本发明属于生物疫苗制备技术领域,公开了一种猪瘟病毒E2的核酸‑蛋白复合标记性疫苗,具体公开了Fd片段作为鉴别标签在制备猪瘟病毒亚单位疫苗和/或核酸疫苗中的应用,所述Fd片段的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明首次将Fd片段作为鉴别标签在制备猪瘟病毒亚单位疫苗和/或核酸疫苗中的应用,该多肽片段不仅能帮助蛋白质正确折叠,增强重组蛋白的免疫活性的功能,而且在免疫后产生的Fd抗体可与弱毒疫苗株免疫或者野毒株感染所产生的抗体区分开,可用于集约化猪场经典猪瘟的预防和净化。
本发明属于病毒检测技术领域,具体涉及检测非洲猪瘟病毒的引物、探针及试剂盒。具体地,所述引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示的引物对和核苷酸序列如SEQ ID NO:4~5所示的引物对;所述探针包括核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的探针和核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示的探针。本发明的试剂盒包括上述引物和探针,通过设置反应抑制对照,可指示核酸提取及PCR过程中可能的PCR反应抑制物,监控PCR扩增质量;本发明试剂盒制造方法简便、兼容常规实时荧光PCR检测设备,在快速荧光PCR设备上可实现“极速扩增”,约20分钟完成PCR检测。
本发明公开一种PEDV和TGEV双重RT‑PCR检测方法及其探针引物组合与试剂盒。具体地,该PEDV上、下游引物和探针分别如SEQ ID No.1‑3所示,该TGEV上、下游引物和探针分别如SEQ ID No.4‑6所示。含有该PEDV和TGEV双重RT‑PCR检测探针引物组合的试剂盒可高效、高准确率地检测PEDV和TGEV病毒,同时可判定哪种病毒起主要作用,为实现临床早期诊断和及时制定治疗方案、减少死亡率及后遗症成为可能。