本发明公开了鸭疫里默氏杆菌的rpsL突变基因及其应用，rpsL突变基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，含有该突变基因的鸭疫里默氏杆菌对链霉素不敏感，可以用于构建鸭疫里默氏杆菌无痕缺失候选菌株，利用该菌株无痕缺失无需通过抗性基因来替代目的基因，大大降低了缺失株的耐药性，可以用于基因缺失疫苗的制备；同时可以在基因组内缺失多个基因，提高了基因功能研究的效率，具有很好的应用前景。
本发明公开了鸭瘟病毒UL15基因exonI重组蛋白及其制备方法和应用，鸭瘟病毒UL15基因exonI重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，其制备方法是将含有重组表达载体的大肠杆菌Rossetta在含有Amp的LB液体培养基中培养过夜，然后取菌液转接入新鲜的含Amp的LB液体培养基中，培养至OD600为0.4时，加入IPTG诱导培养，得含鸭瘟病毒UL15基因exonI重组蛋白的培养液，所得重组蛋白具有免疫活性，能够与鸭瘟病毒抗体特异性结合，可作为鸭瘟病毒抗体的检测试剂；还可以作为抗原制备多克隆抗体，为鸭瘟病毒的检测奠定了基础。
本发明涉及一种用于大肠杆菌‑鸭疫里默氏杆菌的高效穿梭质粒、制备方法及其应用，穿梭质粒的基因序列如SEQ ID NO.1所示，是在质粒pPM5的基础上进行改造的，先将鸭疫里默氏杆菌复制起始基因(pRA0726 ori)克隆到此质粒中，然后将转移位点(oriT)克隆到上述质粒中，使此穿梭质粒能够通过高效的结合转移导入鸭疫里默氏杆菌中，且能稳定的复制。为了方便基因片段插入穿梭质粒上且提高基因的表达量，将在穿梭质粒上克隆一段带有多个内切酶位点的高表达启动子序列(High EXP)。本发明所得穿梭质粒可以在鸭疫里默氏杆菌中稳定存在，用于基因敲除株的回补。质粒较小且具有多个多克隆位点，易于操作。结合转移效率非常高。
本发明公开了一种1型鸭甲肝病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测试剂盒及方法，所述试剂盒包括由核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的下游引物组成的引物对，以及核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的探针。采用本发明所述试剂盒可用于广泛检测1型鸭甲肝病毒，检测时间短，检测成本低，重复性好，灵敏度高；本发明检测的靶点具有单一特异性，提供的引物对和探针对不含目的基因的样品，均无扩增信号，具有良好的特异性；另外，引物对和探针检测RNA灵敏度可达49copies/μL，具有良好的灵敏度。
