本发明公开了一种检测肺炎链球菌的RPA方法、其专用引物、探针和用途,其专用引物和探针是基于肺炎链球菌特异性保守序列设计的,具有SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示的寡核苷酸序列。本发明首次将新型恒温扩增技术RPA应用于肺炎链球菌的检测中,该方法模拟体内DNA复制的酶反应过程,依赖特定的酶和蛋白组合,包括重组酶、单链结合蛋白和DNA聚合酶,对DNA模板进行扩增,可在37℃的恒温下实现特定核酸序列的扩增,扩增产物可通过侧向层析核酸试检测纸条实现可视化判别。本发明建立的检测方法灵敏度可达10拷贝数/μL,特异性高,对硬件设备的要求很低,且可在30min内完成检测,无需对样品进行复杂处理、适合现场检测,适于推广应用。