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[发明专利]一种高效表达胶原蛋白水解酶的方法及其应用-CN202311103816.2在审
发明人：康振;刘平;陈坚;堵国成;李江华;王阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-08-30 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N9/54 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效表达胶原蛋白水解酶的方法及其应用，属于生物技术领域。本发明采用含有胶原蛋白水解酶突变体的宿主细胞进行发酵，生产的胶原蛋白水解酶酶活显著提升，且在宿主菌中的可溶性表达也大幅提升，实现了胶原蛋白水解酶的高效表达，其中，胶原蛋白水解酶突变体是将来自Bacillus cereus VD021的胶原蛋白水解酶经过截短改造得到。将该酶应用于不同来源胶原蛋白的水解催化时可将胶原蛋白全部转化为低分子量胶原蛋白肽，降解效果良好，具有重要的应用前景。
一种高效表达胶原蛋白水解方法及其应用

[发明专利]肝素裂解酶在枯草芽孢杆菌中的融合表达及其应用-CN202111203936.0有效
发明人：康振;陈佳敏;张琳;王阳;堵国成;陈坚 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-10-15 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明公开了肝素裂解酶在枯草芽孢杆菌中的融合表达及其应用，属于生物工程技术领域。本发明以枯草芽孢杆菌为宿主异源表达Bacteroides thetaiotaomicron来源的肝素裂解酶I，通过N端融合寡肽序列，优化启动子及5'UTR序列，并于BhepI基因C端用GGGGS短肽连接肝素裂解酶III的基因FhepIII，构建融合酶BhepI‑FhepIII，通过两者对肝素钠裂解能力的比较，发现融合酶得到的肝素分子量可低至1300Da以下，且其抗凝血活性更强，为肝素裂解酶在枯草芽孢杆菌中的工业化生产及低分子量肝素制备奠定了基础。
肝素裂解枯草芽孢杆菌中的融合表达及其应用

[实用新型]一种新型半导体托盘夹持装置-CN202223369804.8有效
发明人：康振;张志勇;赵珉;张仁勇;高胜清;苑浩;陈卫东 -专利权人：华恒半导体设备（苏州）有限公司
申请日： 2022-12-15 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： B65G47/90 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种新型半导体托盘夹持装置，包括托盘导向机构、运输机构和夹持机构，所述托盘导向机构上安装有运输机构，运输机构上安装有夹持机构，所述运输机构、夹持机构分别与PLC控制器电性连接；本实用新型通过设置有红外发射器和红外接收器，当托盘移动至红外发射器的一侧时，托盘将红外发射器发射的光遮挡，红外接收器接收不到红外发射器发射的信号，红外接收器将信号发送至PLC控制器，PLC控制器控制伺服电机停止工作，实现托盘高精度定位，便于准确对托盘以及芯片进行输送定位，有利于提高芯片输送精度；本实用新型通过设置有夹持机构，能够将托盘夹持固定在夹持机构上，从而提高了托盘输送的稳定性。
一种新型半导体托盘夹持装置

[发明专利]一种酶法合成UDP-葡萄糖醛酸和UDP-N-乙酰氨基葡萄糖的方法-CN202310852392.3在审
发明人：康振;陈坚;李佳莲;堵国成;王阳;胡立涛;胥睿睿 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-07-12 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖的体外酶法制备，属于生物工程及生物合成技术领域。本发明将不同来源的葡萄糖醛酸激酶GlcAK、UDP‑葡萄糖醛酸焦磷酸化酶USP、N‑乙酰己胺1‑激酶NahK、N‑乙酰葡糖胺激酶AmgK、UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶GlmU、聚磷酸激酶PPK的基因在大肠杆菌BL21(DE3)异源表达，得到的重组酶组合成功催化合成UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖。偶联ATP循环体系后，将反应体系扩大并提高底物浓度，50mL体系中UDP‑葡萄糖醛酸产量可达12.9g·L‑1，UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖产量可达18.2g·L‑1。本发明实现了UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖的高效催化合成，具有步骤简短，收率高，反应温和等优点，具有重要的应用前景。
一种合成 udp 葡萄糖醛酸乙酰氨基葡萄糖方法

[发明专利]一种基于调控sigma因子改变大肠杆菌细胞生长与代谢合成的方法-CN202310663758.2在审
发明人：周迪;康振;陈坚;堵国成;尹国斌 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-06-06 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于调控sigma因子改变大肠杆菌细胞生长与代谢合成的方法，属于生物技术领域。本发明通过过表达sigma因子实现对大肠杆菌全基因组基因的表达调控，以提高大肠杆菌的生长强度，进而强化其代谢物的生产。与其他调控方法相比，本发明无需额外表达异源元件，也不需要对目的基因进行改造，即可实现全基因组水平的表达调控。且经验证，利用本发明提升细胞生长和代谢产物合成的方法，可以显著提高5‑氨基乙酰丙酸的产量。
一种基于调控 sigma 因子改变大肠杆菌细胞生长代谢合成方法

[发明专利]一种N-磺酸化肝素前体寡糖的制备方法-CN202310567625.5在审
发明人：康振;陈坚;郗欣彤;堵国成;王阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-05-19 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： C12P19/26 文献下载
摘要：本发明公开了一种N‑磺酸化肝素前体寡糖的制备方法，属于生物工程技术领域。本发明利用肝素裂解酶III和不饱和葡萄糖醛酸酶对高分子量肝素前体的依次降解，成功制备获得不同聚合度的不饱和偶数寡糖和饱和奇数寡糖，并利用人源硫酸乙酰肝素双功能N‑脱乙酰/N‑磺基转移酶对特定聚合度的肝素前体寡糖进行了催化，获得了具有特定聚合度的N‑磺酸化肝素前体寡糖，为后续酶法催化获得肝素寡糖提供了底物来源。
一种酸化肝素寡糖制备方法

[发明专利]透明质酸酶突变体及其在水解硫酸软骨素中的应用-CN202310784916.X在审
发明人：康振;陈坚;堵国成;黄浩;张维娇;王阳;刘平 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-06-29 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N9/26 文献下载
摘要：本发明涉及透明质酸酶突变体及其在水解硫酸软骨素中的应用，属于生物工程技术领域。本发明的透明质酸酶突变体是将位于水蛭来源透明质酸酶的底物结合口袋中的氨基酸残基进行突变后得到的蛋白质，具体是以氨基酸序列SEQ ID NO.1所示的透明质酸酶为出发序列，将第65位的苯丙氨酸突变为丝氨酸；和/或将第180位苏氨酸突变为精氨酸。本发明应用定向进化技术和方法对透明质酸酶进行了改造，其中，所得双突变体对于硫酸软骨素的催化效率提高了15.9倍，并将其应用于低分子量硫酸软骨素的水解催化，具有重要的应用前景。
透明质酸酶突变体及其水解硫酸软骨素中的应用

[实用新型]一种新型半导体框架抓取和水平双向移栽装置-CN202223260932.9有效
发明人：高胜清;苑浩;陈卫东;康振;张志勇;赵珉;张仁勇 -专利权人：华恒半导体设备（苏州）有限公司
申请日： 2022-12-06 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： H01L21/677 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种新型半导体框架抓取和水平双向移栽装置，包括底板、输送机构和抓取机构，所述底板上安装有输送机构，输送机构上安装有抓取机构，所述抓取机构包括夹爪气缸、上部夹爪和下部夹爪，所述夹爪气缸的上表面和上部夹爪的下表面上均开设有让位槽，所述让位槽内部安装有限位凸块；本实用新型在磁铁的吸力作用下，磁铁吸住夹爪离合块，当钢质弹夹对金属框架移动阻力小于磁铁吸力时，金属框架未完全被推进钢质弹夹；当钢质弹夹对金属框架移动的阻力大于磁铁吸力时，金属框架完全被推进钢质弹夹并且被钢质弹夹一端阻挡，夹爪离合块与磁铁分离，从而可有效防止由于推力过大，导致的金属框架损坏。
一种新型半导体框架抓取水平双向移栽装置

[发明专利]一种大肠杆菌益生菌EcN无抗生素高效稳定表达体系构建与应用-CN202210653033.0有效
发明人：康振;王阳;赵琳琳;陈坚;堵国成;陈佳敏 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-06-09 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种大肠杆菌益生菌EcN无抗生素高效稳定表达体系构建与应用，属于基因工程技术领域。本发明通过截短EcN隐性质粒的一个或多个元件，得到pMUT1衍生质粒pMUT1’‑del‑Rop、pMUT1’‑del‑NikA、pMUT1’‑del‑Rop‑NikA以及pMUT2衍生质粒pMUT2’‑del‑MobB、pMUT2’‑del‑MobC、pMUT2’‑del‑MobD和pMUT2’‑del‑Hyp、pMUT2’‑del‑MobBCD‑Hyp。将这些质粒导入E.coli Nissle 1917衍生菌株中，在不含抗生素的条件中培养，可使质粒在宿主细胞中的稳定存在，且实现质粒上目的蛋白的稳定表达，可以稳定维持6.5～13天。隐性质粒的开发有望取代传统抗生素维持的质粒，对于构建新型无抗生素表达平台具有重要的意义。
一种大肠杆菌益生菌 ecn 抗生素高效稳定表达体系构建应用

[实用新型]应用于制氮设备高频切换密的阀位反馈型角座阀-CN202320902632.1有效
发明人：李宝存;康振 -专利权人：北京市飞达捷能气体分离技术有限公司
申请日： 2023-04-20 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： F16K1/00 文献下载
摘要：一种应用于制氮设备高频切换密的阀位反馈型角座阀，属于阀门设备技术领域，包括壳体，壳体内设置有执行机构，执行结构包括有活塞，活塞可在壳体内上下运动，活塞杆上侧装有圆柱撞块，阀门打开或关闭时圆柱撞块随活塞杆做直线运行，触发开阀位置和关阀位置的微动开关，实现干接点阀位反馈信号功能。本实用新型所提供的应用于制氮设备高频切换的阀位反馈型角座阀可以实现控制系统通过数字量输入接口采集阀门的实际状态，判断阀门对控制系统控制指令执行是否正确，通过这种结构优化设计，本实用新型控制系统通过采集上述信号能够对角座阀的阀芯工作状态进行准确判断，有助于提高设备运行稳定性。
应用于设备高频切换反馈型角座阀

[实用新型]应用于制氮设备高频切换的角座阀-CN202320904636.3有效
发明人：李宝存;康振 -专利权人：北京市飞达捷能气体分离技术有限公司
申请日： 2023-04-20 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： F16K1/00 文献下载
摘要：一种应用于制氮设备高频切换的角座阀，属于阀门设备技术领域，包括：壳体，壳体内设置有活塞；阀体，阀体设置有阀腔，于阀腔内设置有阀芯；连接管，连接管的上端与壳体连接、其内设置有上密封件，连接管的下端与阀体连接、其内设置有下密封件，于连接管的管身上并位于上密封件与下密封件之间设置有溢流孔、用于连接管内气体的排放。本实用新型在连接管上特别设置了溢流孔，如果控制气源发生泄漏而进入到连接管中，也可以从连接管的溢流孔中溢出到外界，而不会进入到阀体中对阀体内的介质气源造成污染。本实用新型所提出的上述结构优化，解决了传统角座阀所存在的控制气源泄漏而容易造成介质气源污染的问题。
应用于设备高频切换角座阀

[发明专利]一种基于APS为活性磺酸供体的合成和再生系统的构建方法-CN202310479710.6在审
发明人：康振;胥睿睿;王阳;李江华;堵国成;陈坚 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-04-28 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12P19/32 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于APS为活性磺酸供体的合成和再生系统的构建方法，属于生物技术领域。本发明提供了APS作为活性磺酸供体的新用途，并通过筛选不同的ATP的硫酸化酶，以及向反应体系中添加焦磷酸酶消除副产物焦磷酸，大大提高了APS的合成效率。进一步通过构建APS循环再生系统，实现了磺酸化修饰体系的构建，APS循环再生系统相比较PAPS再生系统有着路径更短、效率更高的优势，显著提高了磺酸化修饰效率并成功降低了合成成本。
一种基于 aps 活性供体合成再生系统构建方法

[发明专利]一种构建PAPS再生循环系统及应用的方法-CN202310486408.3在审
发明人：康振;胥睿睿;王阳;李江华;杨凤玲;堵国成;陈坚 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-04-28 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12P19/32 文献下载
摘要：本发明公开了一种构建PAPS再生循环系统及应用的方法，属于生物技术领域。本发明通过设计PAPS再生路径，构建了基于包含ATP合成、PAPS合成和AMP再生三个模块的PAPS再生系统，在廉价底物聚磷酸和MgSO4的参与下，成功在肝素、硫酸软骨素和磺酸海藻糖等磺酸化修饰合成反应中应用，大大提高了磺酸化修饰效率并降低了PAPS合成应用成本。本发明构建的PAPS再生系统各个模块也可以单独使用，实现一步合成ATP、一步合成PAPS和提高提高磺基转移酶的催化效率。
一种构建 paps 再生循环系统应用方法

[发明专利]一种产聚唾液酸的重组EcN大肠杆菌及其应用-CN202310453345.1在审
发明人：康振;王阳;胡珊;堵国成;陈坚 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-04-24 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种产聚唾液酸的重组EcN大肠杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明首先在大肠杆菌EcN(Escherichia coli Nissle 1917)中筛选异源表达聚唾液酸合酶neuD、neuB、neuA、neuC、neuE和neuS，通过替换转运蛋白KpsF、KpsE、KpsD、KpsU、KpsC、KpsS、KpsM、KpsT，摇瓶水平达到0.5g/L，发酵罐优化聚唾液酸产量达到7g/L。
一种唾液酸重组 ecn 大肠杆菌及其应用

[发明专利]一种微生物发酵法生产制备超高分子量透明质酸的方法-CN202110396678.6有效
发明人：康振;王阳;堵国成;汪昊;陈坚 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-04-13 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种微生物发酵法生产制备超高分子量透明质酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明在谷氨酸棒杆菌中游离表达透明质酸合酶编码基因pmhasA，构建了透明质酸的合成途径；采取弱化RBS强度的方法，弱化合酶pmHAS的表达；采取定点突变的策略理性改造透明质酸合成酶编码基因pmhasA；在谷氨酸棒杆菌中通过组合调控策略强化表达前体UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰葡萄糖胺的合成途径酶编码基因；对发酵工艺进行优化，采取低温发酵的策略；重组谷氨酸棒杆菌生产的透明质酸分子量达到5‑9MDa。本发明构建的重组谷氨酸棒杆菌适合于工业化生产应用。
一种微生物发酵生产制备超高分子量透明方法

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