本申请公开了一种检测新冠病毒核酸的RPA引物探针对及试剂盒。一方面,本申请公开了一种检测新冠病毒的RPA引物探针对,所述RPA引物探针对包括上游引物F、下游引物R和探针P,所述上游引物F、下游引物R和探针P的序列表分别如SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2和SEQ ID N0.3所示;所述下游引物R标记有生物素,所述探针P的5’端和3’端分别带有荧光基团和阻断基团,所述探针P距5’端31bp的碱基被碱基代替物dSpcacer替代。另一方面公开了包含上述引物探针对的试剂盒。本申请用于新冠病毒的检测,成本低、检测时间短,而检测灵敏度和精确度均较高。