本发明公开了一种提高重组N-乙酰神经氨酸醛缩酶产量的方法。本发明所提供的N-乙酰神经氨酸醛缩酶基因为SEQ ID NO.1，本发明将大肠杆菌N-乙酰神经氨酸醛缩酶基因Neu5Ac克隆到原核表达载体pET28a上，获得高效表达N-乙酰神经氨酸醛缩酶的重组菌。通过优化发酵罐的溶氧、PH、搅拌速率以及补料条件，使酶的产量可以达到4.5g/L，酶活可以达到600-800U/mg。本发明提供的提高N-乙酰神经氨酸醛缩酶产量的方法，其操作简单，产量较高，纯度达到98％以上，具有较高的应用前景及开发价值。
本发明公开了一种提高人胱抑素C蛋白在大肠杆菌中可溶性表达量的发酵方法，该编码基因的核苷酸序列SEQ ID NO：1，重组人胱抑素C的表达方法，包括以下步骤：直接合成并优化密码子，将重组人胱抑素C插入到原核表达载体的多克隆位点，构建重组表达质粒，将重组表达质粒转化到表达宿主菌大肠杆菌，筛选阳性克隆，得工程菌，工程菌经发酵、诱导、分离、纯化，得重组人胱抑素C。通过优化发酵罐的溶氧，pH，搅拌速率，补料条件，使蛋白的产量可以达到0.4g/L，且活性和天然胱抑素C蛋白相近。本发明提供的重组胱抑素C发酵放大生产方法，操作简单，且表达的胱抑素C产量高达0.4g/L，纯度达到95％以上，同时利用重组人胱抑素C蛋白制备多抗血清和标准品，目前未见表达效率更好的报道。
一种重组酵母胱硫醚bata合酶催化中心的表达及生产放大，该编码基因的核苷酸序列SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2，重组酵母胱硫醚beta合酶催化中心353个AA催化中心，将重组催化中心插入到原核表达载体的多克隆位点，构建重组表达质粒，转化到表达宿主大肠杆菌，筛选阳性克隆，获得工程菌，工程菌经发酵、诱导、分离、纯化，得重组胱硫醚beta合酶。通过优化发酵罐的溶氧、PH、搅拌速率以及补料条件，使酶的产量可以达到5g/L且酶活可以达到600-700U/mg。本发明提供的重组胱硫醚beta合酶催化中心的表达方法以及放大生产策略，其操作简单，而且表达的胱硫醚beta合酶产量高达5g/L，纯度达到95％以上，目前未见表达效率更好的报道。
