苗口服免疫后,可以促进T细胞增殖,刺激机体产生针对TGEV和PEDV的特异性抗体以及γ-干扰素、IL-4等细胞因子,保护性强,并且稳定好,临床应用前景优良。
本发明公开了一种检测抗猪流行性腹泻病毒抗体的ELISA检测试剂盒,它是以氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的重组猪流行性腹泻病毒N蛋白为抗原,检测待检样品中是否含有抗猪流行性腹泻病毒的抗体。本发明还公开前述试剂盒的使用方法和用途。本发明由重组猪流行性腹泻病毒N蛋白组成的试剂盒,可以有效检测抗猪流行性腹泻病毒抗体检测的特异性强、灵敏度高、简单、快速等特点,可用于临床检测猪是否携带猪流行性腹泻病毒,应用前景良好。
本发明公开了一种如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,公开了包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的重组载体、重组菌。本发明包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的重组沙门氏菌SL7207(pVAXD-N-Sa)免疫,可同时诱导产生针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的S蛋白和N蛋白的两种特异性抗体,具有双基因的免疫功能,免疫效果更全面,诱导的抗体水平高,可对猪传染性胃肠炎提供更全面的免疫保护作用,临床应用前景优良。
本发明公开了包含SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的重组沙门氏菌在制备预防猪流行性腹泻疾病的药物中的用途,还公开了一种由包含SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的重组沙门氏菌和药学上可接受的辅料或者载体制备而成的预防猪流行性腹泻疾病的疫苗。本发明疫苗可产生的针对猪流行性腹泻病毒的特异性抗体水平高,对猪流行性腹泻疾病有良好的保护作用,临床应用前景优良。