本发明提供了一种检测牛APAF1基因隐性致死突变的方法,涉及分子生物学领域,本发明方法基于焦磷酸测序技术,采用一对扩增引物、一条通用引物和一条测序引物,其核苷酸序列如SEQ ID No.1、2、3、4所示,对牛5号染色体63150400bp位点的单核苷酸多态性进行分析,结果发现牛APAF1基因野生型纯合子在C碱基处有峰,T碱基处无峰;而致死突变携带者在C碱基与T碱基处均有峰。本发明提供的方法操作简单,灵敏度高,准确性强,通量高,检测成本低,可快速检测APAF1基因隐性致死突变携带者的个体,在牛的育种过程中具有重要应用价值。
本发明提供了一种检测牛SMC2基因隐性致死突变的方法,涉及分子生物学领域,本发明方法基于焦磷酸测序技术,采用一对引物、一条通用引物和一条测序引物,核苷酸序列如SEQ ID No.1、2、3、4所示,对牛8号染色体95410507bp位点的单核苷酸多态性进行分析,结果发现野生型纯合子在突变位点处为T/T基因型,焦磷酸测序结果图显示T碱基与C碱基的峰高比例为3:1;而致死突变携带者峰图在突变位点处为T/C基因型,焦磷酸测序结果图显示T碱基与C碱基的峰高比例为5:3。本发明提供的方法操作简单,灵敏度高,准确性强,通量高,检测成本低,在牛的保种、育种过程中具有重要应用价值。
本发明涉及分子生物学,具体提供了一种用于检测牛GART突变基因型的引物对,所述引物对如SEQ ID No.1-2所示。本发明进一步提供了一种检测牛GART突变基因型的方法,包括PCR扩增、扩增产物酶切和电泳检测酶切产物,判断待测样本基因型。本发明所设计的引物除了能够扩增牛GART基因的目的突变位点外,所扩增片段内还包含另外2个相同的酶切位点,能够避免因酶切不完全或酶切反应失败而导致的假阳性,从而确保检测的准确性。