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[发明专利]一种新型体内生成CAR-T的方法-CN202310030083.8在审
发明人： 姜云瀚;郭应强 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2023-01-10 - 公布日： 2023-06-30 - 主分类号： A61K39/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种新型体内生成CAR‑T的方法，包括如下步骤：采用无缝克隆技术将CAR基因序列片段插入到逆转录病毒载体pCDH中，通过测序鉴定挑选构建正确的CAR序列菌液；将构建好的病毒载体和CAR质粒共转染HEK293T细胞；在均一透明溶液中添加适量的含CAR基因的逆转录病毒；获得修饰的脂质纳米颗粒；通过目标抗体表面的伯胺引入巯基，诱导每个抗体形成1个巯基；用去离子水洗脱，来去除未反应的组分，最终得到SATA修饰的抗体；通过硫醚偶联反应偶联到修饰的脂质纳米颗粒的顺丁烯二酰亚胺一端；去除未偶联抗体的脂质纳米颗粒。本发明利用脂质纳米颗粒的技术在机体内实现体内生产CAR‑T细胞，并将其应用到相应的疾病中，该技术体系可能改善CAR‑T细胞的功效和持久性。
一种新型体内生成 car 方法

[发明专利]一种荧光淬灭恢复剂及其应用-CN202110125784.0有效
发明人： 姜云瀚 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2021-01-29 - 公布日： 2023-03-17 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明公开了一种荧光淬灭恢复剂及其应用，涉及免疫分析和生物技术应用领域，按体积份数计，由下列组分组成：35‑45份无水乙醇，55‑65份PBS溶液，荧光淬灭恢复剂的应用，包括如下步骤：A1：使用PBS溶液清洗荧光淬灭的组织切片或细胞样本，清洗次数为1‑2次，每次5min；A2：在组织切片或细胞样本上滴加所述的荧光淬灭恢复剂，室温孵育10min；A3：用PBS溶液清洗组织切片或细胞样本3次，每次5min，得到荧光淬灭恢复后的组织切片或细胞样本。可在荧光淬灭的免疫荧光样本上重新染色，保证重新染色免疫荧光样本的荧光能很好的显示，能增加免疫荧光实验的容错率，节约样本数量，节省实验时间。
一种荧光恢复及其应用

[发明专利]一种巨噬细胞消化液及专用于巨噬细胞的消化方法-CN202210951528.1在审
发明人： 姜云瀚 -专利权人： 姜云瀚
申请日： 2022-08-09 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C12N5/0786 文献下载
摘要：本发明公开了一种巨噬细胞消化液及专用于巨噬细胞的消化方法，包括下列组份：乙二胺四乙酸3‑6份、乙二醇双(2‑氨基乙基醚)四乙酸4‑8份、胎牛血清8‑12份和磷酸缓冲缓冲液90‑100份，一种专用于巨噬细胞的消化方法，消化方法包括如下步骤：配置成消化液原液，过滤后低温保存6个月，然后得到巨噬细胞消化液；将巨噬细胞培养瓶中加入巨噬细胞消化液；将加入巨噬细胞消化液的巨噬细胞培养瓶摇晃，使得巨噬细胞消化液均匀覆盖培养瓶；将DMEM培养基加入到静置后的巨噬细胞培养瓶中，对巨噬细胞消化液进行中和，转移到离心管中；将转移到离心管中的溶液进行室温离心3min；离心后，在离心管中加入DMEM培养基完成巨噬细胞的消化。本发明使巨噬细胞消化率高、分化率低。
一种巨噬细胞消化液专用消化方法

[实用新型]一种用于装配发动机缸体碗型塞片的专用工具-CN202122690930.2有效
发明人：李洋;郑启明;李朋;周维;尹学浩;孙鑫;温春富;姜云瀚 -专利权人：哈尔滨东安汽车动力股份有限公司
申请日： 2021-11-04 - 公布日： 2022-05-31 - 主分类号： B25B27/02 文献下载
摘要：一种用于装配发动机缸体碗型塞片的专用工具属于发动机缸体装配技术领域。该专用工具解决了装配后产品质量一致性差、装配效率低、返修率高的现有问题。导向定位板上设置有两个导向套筒安装孔，导向套筒安装在任一导向套筒安装孔中，装配冲头活动安装在导向套筒中，装配冲头的装配端镶嵌设置有用于吸附碗型塞片的仿形磁石，敲击装配冲头的尾部使其在导向套筒中进行轴向移动，即可完成碗型塞片的装配工作。该专用工具产品装配一致性高、缩短装配时间、生产效率高；此专用工具操作性好，降低作业者劳动强度的同时保证产品的质量。
一种用于装配发动机缸体碗型塞片专用工具

[发明专利]基于标记抗体的活细胞免疫荧光染色方法-CN202110338114.7在审
发明人： 姜云瀚 -专利权人： 姜云瀚
申请日： 2021-03-30 - 公布日： 2021-06-25 - 主分类号： G01N1/30 文献下载
摘要：本发明公开了基于标记抗体的活细胞免疫荧光染色方法，包括如下步骤：A1：将活细胞免疫荧光辅助剂和opt‑MEM培养液按体积份数比1:12.5充分混合，室温孵育15min，得到混合液1；A2：将活细胞抗体和opt‑MEM培养液按体积份数比1:50充分混合，室温孵育15min，得到混合液2；A3：将混合液1和混合液2按体积份数比54:52充分混合，室温孵育15min，得到混合液3；A4：将混合液3加入到目的细胞培养基中，得到混合液4，混合液3和目的细胞培养基体积份数比为53:100；A5：将混合液4培养4‑6小时，用PBS溶液清洗2‑3次，完成染色。本发明不需要进行细胞膜打孔，利用抗体，使得活细胞的荧光染色范围和固定细胞免疫荧光染色范围一样；同时，该方法只需要4‑6个小时即可，时间明显缩短。
基于标记抗体细胞免疫荧光染色方法

[发明专利]用于流式细胞学检测的活细胞胞内或核内染色方法-CN202110338117.0在审
发明人： 姜云瀚 -专利权人： 姜云瀚
申请日： 2021-03-30 - 公布日： 2021-06-25 - 主分类号： G01N1/30 文献下载
摘要：本发明公开了用于流式细胞学检测的活细胞胞内或核内染色方法，包括如下步骤：A1：将活细胞免疫荧光辅助剂和opt‑MEM培养液按重量份数比1:12.5充分混合，室温孵育15min，得到混合液1；A2：将活细胞抗体和opt‑MEM培养液按重量份数比1:50充分混合，室温孵育15min，得到混合液2；A3：将混合液1和混合液2按重量份数比54:51充分混合，室温孵育15min，得到混合液3；A4：将混合液3加入到含有PBS溶液的活细胞悬液中，得到混合液4，所述混合液3和PBS溶液重量份数比为21:40，混合液4在温度5.37℃、避光环境中孵育30分钟，用PBS溶液清洗2遍，完成染色。本发明不需要进行细胞膜打孔，保证了细胞活性；同时，该方法只需要1个小时即可，时间明显缩短。
用于细胞学检测细胞染色方法

[发明专利]一种免疫荧光封片液去除剂及其应用-CN202110126846.X在审
发明人： 姜云瀚;陈赛 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2021-01-29 - 公布日： 2021-05-14 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明公开了一种免疫荧光封片液去除剂及其应用，涉及免疫分析和生物技术应用领域，按体积份数计，由下列组分组成：25‑35份异丙醇，65‑75份双蒸水，一种免疫荧光封片液去除剂的应用，其特征在于，包括如下步骤：A1：使用所述的去除剂滴加在组织切片上的盖玻片周边，去除盖玻片；A2：使用所述去除剂对组织切片在室温下清洗2‑3次，每次5分钟；A3：用PBS溶液清洗组织切片1次，清洗时间5min，得到去除免疫荧光封片液的组织切片。本发明能去除封片液后，再次对组织切片或者细胞样本进行操作，增加免疫荧光实验的容错率，节约样本数量，节省实验时间。
一种免疫荧光封片液去除及其应用

[发明专利]一种黑胶虫去除剂及其应用-CN202110148816.9在审
发明人： 姜云瀚 -专利权人： 姜云瀚
申请日： 2021-02-03 - 公布日： 2021-04-09 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种黑胶虫去除剂及其应用，涉及生物技术应用领域，按重量份数计，由下列组分组成：8‑8.5份氯化铵、0.5‑1.5份碳酸氢钾、0.03‑0.04份EDTA二钠、995‑1005份双蒸水，免疫荧光封片液去除剂的应用，包括如下步骤：A1：用0.25%的胰酶消化贴壁细胞成单细胞悬液；A2：对单细胞悬液进行离心处理，离心处理后，使用如权利要求1所述的去除剂将单细胞悬液重新沉淀，室温静置3‑5min，再用10‑15mL的PBS溶液稀释，得到稀释液；A3：将稀释液离心处理，离心处理后，用培养基重新悬浮再培养，完成黑胶虫的去除。本发明应用该去除剂去除黑胶虫的原理与抗生素杀菌原理不同，是一种物理方法，因此杀菌更快更彻底，而且成本也会更低。
一种黑胶虫去除及其应用

[实用新型]一种用于加工发动机缸体曲轴安装止推面的专用刀具-CN202020376638.6有效
发明人：李洋;韩阳;宋琦;尹学浩;李朋;郑启明;孙鑫;姜云瀚;宋成达 -专利权人：哈尔滨东安汽车动力股份有限公司
申请日： 2020-03-23 - 公布日： 2020-12-18 - 主分类号： B23C5/12 文献下载
摘要：一种用于加工发动机缸体曲轴安装止推面的专用刀具，涉及一种刀具。刀杆的使用端设有凹形仿形槽，凹形仿形槽的前端与固定不可调刀夹可拆卸固定连接，凹形仿形槽的后端与轴向可调刀夹可拆卸固定连接，固定不可调刀夹与轴向可调刀夹的相对端分别与对应的切削刀片可拆卸固定连接，轴向可调刀夹的后端与轴向调整螺钉螺纹连接。本实用新型保证了产品的一致性；成本低、效率高、质量好，非常适用于批量生产中的缸体止推面加工，改变了一种换刀、测量形式，提高了生产效率；可在批产状态下保证产品质量一致性、减少刀具更换的时间浪费，提高生产效率，同时简化刀具结构提高换刀人员的可操作性，降低作业者的劳动强度，改进产品的批产质量管理方法。
一种用于加工发动机缸体曲轴安装止推面专用刀具

[发明专利]一种基于化感自毒作用的花生连作障碍的修复方法-CN201810490893.0有效
发明人：黄玉茜;韩梅;白洪志;杨劲峰;钮旭光;张志勇;刘欣宇;马子茜;姜云瀚 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2018-05-21 - 公布日： 2020-07-03 - 主分类号： A01G22/40 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于化感自毒作用的花生连作障碍的修复方法，包括以下步骤：（1）在花生播种期采用复合菌剂进行拌种处理；所述复合菌剂包括暗黑链霉菌和增效剂，增效剂为苯醚甲环唑和福美双1000‑2000液混合液，二者的比例为1:5‑5:1；使用方法为拌种；（2）在花生播种期穴施复合菌肥拌土；菌肥包括羊粪30‑70份，蚯蚓粪30‑70份，菌剂的用量为万分之五至十；菌剂为暗黑链霉菌40‑60份、酵母菌40‑60份，播种时采用穴施处理，每穴20‑30克，与穴内土壤搅拌混合，本发明的有益效果是大幅度的提高了花生的出苗率和成活率；采用羊粪、蚯蚓粪和暗黑链霉菌发酵，羊粪弥补了蚯蚓粪的效力，暗黑链霉菌在菌肥中繁殖，利于花生根系生产，消除连作障碍的影响。
一种基于作用花生连作障碍修复方法

[实用新型]一种经济快速型变速器齿轮、轴系止动工装-CN201822061178.3有效
发明人：梁颖;袁秋平;王永刚;么丽平;姜云瀚;赵志;张大川 -专利权人：哈尔滨东安汽车动力股份有限公司
申请日： 2018-12-08 - 公布日： 2019-08-27 - 主分类号： B25B29/00 文献下载
摘要：一种经济快速型变速器齿轮、轴系止动工装，涉及一种止动工装。止动板为三角形结构，止动板1下表面设有齿轮和两个光孔，所述齿轮和两个光孔的圆心呈三角形设置，利用三角形的稳定性原理实现限位和止动；所述止动板的其中两个端面与两个把手的一端固定连接。本实用新型克服了现有技术中存在的装配质量不可靠、效率低的缺点，实现输出轴锁紧螺母、中间轴锁紧螺母拧紧到位，有效防止变速器内部件受损、拧紧力矩不足、拧紧不到位等不良装配情况。
止动板变速器齿轮齿轮光孔拧紧轴系装配螺母本实用新型三角形结构三角形设置输出轴锁紧稳定性原理变速器圆心拧紧力矩锁紧螺母内部件下表面中间轴限位止动把手受损

[发明专利]一种多色免疫荧光标记方法和成像方法-CN201811127416.4在审
发明人： 姜云瀚;彭锦 -专利权人： 姜云瀚
申请日： 2018-09-26 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： G01N33/533 文献下载
摘要：本发明公开了一种多色免疫荧光标记方法和成像方法，涉及免疫荧光技术领域。该多色免疫荧光标记方法包括多个荧光标记步骤以及在每个荧光标记步骤之后进行的用交联固定剂孵育样本的交联固定步骤；交联固定剂含有：丙酮、多聚甲醛和PBS缓冲液。采用该标记方法可针对样本中的多种抗原标记上多种不同的荧光染料，标记后的样本可用于共聚焦显微成像，显示出多种不同的颜色，且各种颜色清晰、明亮、不窜色，该方法为科研工作者同时观察多种抗原的性质、定位以及含量等提供了基础。
免疫荧光标记多色样本交联固定剂荧光标记成像共聚焦显微成像免疫荧光技术多聚甲醛交联固定抗原标记荧光染料抗原丙酮孵育可用明亮清晰观察科研

[实用新型]一种自行研制齿轮啮合修整装置-CN201521025935.1有效
发明人：项凯明;崔志明;张伟;姜云瀚;刘支萍;刘斌;张硕 -专利权人：哈尔滨东安汽车动力股份有限公司
申请日： 2015-12-12 - 公布日： 2016-06-29 - 主分类号： G09B25/02 文献下载
摘要：一种自行研制齿轮啮合修整装置，属于汽车齿轮修整设备技术领域，包括主动转轴、连接组件、固定夹板、固定螺丝、固定压块、工具齿轮、修整齿轮，其特征在于：所述主动转轴前顶端表面固定连接有连接组件，所述连接组件前顶端表面固定连接有固定夹板，所述固定夹板前顶端表面四周边缘处平均分布固定插装有若干个固定螺丝，所述固定夹板下顶端表面固定连接有固定压块，所述固定压块与所述连接组件之间内侧下方边缘处固定插装有工具齿轮，所述工具齿轮下方插装有修正齿轮，利用珩齿机对被加工零件施加一定的径向载荷，模拟齿轮的真实工作状态，修复零件渐开线齿面的微观高点，提高零件的啮合精度。
一种自行研制齿轮啮合修整装置

[实用新型]一种机械式检测轴齿轮齿面磕碰伤的啮合装置-CN201521025925.8有效
发明人：王健力;刘支萍;胡本洋;项凯明;崔志明;姜云瀚;刘斌;张硕 -专利权人：哈尔滨东安汽车动力股份有限公司
申请日： 2015-12-12 - 公布日： 2016-05-25 - 主分类号： G01B5/00 文献下载
摘要：一种机械式检测轴齿轮齿面磕碰伤的啮合装置，属于机械齿轮检测技术领域，包括夹紧顶尖、被测齿轮轴、标准齿轮轴、标准齿轮、滑台、百分表、固定座、固定支架，其特征在于：所述固定座上顶端表面左侧边缘处固定连接有固定支架，所述固定支架上下顶端表面对称各固定连接有夹紧顶尖，连个所述夹紧顶尖之间设有被测齿轮轴，所述固定座有顶端表面上方边缘中间层固定连接有百分表，所述固定座上顶端表面中间层固定插装有滑台，所述滑台左顶端表面中间处固定连接有标准齿轮轴，所述标准齿轮轴侧顶端表面固定插装有标准齿轮，结构合理，测量精度提高，稳定性提高，更有利于控制出厂产品的质量，装夹方便，导轨滑动顺畅，测量时运行稳定。
一种机械式检测齿轮磕碰啮合装置

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