本发明公开了一种鉴别革兰氏阳性菌的引物探针组合、试剂盒和方法，所述引物探针组合包括正向引物1、正向引物2、反向引物1、反向引物2和探针所示的序列；所述正向引物1具有SEQ ID NO.1所示序列，所述正向引物2具有SEQ ID NO.2所示序列，所述反向引物1具有SEQ ID NO.3所示序列，所述反向引物2具有SEQ ID NO.4所示序列，所述探针具有SEQ ID NO.5所示序列。本发明提供的鉴别革兰氏阳性菌的引物探针组合以细菌核糖体RNA区域为靶区域，通过下载和比对该区域细菌序列，在特异性保守区筛选并设计出最佳的革兰氏阳性菌引物、探针，实现对革兰氏阳性菌类型进行快速、准确检测。
本发明公开了一种检测多种病原体的多重PCR引物探针组合及其检测方法，所述多重PCR引物探针组合包括SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.90所示的核苷酸序列。通过采用本申请的多重PCR引物探针组合能够对流感嗜血杆菌、单核细胞增生李斯特菌、卡他莫拉菌、大肠埃希菌、脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎克雷伯菌、白色念珠菌、百日咳鲍特菌、粪肠球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、铜绿假单胞菌、热带念珠菌、肺炎链球菌、嗜肺军团菌、金黄色葡萄球菌、鮑曼不动杆菌、COVID‑19、HRV等总计30种病原体进行检测，实现了对常见病原体的同时、快速、准确、多指标检测。
