本发明公开了一种编码重组人醛缩酶C的核苷酸序列,如SEQ ID NO.2所示,以及重组人醛缩酶C的表达载体和生产重组人醛缩酶C的工程菌。首先,在不改变氨基酸编码序列的情况下按照大肠杆菌偏好密码子进行核苷酸序列优化同时突变ACA密码子,使其在大肠杆菌中总表达量增加;其次,通过选择低温表达系统,利用在低温条件下,外源蛋白缓慢表达可增进蛋白的正确折叠,提高可溶性与稳定性的优点,使核苷酸序列在大肠杆菌中表达的重组人醛缩酶C占菌体总蛋白的50%以上,可溶性表达量达到总表达量的90%以上,而且表达的人醛缩酶C具有天然的折叠结构,可溶性高,纯化简单,成本低廉。