本发明具体涉及一种烟酰胺核糖激酶突变体及其编码基因和应用。所述的烟酰胺核糖激酶突变体的氨基酸序列与氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的野生型烟酰胺核糖激酶相比,在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的第22位、第178位、第104位、第157位、第115位、第165位、第52位、第146位进行单突变、两两联合突变、三个联合突变或四个联合突变中的任意一种突变。该烟酰胺核糖激酶突变体与野生型酶相比,酶活和热稳定性均得到了显著提高,可作为生物催化剂,转化底物烟酰胺核糖生成烟酰胺单核苷酸,能显著减少反应时间和酶的使用量,降低生产成本,提高NMN收率,具有大规模工业应用前景。