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[发明专利]一种猪类圆环病毒实时荧光定量PCR检测方法-CN202111421961.6在审
发明人：宋长绪;刘献辉;李赞;张歆明;徐舸;王琳;徐铮;张乐宜;刘燕玲 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2021-11-26 - 公布日： 2022-01-11 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开一种猪类圆环病毒实时荧光定量PCR检测方法，包括以下步骤：（1）根据PCL病毒的上传基因组序列设计特定的引物，并构建了目的基因质粒做标准品；（2）再进行敏感性验证；（3）最后进行特异性鉴定分析。本发明的检测方法特异性高，敏感性高，可用于用来监测病毒的流行情况。
种猪圆环病毒实时荧光定量 pcr 检测方法

[发明专利]一种可用于猪伪狂犬病毒复制的猪滋养层系的感染鉴定-CN202110855478.2在审
发明人：宋长绪;刘献辉;洪林君;张歆明;徐舸;熊谋康;张乐宜;刘艳玲;徐铮 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2021-07-28 - 公布日： 2021-11-02 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明公开一种可用于猪伪狂犬病毒复制的猪滋养层系的感染鉴定，采用永生化猪胚胎滋养层细胞作为一种新颖的细胞器来研究猪伪狂犬病毒和繁殖障碍疾病的联系，永生化的滋养层细胞系可高效/稳定的传代，且培养体系成熟。本发明的细胞系能支持PRV的复制，确定了PRV对永生化猪胚胎滋养层细胞能较好的感染，引起细胞病变，且与PRV感染传代细胞PK15的TCID50相差不到一个滴度，可以用于PRV的传代及受体方面，PRV引起繁殖障碍疾病等方面的机制等研究。且本发明中传代滋养层细胞系的建立对于猪相关病毒的垂直传播研究及猪育种方面的相关研究有重要意义。
一种用于狂犬病毒复制滋养感染鉴定

[发明专利]一种可供PEDV复制用的原代子宫内膜细胞系及其分离方法-CN202110523944.7在审
发明人：宋长绪;洪林君;刘献辉;周臣;张歆明;徐舸;刘燕玲;张乐宜 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2021-05-13 - 公布日： 2021-08-10 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开一种可供PEDV复制用的原代子宫内膜细胞系及其分离方法，所述的原代子宫内膜细胞系通过以下步骤获得：（1）取健康的成年母猪子宫，用含有双抗的PBS缓冲液冲洗干净，剪开子宫内膜，PBSS缓冲液冲洗干净；（2）采取猪子宫内膜上皮，将其剪至1mm3的小块，用PBS缓冲液清洗后，加入两倍体积的0.1%胶原蛋白酶（0.1mg/ml），消化2小时，期间晃动使其能均匀消化；随加入等体积含有10%血清的细胞培养基终止其消化；（3）采用100nm的细胞筛过筛，500g离心5min，弃上清，沉淀为猪子宫内膜上皮细胞；（4）将沉淀加入培养基，重悬培养，得到的猪子宫内膜细胞，继续传代7‑8次，或者将其冻存到液氮中存放。本发明的细胞系能实现PEDV对原代猪子宫内膜细胞能较好的感染。
一种 pedv 复制子宫内膜细胞系及其分离方法

[实用新型]一种用于保定仔猪的多功能型小车-CN201920343553.5有效
发明人：班艳芳;冯军森;刘燕玲;张乐宜;梁鹏帅;孟张丽;宋长绪 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2019-03-18 - 公布日： 2020-06-02 - 主分类号： A61D3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于保定仔猪的多功能型小车，包括车箱和至少四个车轮，车轮均设置在车箱底部，车箱尾部设有推杆，车箱前部上端设有托盘，托盘上匹配有器材储存槽，车箱两侧上端设置有保定装置，保定装置包括设置在车箱两侧外壁上端的第一保定结构以及可拆卸的套设在车箱侧壁上的第二保定结构，第一保定结构与第二保定结构分别设置有U型钢筋，通过调节U型钢筋间的距离，可实现针对不同大小的仔猪进行保定。本实验新型提供的多功能型小车结构简单，操作简便，可快速保定仔猪，以便一次性完成剪牙、断尾、打耳号、注射铁制剂、滴鼻免疫等操作，可减少仔猪应激产生，从而提高仔猪成活率，增加经济效益。
一种用于保定仔猪多功能小车

[发明专利]一种猪圆环病毒基因工程亚单位疫苗及其制备方法与应用-CN201710184557.9在审
发明人：宋长绪;王磊;刘业兵;申翰钦;张乐宜;刘艳玲;梁鹏帅;张鹏飞;刘相聪 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2017-03-24 - 公布日： 2018-10-09 - 主分类号： A61K39/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪圆环病毒基因工程亚单位疫苗及其制备方法与应用。通过克隆新型猪圆环病毒——PCV3的核衣壳蛋白，利用大肠杆菌或杆状病毒表达系统成功表达得到纯度较高的PCV‑Cap蛋白。利用该蛋白，本发明首次成功研制出了针对PCV3的亚单位疫苗，所制得的疫苗抗原纯度高、安全性好、免疫原性强，且对猪等动物没有致病性，抗原在中性PH的缓冲溶液中有很好的溶解性；同时，制备方法简单且成本低，适合工业化、规模化生产；为新型猪圆环病毒的防控提供了有效、有力的手段，在PCV3的防控领域具备广阔的应用前景。
制备基因工程亚单位疫苗猪圆环病毒圆环病毒种猪杆状病毒表达系统应用大肠杆菌规模化生产核衣壳蛋白亚单位疫苗缓冲溶液免疫原性疫苗抗原致病性中性PH 抗原蛋白克隆成功

[发明专利]一种新型猪圆环病毒3型的ELISA抗体检测试剂盒及其应用-CN201710184107.X在审
发明人：宋长绪;王磊;申翰钦;张乐宜;刘艳玲;梁鹏帅;张鹏飞;刘相聪 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2017-03-24 - 公布日： 2018-10-09 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种新型猪圆环病毒3型的ELISA抗体检测试剂盒及其应用。本发明的试剂盒组成包括：以重组PCV3 Cap蛋白作为包被抗原的酶标板、PCV3标准阳性血清、PCV3标准阴性血清、酶标二抗、洗涤液、血清稀释液、底物显色液A、底物显色液B和终止液；首次成功研制针对猪圆环病毒III型的新型PCV3 ELISA抗体检测试剂盒。本发明的试剂盒具有很好特异性和灵敏性，检测时间短，可同时检测大量样品；试剂盒保存时间长，稳定性好，为该病的诊断、检测和监测等提供了有力的工具。
抗体检测试剂盒猪圆环病毒试剂盒底物显色液检测标准阳性血清标准阴性血清血清稀释液包被抗原酶标二抗灵敏性酶标板洗涤液终止液应用诊断保存监测成功

[发明专利]猪呼吸与繁殖综合征病毒复制缺陷性病毒疫苗株的构建及应用-CN201310703956.3有效
发明人：宋长绪;蒋智勇;蔡汝健;李艳;刘燕玲;张乐宜 -专利权人：广东省农业科学院动物卫生研究所
申请日： 2013-12-19 - 公布日： 2014-05-07 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明属于疫苗制备领域，具体涉及一种猪呼吸与繁殖综合征病毒复制缺陷性病毒疫苗株的构建及应用。本发明中将猪呼吸与繁殖综合征病毒（PRRSV）Jiangxi-3株缺失部分Nsp9基因，得到复制缺陷性的Jiangxi-3株感染性克隆，同时将PRRSV的Nsp9基因克隆入Marc-145细胞，使其稳定表达Nsp9蛋白，将复制缺陷的PRRSV Jiangxi-3株感染性克隆转染表达Nsp9蛋白的Marc-145细胞，拯救出具有复制能力的rVJiangxi-3毒株，获得复制缺陷性PRRSV病毒疫苗株。本发明所获得的疫苗具有良好的免疫原性，可同时保护PRRSV经典株和高致病性变异株的感染。
呼吸繁殖综合征病毒复制缺陷性病疫苗构建应用

[发明专利]猪葡萄球菌脱落毒素分型的多重荧光PCR检测方法及试剂盒-CN201310655300.9有效
发明人：宋长绪;蒋智勇;张乐宜;蔡汝健;李艳;刘燕玲 -专利权人：广东省农业科学院动物卫生研究所
申请日： 2013-12-05 - 公布日： 2014-03-26 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪葡萄球菌4种脱落毒素分型（EXHA、EXHB、EXHC和EXHD）的多重荧光PCR方法及试剂盒，属于多重荧光PCR方法及试剂盒领域。本发明的方法采用了序列如SEQ ID NO:1-8所示的引物，还采用了序列如SEQ ID NO:9-12所示的Taqman探针。本发明还提供了猪葡萄球菌脱落毒素EXHA、EXHB、EXHC和EXHD多重荧光PCR检测试剂盒，该试剂盒包含上述引物和Taqman探针，还包括DNA聚合酶；PCR缓冲液；dNTP和水。本发明的试剂盒具有特异性强、灵敏度高、快速、操作方便、节约耗材、成本低廉等优点，可用于猪葡萄球菌4种脱落毒素的检测，用于科研及临床应用。
葡萄球菌脱落毒素多重荧光 pcr 检测方法试剂盒

[发明专利]一种检测猪葡萄球菌脱落毒素抗体的ELISA方法-CN201110030182.3无效
发明人：宋长绪;张乐宜;陈亚强;蔡汝健;李艳;刘燕玲 -专利权人：广东省农业科学院兽医研究所
申请日： 2011-01-28 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： G01N33/569 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测猪葡萄球菌脱落毒素抗体的ELISA方法。该ELISA方法是将一种猪葡萄球菌脱落毒素包被在基材上，用封闭液进行封闭，然后加入被检样品进行反应；再加入标记物标记的二抗反应，然后加入底物显色，最后根据P/N值来判定抗体的高低。本发明所述的ELISA方法敏感性好、重复性好、特异性高、操作方便。
一种检测葡萄球菌脱落毒素抗体 elisa 方法

[发明专利]一种猪葡萄球菌灭活疫苗及其制备方法与应用-CN201110029890.5有效
发明人：宋长绪;张乐宜;陈亚强;蔡汝健;李艳;刘燕玲 -专利权人：广东省农业科学院兽医研究所
申请日： 2011-01-28 - 公布日： 2011-06-15 - 主分类号： A61K39/085 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪葡萄球菌灭活疫苗及其制备方法与应用。本发明所述的制备方法为将表达脱落毒素的猪葡萄球菌进行纯培养，然后加入甲醛进行灭活，甲醛的终浓度为体积百分比0.6％；得到灭活的猪葡萄球菌；再将灭活的猪葡萄球菌和佐剂混合，得到猪葡萄球菌灭活疫苗。本发明首次提供了一种免疫效果较好的猪葡萄球菌灭活疫苗。该猪葡萄球菌灭活疫苗的制备方法简单，成本低。从而本发明所述的猪葡萄球菌灭活疫苗的市场前景广阔。
种猪葡萄球菌疫苗及其制备方法应用

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