[发明专利]一种哈茨木霉菌的规模化高产制备方法

说明书

本发明公开了一种哈茨木霉菌的规模化高产制备方法，包括以下步骤：S1、接种：将固体发酵培养基经过125℃高温灭菌处理，然后再进行冷却，同时接种哈茨木霉菌种；S2、发酵：将接种后的固体发酵培养基用固体发酵罐进行培养发酵，即可得到固体发酵产物；S3、制备：将步骤S2中的固体发酵产物经干燥和分离得到哈茨木霉菌孢子粉和发酵产物；本发明通过固体发酵培养基采用大叶麸皮、挤压膨化果渣和木屑，用大叶麸皮次粉含量高，营养更全面，通透性好，用木屑能够提供纤维质，主要刺激产纤维素酶，通透性好，挤压膨化果渣能提供酸性环境，通透性好，从而能够提高哈茨木霉菌的孢子产量与有效活菌数。

技术领域

本发明涉及哈茨木霉菌技术领域，具体为一种哈茨木霉菌的规模化高产制备方法。

背景技术

哈茨木霉按照传统分类系统属于无性型真菌、丝孢纲、丝孢目、丝孢科和木霉属中的一员。木霉属分布广泛，主要存在于森林、坡沟、农田和草地等潮湿的生境中，土壤、枯枝、落叶和腐木等植物残体以及其它真菌的子实体都是其生长基物，其物种丰富多样。木霉菌是一类重要的自然生物资源，具有较高的经济价值。木霉属中应用最多的是哈茨木霉，用哈茨木霉制成菌剂作为生物防治制剂已广泛使用，广泛地应用于农业、工业和环境保护等相关领域。在农业领域，国际上已有50余种木霉生防制剂或菌肥产品注册登记，并进行商业化生产，利用哈茨木霉Trichodermaharzianum Rifai和绿木霉T.virens Arx生产的商业制剂TRICHODEXXTM和Soil-GardTM被广泛用于各种植物真菌病害的防治。

但是，哈茨木霉在制备过程中容易出现菌丝生长过于旺盛，而孢子产量不足的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种哈茨木霉菌的规模化高产制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种哈茨木霉菌的规模化高产制备方法，包括以下步骤：

S1、接种：将固体发酵培养基经过125℃高温灭菌处理，然后再进行冷却，同时接种哈茨木霉菌种；

S2、发酵：将接种后的固体发酵培养基用固体发酵罐进行培养发酵，即可得到固体发酵产物；

S3、制备：将步骤S2中的固体发酵产物经干燥和分离得到哈茨木霉菌孢子粉和发酵产物；

所述固体发酵的工艺条件包括：发酵PH为5.5-5.8，培养时间为120小时。

优选的，湿度控制过程包括：0h＜t≤48h湿度为80-90％，48h＜t≤108h湿度为70-80％，108h＜t≤168h湿度为60-70％。

优选的，通风控制过程包括：0h＜t≤24h不通风；24h＜t≤108h间歇通风，间歇时间2-3h/次，通风时间12-18min/次，通风量0.4-0.6vvm；108h＜t≤168h间歇通风，间歇时间5-6h/次，通风时间17-23min/次，通风量0.1-0.3vvm，t代表发酵时间。

优选的，所述固体发酵培养基的接种方式：利用固体发酵罐进行负压接种，配合罐内主风机内循环系统，包子均匀分散接种到每个网盘上。

优选的，接种后培养温度为34℃，孢子更快萌发，培养40小时进入菌丝生长期，调温30℃，48小时后菌丝生长旺盛期，60小时后进入孢子着生期，调节温度至25℃，低温刺激产孢，120小时成曲，物料生长透彻，孢子着生均匀。

优选的，在步骤S3中，所述固体发酵产物的干燥方式：采用真空干燥技术对固体发酵产物进行干燥处理。

优选的，在步骤S3中，哈茨木霉菌孢子粉:固体发酵培养基粉和载体总量的重量比为1:(10-20)。

优选的，在步骤S1中，固体发酵培养基包括按重量百分比由以下组分组成：大叶麸皮30-60％、挤压膨化果渣20-50％、木屑3-20％和调节水分含量60-95％。