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[发明专利]一种脐带血细菌和真菌快速检测的方法-CN202310299802.6在审
发明人：李永志;贾晓鹏;孙旭燕;庄肃静;马艳飞;王歌;王琦;雒猛;刘诗泽;周芙玲 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2023-03-25 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明涉及血液快速检测方法技术领域，特别涉及一种脐带血细菌和真菌快速检测的方法。本发明提出的针对脐带血中细菌和真菌污染的检测方法，首先进行脐血中人源DNA去除以及去人源DNA的微量提取，再使用数字PCR方法对提取得到的微量细菌和真菌DNA进行高精度检测，以此实现对脐血中微量细菌和真菌的检测。
一种脐带血细菌真菌快速检测方法

[发明专利]一种低氧型脐带间充质干细胞的培养方法-CN202210989888.0有效
发明人：张学娟;孙旭燕;高宗圣 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2022-08-18 - 公布日： 2022-12-20 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及一种低氧型脐带间充质干细胞的培养方法。本发明的一种低氧型脐带间充质干细胞的培养方法，其通过对人类脐带间充质干细胞进行低氧培养处理的相关工艺和质量控制标准进行明确，低氧处理结果显著增加了细胞存活期，显著提高了间充质干细胞中VEGF分泌水平，延长了细胞进入机体后可发挥效用作用的时间，进一步达到改善治疗效果的作用。
一种低氧脐带间充质干细胞培养方法

[发明专利]一种冷冻脐带血NK细胞体外扩增方法-CN202210820210.X有效
发明人：刁小娟;石超群;王帅;孙旭燕;庄肃静;李小博;杜普;韩志远;洪凡真 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2022-07-13 - 公布日： 2022-10-25 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药技术领域，尤其是NK细胞扩增技术领域，特别涉及一种冷冻脐带血NK细胞体外扩增方法。本发明提供了一种冷冻脐带血NK细胞体外扩增方法，其通过优化冻存脐血复苏技术，同时使用活化的富血小板血浆代替胎牛血清，由此建立了一套稳定可靠且规范化的NK细胞制备体系，可显著提高NK细胞的数量和纯度，且具有较强的杀伤能力。
一种冷冻脐带血 nk 细胞体外扩增方法

[发明专利]一种增强脐带间充质干细胞分泌血管内皮生长因子的培养方法-CN202210792607.2有效
发明人：高宗圣;张学娟;柏秋露;孙旭燕;王花;吕玲;赵桂凤;刘瑞 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2022-07-07 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药领域，尤其是细胞治疗技术领域，特别涉及一种增强脐带间充质干细胞分泌血管内皮生长因子的培养方法。本发明是在传统的脐带间充质干细胞培养基中加入不同浓度和比例的TNF‑α、IFN‑γ因子进行激发，生长一段时间后，与未进行激发UC‑MSCs相比，细胞因子均有不同程度的增高，尤其是VEGF的分泌量增加了数十倍，细胞中VEGF基因含量增加数倍。本方法简单易行，对实验或生产条件要求不高并且适合不同来源的间充质干细胞进行大规模生产制备，为脐带间充质干细胞分泌更多的生长因子尤其是VEGF应用于治疗血管或皮肤修复方面提供了一种新的治疗手段。
一种增强脐带间充质干细胞分泌血管内皮生长因子培养方法

[发明专利]一种临床用自然杀伤细胞的制备方法-CN202210011909.1有效
发明人：刁小娟;宋芳;孙健;刘照军;孙旭燕;庄肃静;雒猛;杨卫娟;王龙;洪凡真 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2022-01-07 - 公布日： 2022-07-01 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种临床用自然杀伤细胞的制备方法，主要包括以下步骤：步骤一、从脐带血中分选CD34+标记的脐带血造血干细胞，并获得剩余单个核细胞；步骤二、剩余单个核细胞成份的优化；步骤三、NK细胞的培养和扩增；步骤四、细胞数量及细胞表型鉴定。本发明首先分离出脐带血中的自体血浆及单个核细胞，其次利用磁珠法分选出单个核细胞中以CD34+为表面标记的造血干细胞，获得造血干细胞的同时，也收获了除造血干细胞以外的剩余成份，用此剩余成份及自体血浆培养NK细胞，实现了资源的合理利用，使得同一份脐带血既可以进行造血干细胞回输，又可以培养出符合临床需求的具有抗肿瘤活性的NK细胞，适于广泛推广应用。
一种临床自然杀伤细胞制备方法

[发明专利]一种冻存脐带血来源调节性T细胞体外扩增优化方法-CN202110967022.5在审
发明人：于丽丽;王龙;张倩倩;庄肃静;雒猛;卢正海;马琛;孙旭燕 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2021-08-23 - 公布日： 2021-10-29 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种冻存脐带血来源调节性T细胞体外扩增优化方法，包括以下步骤：冻存脐带血复苏后经离心洗涤获得总有核细胞，之后将总有核细胞接种于预包被Anti‑human CD3抗体的培养皿中，添加诱导培养基进行诱导培养。在培养至第8天时经CD4磁珠分选纯化获得CD4+调节性T细胞，再继续进行第二阶段诱导培养扩增，最终获得高纯度调节性T细胞。本发明提供的方法能够自冻存脐带血中经体外扩增优化获得高纯度的调节性T细胞。本方法同样适用于新鲜脐带血调节性T细胞体外扩增优化培养。
一种脐带血来源调节细胞体外扩增优化方法

[实用新型]一种细胞培养袋的定量补液取液装置-CN202120120956.0有效
发明人：张文丽;李小博;庄肃静;王雪超;赵梅;宋芳;孙旭燕;崔可心;邓营营 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2021-01-18 - 公布日： 2021-10-19 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种细胞培养袋的定量补液取液装置，包括底箱、培养袋安装架和支撑杆，所述底箱的底面四个拐角处均设置有支撑脚，且每组支撑脚的底部均安装有滚轮，所述底箱的上端面设置有安装板，且安装板上垂直固定有支撑杆，所述支撑杆的杆体上部套置有上固定套环，且支撑杆杆体下部套置有下固定套环，所述支撑杆的杆体中部右侧安装有培养袋安装架。该细胞培养袋的定量补液取液装置，结构设置合理，顶盖的左右两端上的滑块分别连接在两边的直线滑轨上，以便内部液面下降时下滑，内部液面提高上滑，使用比较灵活，同时在培养袋安装架的前侧面两边都设置有刻度板，方便直接观察添液和取液的剂量，比较直观精确。
一种细胞培养定量补液装置

[实用新型]一种新型悬浮细胞培养瓶-CN202023116139.2有效
发明人： 孙旭燕;张学娟;高宗圣;王帅;刁小娟;孙健;宋芳;张文丽;马鑫鑫 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2020-12-22 - 公布日： 2021-09-28 - 主分类号： C12M3/02 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种新型悬浮细胞培养瓶，包括瓶体、瓶身、瓶顶、过滤结构和过滤管，所述瓶身上端与瓶顶固定连接，且瓶顶右上侧安装有右侧瓶颈，瓶顶左上侧安装有左侧瓶颈，同时左侧瓶颈端部螺接有取液盖，并且右侧瓶颈端部螺接有换液盖，所述过滤管固定连接在瓶顶内部右侧，且过滤管内部开设有固定腔，同时过滤管底部开设有安装腔，并且安装腔内部固定连接有尼龙滤网。该新型悬浮细胞培养瓶，尼龙滤网固接在右侧瓶颈底部的过滤管下端，悬浮细胞换液时可以直接通过尼龙滤网将废液倒出，而将细胞留在瓶中，之后直接补充新鲜细胞培养液即可，省去细胞离心的过程，避免了对细胞的损耗，节省了操作时间；降低实验成本，减少实验时间。
一种新型悬浮细胞培养

[实用新型]一种医用酒精棉球瓶-CN202022835196.X有效
发明人：刁小娟;刘明媚;王帅;孙旭燕;宋芳;孙健;李小博;李鹤;王毓宵 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2020-12-01 - 公布日： 2021-08-20 - 主分类号： B65D23/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种医用酒精棉球瓶，包括瓶体，所述瓶体的内部设置有镊子，且镊子的上端设置有通孔，所述通孔的上端设置有凸孔，且凸孔的上端设置有孔帽，所述孔帽的下端，且凸孔的右侧设置有瓶颈，且瓶颈的内部设置有瓶帽，并且瓶颈的下端设置有颈孔，所述瓶颈的右侧设置有把手，且把手的下端设置有拉杆，所述拉杆的下端连接有隔板，且隔板的右侧设置有隔腔，所述瓶体的内部设置有内壁，且内壁的内部设置有支撑槽，并且内壁的内侧设置有磁凸起，所述磁凸起之间设置有间隙，且间隙的右侧设置有磁球。该医用酒精棉球瓶，使酒精棉球中酒精在挥发时得到及时的添加，无需经过操作台外额外步骤，减少污染和浪费。
一种医用酒精棉球

[实用新型]一种悬浮细胞取样装置-CN202022857431.3有效
发明人：张学娟;孙旭燕;高宗圣;赵江宁;汪大琨;杜普;刘瑞;刁小娟;王帅 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2020-12-02 - 公布日： 2021-08-10 - 主分类号： C12M1/26 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种悬浮细胞取样装置，包括取样头、取样气囊、盖帽和取样装置，所述取样装置的上部设置有盖帽，且取样气囊的上端插入盖帽内，所述取样头的上端插入取样气囊内，且取样气囊内设置有双内搭塑料片，所述取样头的下端设置有取样针头，且取样头的外环面前侧设置有第一刻度线，并且取样头内开设有第一收纳腔，所述取样气囊内开设有第二收纳腔，且取样气囊的外环面前侧设置有第二刻度线，所述双内搭塑料片、取样气囊和盖帽均采用医用级LDPE材质。该悬浮细胞取样装置，结构设置合理，方便吸取或是转移细胞液，操作方便快捷，采用医用级LDPE原料，具有一定的弹性，可以在一定的角度内弯曲，方便运输，结构简单，成本低。
一种悬浮细胞取样装置

[发明专利]一种脐带血间充质干细胞培养方法-CN202011578876.6在审
发明人：刁小娟;刘明媚;王帅;魏于栋;赵丙春;孙旭燕;宋芳;孙健;李小博;杨卫娟;阳浩 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2020-12-28 - 公布日： 2021-03-26 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明提供的一种脐带血间充质干细胞培养方法，通过脐带血的采集和验收、脐带血的洗涤、自体脐带血富血小板血浆的制备与活化、脐带血单个核细胞的分离、Transwell小室预处理后培养脐带血间充质干细胞、脐带血间充质干细胞的纯化及扩增步骤。解决了现有技术必须用一定浓度的胎牛血清培养带来的各种弊端，并且用自己储存的富血小板血浆经过活化后培养自己的细胞，效率高、更安全和容易接受。整个过程免去添加各类因子等繁琐步骤，不仅操作简便，而且能够大大节省培养成本。
一种脐带血间充质干细胞培养方法

[发明专利]一种脐带组织高成活率的储运方法-CN202011424213.9在审
发明人：吕玲;张秀涛;王帅;李树建;孙旭燕;崔晓敏;宋君;雒猛 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2020-12-08 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开一种脐带组织高成活率的储运方法，包括以下操作步骤：(1)取间充质干细胞，培养基重悬后，平均重铺至四瓶，待细胞融合达90％以上时进行收获；(2)将培养瓶中的旧培养基倒掉，用生理盐水洗涤后去除剩余培养基，加入胰蛋白酶消化后，再加入生理盐水清终止消化，得到细胞消化液；(3)将细胞消化液进行离心，弃上清，洗去胰蛋白酶，得到间充质细胞；(4)将间充质细胞重悬后重复步骤(3)操作，得到间充质细胞沉淀，然后加入细胞储运液混匀后，放入储运箱中，进行细胞运输。本发明提供的一种脐带组织高成活率的储运方法，操作简单，成本低廉，可有效的保证脐带间充质干细胞在储运过程中的细胞成活率。
一种脐带组织成活率储运方法

[发明专利]一种脐带血干细胞高效复苏方法-CN202011415728.2在审
发明人：王帅;李树建;张秀涛;孙旭燕;王玉霞;杨卫娟;赵万龙;雒猛 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2020-12-07 - 公布日： 2021-02-23 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开一种脐带血干细胞高效复苏方法，包括以下操作步骤：(1)将脐带血复苏保护液预冷处理，然后将冻存脐带血从液氮罐里取出，将脐带血放入水浴锅中缓慢摇晃水浴复苏；(2)将融化后的复苏脐带血加入至复苏保护液中，进行离心；(3)离心后吸弃上清，去除红细胞与冻存液后再次加入复苏保护液，再次离心；(4)离心后吸弃上清，去除红细胞后加入复苏保护液重悬，取样记录细胞活率并计数；(5)继续向其中加入复苏保护液进行离心、弃上清，将复苏后的脐带血干细胞加入培养基中培养。本发明提供的一种脐带血干细胞高效复苏方法，可保证脐带血干细胞在复苏的过程中具有较高的成活率，有效的提升了脐带血干细胞复苏后的活性。
一种脐带血干细胞高效复苏方法

[实用新型]一种手持移液枪头装盒装置-CN201922296954.2有效
发明人：宋振涛;刘小盾;马鑫鑫;王玉;于丽丽;宋芳;孙健;孙旭燕 -专利权人：山东省齐鲁干细胞工程有限公司
申请日： 2019-12-19 - 公布日： 2020-10-16 - 主分类号： B01L9/00 文献下载
摘要：本实用新型要解决的问题是提供一种手持移液枪头装盒装置，该装置结构简单，造价低、易于制作，使用方便，工作效率高。其包括有上下开口贯穿的箱体，所述箱体下部沿着前后方向设有若干根均匀分布的枪头分隔条，相邻枪头分隔条的间隙小于枪头的支部外径并允许枪头的锥部穿过，每根枪头分隔条的前端为连杆，相邻连杆的间隙为出口并能允许枪头的支部穿过；所述箱体内设有能上下移动的压装组件，所述压装组件位于所述出口上方。
一种手持移液枪头装盒装

[发明专利]一种使用全悬浮技术生产猪传染性胃肠炎疫苗的方法-CN201610761464.3有效
发明人：禚宝山;魏联果;李营;张广;董海曼;周忠涛;孙旭燕 -专利权人：齐鲁动物保健品有限公司
申请日： 2016-08-30 - 公布日： 2020-07-24 - 主分类号： A61K39/225 文献下载
摘要：本发明涉及一种使用全悬浮技术生产猪传染性胃肠炎疫苗的方法。本发明涉及的ST细胞全悬浮培养的工艺，其关键技术在于ST细胞全悬浮驯化成功后可在生物反应器进行猪传染性胃肠炎病毒的大规模培养，具有操作简单、可控性强、培养效率和自动化程度高、不需要载体等优势，为细胞或疫苗的规模化生产提供了一条新的路径。
一种使用悬浮技术生产传染性胃肠炎疫苗方法

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