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[发明专利]一种大肠杆菌色氨酸酶突变体及其编码基因-CN201410494789.0有效
发明人：徐斌;杨为华;邓远德;杨金环 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2014-09-24 - 公布日： 2017-01-04 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明通过易错PCR的方法对野生型色氨酸酶基因进行改造，得到了一种大肠杆菌色氨酸酶突变体，该色氨酸酶突变体的酶活力相对于出发菌株提高了120倍。
一种大肠杆菌色氨酸突变体及其编码基因

[发明专利]卵磷脂在提高植物秸秆发酵生产乙醇产量中的应用-CN201410300598.6有效
发明人：李荣杰;杨为华;邓远德;徐斌;秦晴;张雪锋 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2014-06-25 - 公布日： 2016-11-23 - 主分类号： C12P7/10 文献下载
摘要：本发明提供了卵磷脂在提高植物秸秆发酵生产乙醇产量中的应用。本发明通过在酵母发酵培养基中添加30～100mg/L的卵磷脂，其它工艺控制条件一样，使以植物秸秆水解糖为底物发酵生产乙醇的得率达到0.47，乙醇含量达到14.56％(v/v)，而未添加卵磷脂的生产工艺中，乙醇的得率为0.40，乙醇含量为12.42％(v/v)，卵磷脂可显著提高乙醇发酵产量。该方法提高了植物秸秆发酵乙醇得率，为植物秸秆的充分开发利用提供了新思路，对于降低环境污染，保证粮食安全具有重要意义。
卵磷脂提高植物秸秆发酵生产乙醇产量中的应用

[发明专利]一种周期短产率高的L-赖氨酸发酵方法-CN201410036915.8有效
发明人：李荣杰;尚海涛;杨为华;邓远德;徐斌;戴嘉;张雪锋;秦晴;唐浩;张家泉;常珠侠;纪传侠;韩小芬 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2014-01-24 - 公布日： 2016-10-19 - 主分类号： C12P13/08 文献下载
摘要：本发明涉及一种周期短产率高的L‑赖氨酸发酵方法，采用分流方式将连续发酵工艺中排出的发酵液接入新的发酵培养基中，在流加碳源、氮源的条件下进一步发酵培养。经本发明所述发酵方法发酵L‑赖氨酸，周期为32h，产酸18.5%，转化率72%，效果显著。
一种周期短产率高赖氨酸发酵方法

[发明专利]一种从甜菜糖蜜中分离纯化甜菜碱的方法-CN201510999995.1在审
发明人：孙杨静;潘声龙;杨为华;纪传侠;潘成莉 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-12-25 - 公布日： 2016-05-11 - 主分类号： C07C229/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种从甜菜糖蜜中分离纯化甜菜碱的方法，该方法包括如下步骤：量取甜菜糖蜜，按照体积比1:1.5-2.0向其中加入温度50-60℃的纯水，搅拌均匀，得到稀释的料液；将稀释的料液进行微滤处理，得到甜菜碱的透过液和浓相；将得到的甜菜碱透过液进行纳滤处理，得到纳滤透过液和浓相；将纳滤透过液进行连续色谱处理，收集甜菜碱组分料液；将所述甜菜碱组分料液进行浓缩，结晶，离心，得到甜菜碱晶体；将所述甜菜碱晶体烘干，即得甜菜碱成品。本发明从甜菜糖蜜中分离纯化甜菜碱的方法是一种膜和色谱相结合的方法，采用先进的膜分离工艺取代了传统的离子交换树脂分离工艺，并通过对膜分离及色谱分离条件的优化，大大提高甜菜碱的纯度及收率。
一种甜菜糖蜜分离纯化甜菜碱方法

[发明专利]一种头孢菌素C酰化酶固定化酶制备方法-CN201511033291.5在审
发明人：汪本助;徐斌;穆晓玲;纪传侠;韩小芬 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2016-05-04 - 主分类号： C12N11/08 文献下载
摘要：本发明涉及一种头孢菌素C酰化酶固定化酶制备方法，所述方法包括以下步骤：(1)发酵培养头孢菌素C酰化酶生产菌并在发酵结束后收集获得发酵菌体；将发酵菌体与磷酸钾缓冲液接触混匀后进行破碎离心，收集离心上清液作为酶液；(2)在酶液中加入硫酸铝获得硫酸铝终浓度为0.001-0.01g/L的混合液1；将所述混合液1在40-50℃下加热30-60min后去除不溶物，获得混合液2；(3)将所述混合液2与载体在20-30℃下接触搅拌20-50h进行固定化反应获得固定化酶。利用本发明所提供的方法生产的头孢菌素C酰化酶固定化酶，最高可重复使用次数350次，最高酶活120U/g，经成本核算后可以进行大规模工业化生产，且能获得较高的经济效益。
一种头孢菌素酰化酶固定制备方法

[发明专利]马来酸顺反异构酶突变体及其编码基因与应用-CN201511033095.8在审
发明人：秦晴;许鹏;冯杰;徐斌;纪传侠;马丽 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2016-04-20 - 主分类号： C12N9/90 文献下载
摘要：本发明涉及蛋白质突变体，具体地涉及一种马来酸顺反异构酶突变体及其编码基因与应用。所述马来酸顺反异构酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示或经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等功能的由SEQ ID NO.4衍生的氨基酸序列。所述突变体与野生型马来酸顺反异构酶相比，具体的氨基酸序列的改变是：K51I(第51位赖氨酸变为异亮氨酸)，R177S(第177位精氨酸变为丝氨酸)，A212G(第212为丙氨酸变为甘氨酸)。经试验验证，该突变体的酶活力相对于野生型马来酸顺反异构酶提高了2.71倍。
马来顺反异构突变体及其编码基因应用

[发明专利]一种利用魔芋粉渣发酵生产柠檬酸的方法-CN201610014002.5在审
发明人：唐浩;杨为华;秦晴;张家泉;徐斌;张雪锋 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2016-01-05 - 公布日： 2016-04-20 - 主分类号： C12P7/48 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用魔芋粉渣发酵生产柠檬酸的方法，该方法是以黑曲酶为发酵菌株，利用魔芋粉渣为碳源加入培养基，替代原始工艺中常用的碳源如玉米粉、木薯粉等，并在一定条件下进行批式发酵，发酵完成后，柠檬酸产量达到了150g/L，糖酸的转化率大于93％。本发明所用魔芋粉渣为魔芋精粉生产过程中的废弃物，方法简单有效，变废为宝，节约成本，适用于大规模发酵生产法柠檬酸。
一种利用魔芋发酵生产柠檬酸方法

[发明专利]一种提纯盐酸赖氨酸的方法-CN201510896726.2在审
发明人：孙杨静;杨为华;潘声龙;徐斌;张雪锋 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-12-04 - 公布日： 2016-04-20 - 主分类号： C07C227/40 文献下载
摘要：本发明涉及一种从盐酸赖氨酸发酵液中提取盐酸赖氨酸的方法。所述方法包含以下步骤：将盐酸赖氨酸发酵液采用微孔陶瓷膜进行过滤，得微滤液和膜浓相；将所述微滤液采用活性炭进行脱色，得脱色液；将所得脱色液经真空浓缩，调酸，降温结晶，得湿晶体和结晶母液；其中所述湿晶体进一步离心烘干，得盐酸赖氨酸晶体；将所得膜浓相和所得结晶母液合并，所得混合液经真空浓缩、喷雾干燥，得到含量在65％以上的盐酸赖氨酸。采用本方法提取盐酸赖氨酸，不仅提取率高，可以制得高纯度的盐酸赖氨酸；而且提取工艺操作简单、绿色环保。
一种提纯盐酸赖氨酸方法

[发明专利]一种氨基葡萄糖的制备方法-CN201510969047.3在审
发明人：汪阳;杨为华;徐斌;张雪锋 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-12-17 - 公布日： 2016-04-06 - 主分类号： C12P19/26 文献下载
摘要：本发明涉及发酵工程，特别涉及一种氨基葡萄糖的制备方法，包括以下步骤：(1)将氨基葡萄糖生产菌按接种量0.4～0.6％接入种子培养基并培养至对数期；(2)将步骤(1)得到的产物按接种量5～10％接入发酵培养基，控制溶氧为20～40％、pH为7±0.2，在温度为37±0.5℃的条件下进行发酵，待葡萄糖的浓度减少到0.01～0.2g/L时，开始流加浓度为59～61％的葡萄糖溶液，并在葡萄糖溶液中添加微量元素母液，葡萄糖溶液的最大流加速度为0.5～1.6％，维持发酵液中残糖浓度为0.05～0.8g/L至发酵终点。本发明提供的制备方法，使得氨基葡萄糖的含量以及转化率得到显著提高。
一种氨基葡萄糖制备方法

[发明专利]一种L-丙氨酸的发酵方法-CN201510971002.X在审
发明人：杨金环;许鹏;李维理;穆晓玲;王芳;赵亚飞 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-12-18 - 公布日： 2016-03-30 - 主分类号： C12P13/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种L-丙氨酸的发酵方法；包括在L-丙氨酸发酵过程中通入CO₂气体；尤其利用酒精发酵产生的CO₂通入L-丙氨酸气升式发酵罐，代替传统发酵罐机械式搅拌发酵生产L-丙氨酸，发酵水平达到70g/L以上。本发明既能保护大气环境，减少温室效应，又节约了发酵生产成本。
一种丙氨酸发酵方法

[发明专利]一种L-丙氨酸末道母液的纯化方法-CN201510734714.X在审
发明人：张毅;杨为华;王超;孙杨静;荀新星;徐斌;张雪锋 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-10-30 - 公布日： 2016-02-24 - 主分类号： C07C229/08 文献下载
摘要：本发明属于微生物发酵液后处理技术领域，尤其涉及一种L-丙氨酸末道母液的纯化方法，该方法第一步调节母液的pH值至6-8，过滤除去析出的固体杂质，得粗滤液，第二步对粗滤液进行微滤处理，得透滤液，第三步对透滤液进行色谱处理，色谱处理采用钙离子交换树脂，得产品料液，第四步，对产品料液进行浓缩，结晶，离心，干燥得到L-丙氨酸产品；此种纯化方法能够去除母液中的大量杂质，L-丙氨酸的收率能够达到90％，纯度高达95％，该方法能够提高L-丙氨酸发酵生产工艺的收率，另外，经过纯化处理后排出的废水有机物含量低，对环境污染小。
一种丙氨酸母液纯化方法

[发明专利]一种用于提高柠檬酸发酵水平的方法-CN201510701813.8在审
发明人：秦晴;杨为华;唐浩;张家泉;徐斌;张雪锋 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-10-23 - 公布日： 2016-02-03 - 主分类号： C12P7/48 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于提高柠檬酸发酵水平的方法，将发酵种子接入发酵培养基中，发酵过程中，向发酵后期的发酵液中一次性接入部分处于发酵前期的发酵液；所述的发酵前期为从发酵开始至发酵指数达到最高发酵指数的90％的时间段；所述的发酵后期为从发酵指数下降至最高发酵指数的90％直至发酵结束的时间段。此方法仅通过向处于发酵后期的发酵液中接入处于发酵前期的发酵液，其他发酵条件不变，以此来提高柠檬酸的发酵产酸，降低残总糖，提高转化率，缩短发酵周期，本方法操作简单易行，可以显著降低粮耗和生产成本。
一种用于提高柠檬酸发酵水平方法

[发明专利]一种γ-氨基丁酸的合成方法-CN201510465093.X在审
发明人：张飞;杨为华;徐斌;张雪锋 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-07-30 - 公布日： 2015-12-09 - 主分类号： C07C229/08 文献下载
摘要：本发明提供了一种γ-氨基丁酸的合成方法，包括：1)完全溶解α-吡咯烷酮；2)加入固体碱催化剂进行催化反应；3)反应结束后，将反应液过滤，滤液经浓缩后进行降温结晶，晶体离心后经烘干得到γ-氨基丁酸成品。所述固体碱催化剂为KNH₂/Al₂O₃、KF/Al₂O₃、KOH/Al₂O₃、Na/C₂Al₂O₃、NaOH/C₂Al₂O₃中的一种，优选为KF/Al₂O₃。
一种氨基丁酸合成方法

[发明专利]一种利用纳滤膜从柠檬酸发酵液中提取柠檬酸的方法-CN201510509124.7在审
发明人：李荣杰;杨为华;王超;潘声龙;徐斌;张雪锋 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-08-18 - 公布日： 2015-12-02 - 主分类号： C07C59/265 文献下载
摘要：本发明属于柠檬酸提取领域，具体涉及一种利用纳滤膜从柠檬酸发酵液中提取柠檬酸的方法。本发明采用陶瓷膜和纳滤膜组合利用的膜技术对柠檬酸发酵液进行提取。本发明柠檬酸的提取率可高达90.7％，提取后的柠檬酸纯度可高达99.2％。与传统的钙盐法相比，本发明操作简单、提取率高、无副产物；同时本发明简化了生产条件，对环境污染小，适用于工业化大规模生产。
一种利用滤膜柠檬酸发酵提取方法

[发明专利]L-色氨酸的发酵生产方法-CN201510484456.4在审
发明人：李荣杰;杨为华;毕从胜;徐斌;张雪锋 -专利权人： 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-08-06 - 公布日： 2015-11-25 - 主分类号： C12P13/22 文献下载
摘要：本发明公开了一种L-色氨酸的发酵生产方法，其是利用保藏编号为CICC 10303的大肠杆菌基因工程菌作为发酵菌株，以木薯为原料制得的葡萄糖液作为发酵培养基中的碳源以及补料时流加的糖液，在一定条件下进行补料批式发酵生产L-色氨酸。本发明通过控制培养基组成及发酵条件，使色氨酸产量达到了40g/L，利用木薯制备葡萄糖液，大大降低了生产成本，通过连续流加葡萄糖液，使培养基中葡萄糖含量基本保持恒定，从而提高发酵产酸水平和糖酸转化率，适合于大规模发酵生产L-色氨酸。
色氨酸发酵生产方法