[发明专利]一种检测ADP的免疫比浊试剂盒

说明书

本发明涉及脂联素检测试剂盒技术领域，且公开了一种检测ADP的免疫比浊试剂盒，所述试剂盒包括R1试剂和R2试剂；R1试剂包括：缓冲液、10‑100mmol/L；NaCl、0.1‑1mol/L；抗凝剂、10‑100mmol/L；促聚剂、0.1‑1％；表面活性剂、0.1～1g/L；防腐剂、0.5～1g/L；阻断剂、0.05‑0.2mg/mL；其中，R1试剂中抗凝剂为EDTA‑Nasubgt;2/subgt;、肝素钠、柠檬酸钠中的一种或者其组合；R2试剂：缓冲液和抗体包被的胶乳微球，其制备过程需要交联液，封闭液和保存液；本发明制备的试剂盒取得了降低血清血浆测值差异、减小批间差、改善稳定性的有益技术效果。

技术领域

本发明涉及脂联素(ADP)检测试剂盒技术领域，具体为一种检测ADP的免疫比浊试剂盒。

背景技术

脂联素(Adiponectin)又被称为ADP、Acrp30、AdipoQ、apM1或GBP28，是脂肪细胞分泌的脂类或糖类代谢的重要调控因子。ADP在血液循环中以低分子量三聚体、六聚体和高分子量复合体形式存在，高分子量复合体是ADP代谢作用的主要活性形式。临床研究发现，正常人血循环中含有丰富的脂联素，其血浆总脂联素浓度为3～30.0mg/L，约占血浆蛋白总量的0.01％。肥胖、糖尿病及冠心病患者脂联素水平显著降低，是冠心病发病的独立危险因素。脂联素是最新发现由脂肪细胞特异性高表达并分泌到血清中的特殊蛋白质，因其具有抗糖尿病、抗动脉粥样硬化、抗炎症、防止肝纤维化、抑制肿瘤生长，影响骨代谢等重要特性，已成为国内外学者研究的热点。

脂联素是新近发现的糖尿病预测指标，低血清脂联素水平说明个体糖尿病患病风险高。动态监测血清脂联素水平可能了解Ⅱ型糖尿病的发展程度，低脂联素水平是排除年龄、血压、血脂、吸烟等因素之外的糖尿病风险预测独立指标。检测脂联素可确定糖尿病高风险人群，并进行生活管理，能够有效降低Ⅱ型糖病发风险。因此，脂联素的临床检测具有巨大的市场潜力。

目前市场上出现的脂联素检测试剂盒有酶联免疫法、化学发光法和胶乳免疫比浊法检测试剂盒等等。酶联免疫法操作步骤繁琐，检测时间长，灵敏度和线性范围有一定局限，不能批量测试；化学发光法需要昂贵的仪器配套，检测用时较长；而作为Ⅱ型糖尿病的早期预测指标，胶乳免疫比浊法试剂盒配套全自动生化分析仪或特定蛋白分析仪，能实现高通量、快速测试，同时又能兼顾精密度和灵敏度高的优点，有很大市场前景。

现有技术方案：脂联素胶乳免疫比浊法检测试剂盒基于样本中的脂联素与包被于胶乳颗粒的特异性抗脂联素抗体相结合，引起凝集反应。凝集反应的浊度高低与样本中脂联素浓度成正比。该方法是一种无需预处理样本，技术和设备要求不高，而精密度和特异性更高的分析方法。由于该方法不需要昂贵的设备，可以实现自动化，且可同时测定大量标本，因此受到临床广泛推广。但是市售的胶乳免疫比浊法脂联素检测试剂盒血清血浆样本测值差异大，批间差大，稳定性不好，因而限制了其在临床上的推广应用。

本发明引用下述参考文献：

(1)北京化工大学在2021年刊出的符含月的硕士研究生学位论文《季戊四醇四(3-巯基丙酸)酯的合成及应用研究》公开了季戊四醇四(3-巯基丙酸)酯的结构和合成方法；

(2)北京化工大学在2022年刊出的宋妍妍的硕士研究生学位论文《TPU/SiR体系的POSS粒子增容及反应性共混材料的制备》公开了八巯基笼型聚倍半硅氧烷(POSS-SH)的结构和合成方法。

发明内容

为了解决现有技术中脂联素胶乳免疫比浊法检测试剂盒存在血清血浆测值差异大、试剂批间差大、稳定性差的技术问题，本发明提供了一种检测ADP的免疫比浊试剂盒，所述试剂盒包括：

R1试剂，包括：缓冲液、10～100mmol/L；NaCl、0.1～1mol/L；抗凝剂、10～100mmol/L；促聚剂、0.1～1％；表面活性剂、0.1～1g/L；防腐剂、0.5～1g/L；阻断剂、0.05～0.2mg/mL；