[发明专利]一种基于碳点和CuInS2/ZnS量子点的比率荧光检测方法

权利要求书

1.一种基于碳点和CuInS₂/ZnS量子点 的用于检测金霉素的荧光探针的方法，其特征在于：包括如下步骤：以水热法制备了富含氨基的具有蓝色荧光的碳点，并且通过回流法制备了羧基修饰的具有红色荧光的CuInS₂/ZnS量子点，将碳点和CuInS₂/ZnS量子点通过共价偶联构建双发射比率荧光探针，用于检测金霉素；

CuInS₂/ZnS量子点的制备包括：将2 mL 0.01 M的铜储备液，0.08 mL 1 M的铟储备液，0.8 mL 0.4 M的柠檬酸钠储备液，0.0125 g L^-1谷胱甘肽和40 mL去离子水置于50 mL三颈烧瓶中；随后，在磁力搅拌下将0.124 mL 1 M Na₂S储备液加入烧瓶中，调节其pH值为5.5，在100℃水浴加热下反应40 min，制备CuInS₂核；之后重复4次注入2 mL 0.04 M的ZnS储备液控制ZnS壳的厚度；待溶液冷却至室温后，通过超滤离心纯化得到三元量子CuInS₂/ZnS沉淀，将其浓缩4倍并分散至去离子水中；取10 mL CuInS₂/ZnS量子点于烧瓶中，加入0.1 mL的2-甲基-3-丁炔-2-胺溶液，调节其pH值为10.8，在100℃水浴加热下反应1.5 h，得到羧基修饰的量子点；

比率荧光探针的构建包括：将富含氨基的碳点稀释100倍后，取10μL于比色皿中稀释至200μL，记录原始蓝色荧光；获得的CuInS₂/ZnS量子点加入，436 nm处的荧光发射峰逐渐下降，且在664 nm处的荧光随之增强；该比率荧光探针由4.27μg mL^-1的碳点与0.7 mM的CuInS₂/ZnS量子点构成；

金霉素的检测包括：在制得的上述比率荧光探针溶液中加入82.5μL、pH=11.0的PBS缓冲溶液；随后加入不同浓度0、1μM、2μM、4μM、6μM、8μM、10μM、20μM、30μM、40μM、50μM、60μM、70μM的金霉素溶液，混匀放置一段时间后，开始进行测定；采用普通荧光和同步荧光两种荧光模式，普通荧光激发波长为360 nm和同步荧光激发波长为△λ= 90 nm，激发电压为600 V下对金霉素进行检测，随着金霉素的浓度增加，碳点的荧光强度增强，而量子点的荧光强度不变，建立加入金霉素前后碳点和量子点的荧光强度比差值（）与金霉素浓度之间的关系，实现定量检测金霉素，利用普通荧光模式所的到的线性关系为∆I_R = 0.0665 C_CTC +0.008，相关系数为0.997，该方法的检测限为0.59 μM，线性范围为0 - 70 μM；通过同步荧光模式所得到的线性关系为，相关系数为0.998，该方法的检测限为0.40 μM，而该线性范围为0 - 50 μM；通过对同步荧光和荧光两个方法的比较，同步荧光的线性关系和检测限较荧光好。