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[发明专利]一种CRISPR-SaCas9基因编辑系统及其应用-CN202110756753.5有效
发明人：张孝兵;程涛;张健萍;杨智学;傅雅文 -专利权人：天津协和生物科技开发有限公司
申请日： 2021-07-05 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供了一种CRISPR‑SaCas9基因编辑系统及其应用。所述基因编辑系统包括SaCas9载体、sgRNA载体和同源重组模板pDonor载体。本发明通过选择合适的SaCas9载体的核定位信号、sgRNA载体的骨架结构以及sgRNA载体的靶序列长度等多种手段，提高了mNeonGreen在人诱导多能干细胞中EEF1A1位点和GAPDH位点的基因敲入效率。同时，本发明还系统比较了不同sgRNA长度的SpCas9和SaCas9针对同一位点的打靶效率和脱靶效率，最终得知本发明提供的CRISPR‑SaCas9基因编辑系统是一种打靶效率高、脱靶效率低的新型基因编辑载体系统。
一种 crispr sacas9 基因编辑系统及其应用

[发明专利]一种提高基因敲入效率的方法及其应用-CN202211172904.3在审
发明人：张孝兵;傅雅文;张健萍 -专利权人：苏州吉纳星辰生物技术有限公司
申请日： 2022-09-26 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高基因敲入效率的方法及其应用，涉及基因编辑技术领域。本发明提供了一种提高基因敲入效率的方法，所述方法首先利用细胞周期阻滞物同步化细胞周期，再在特定的时间点进行基因编辑，使得CRISPR编辑元件在群体细胞大多数处于合适的细胞周期(S期)时发挥作用，可以取得更高的HDR编辑效率。而且，本发明采用的细胞周期阻滞物细胞毒性极小，改进的基因组编辑系统为从操纵人iPSC基因组到创建基因修饰的动物模型的应用提供安全高效的工具。
一种提高基因效率方法及其应用

[发明专利]一种提高基因敲入效率的小分子组合物-CN202010994864.5有效
发明人：程涛;张健萍;傅雅文;张孝兵;杨智学;张凤 -专利权人：中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）
申请日： 2020-09-21 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高基因敲入效率的小分子组合物；所述小分子组合物包括非同源末端连接修复途径的抑制剂(NHEJ抑制剂)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDAC抑制剂)。最佳的小分子组合物为：M3814+Trichostatin A。本发明还提供了在人原代细胞中实现高效基因敲入的方法，所述方法包括：将基因组编辑组合物引入人原代细胞中，加入所述小分子组合物，使染色质结构松散并且抑制非同源末端连接，提高基因敲入效率。该方法的效率比采用CRISPR/Cas9等RNA引导的核酸内切酶的传统基因组编辑方法的效率显著更高。
一种提高基因效率分子组合

[发明专利]CDKN1A基因报告细胞系及其构建方法和应用-CN202110119486.0在审
发明人：程涛;张健萍;杨智学;傅雅文;孙艺丹;张凤;张孝兵 -专利权人：中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）
申请日： 2021-01-28 - 公布日： 2021-06-04 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供了CDKN1A基因报告细胞系及其构建方法和应用，所述CDKN1A基因报告细胞系的基因组中整合有荧光蛋白表达元件；所述荧光蛋白表达元件位于CDKN1A基因的终止密码子上游。本发明利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术将荧光蛋白基因敲入到CDKN1A基因的终止密码子前使其融合表达，荧光强度直接指示CDKN1A表达水平，所述CDKN1A基因报告细胞系可用于CDKN1A表达调控研究、发现CDKN1A的表达调控因子、筛选靶向细胞周期的小分子药物、检测病毒载体毒性以及大规模筛选调控载体转导毒性的小分子化合物，还可用于大规模筛选高效率sgRNA、快速检测CRISPR‑Cas9切割效率等。
cdkn1a 基因报告细胞系及其构建方法应用

[实用新型]智能型机动车防盗报警装置-CN95231273.5无效
发明人：宁曰湧;傅雅文 -专利权人：宁曰湧
申请日： 1995-05-30 - 公布日： 1997-02-19 - 主分类号： B60R25/10 文献下载
摘要：一种智能型机动车防盗报警装置，包括车载主机和司机配带于身上的手机两部分。其特征是手机包括接收单元、编/解码单元、发射单元、报警提示单元、状态控制单元、联络信号检测单元、定时同步单元、遥控发令单元，主机包括接收单元、编/解码单元、发射单元、指令识别单元、状态控制单元、解除信号检测单元、定时单元、车内状态编码单元；具有双向确认、信息准确、隐蔽性强、手机可连续工作和无法在有限时间内破译密码等突出优点。
智能型机动车防盗报警装置