本发明属于基因工程和蛋白质工程技术领域,涉及一种定点突变的蔗糖磷酸化酶及其应用。本发明所述的定点突变的蔗糖磷酸化酶,由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖磷酸化酶(BiSPase)中制造点突变获得,所述点突变的突变位点是选自:第141位和/或第197位。优选地,其所述第141位的点突变为苏氨酸突变为半胱氨酸;所述第197位的点突变为甘氨酸突变为半胱氨酸。本发明所提供的蔗糖磷酸化酶变体酶的催化效率明显提高,从而可以提高L‑抗坏血酸葡萄糖苷的产率,降低生产成本,解决了现有技术中蔗糖磷酸化酶部分受体特异性低、酶活低的问题,具有广阔的工业应用前景。