[发明专利]一种特异性检测肌酸激酶同工酶的试剂盒

说明书

本申请公开了一种特异性检测肌酸激酶同工酶的试剂盒，属于肌酸激酶检测技术领域。所述试剂盒包括试剂R0、试剂RM和试剂R1；试剂R0包括缓冲液、氯化钠、保护剂、防腐剂、肌酸激酶同工酶B亚基抗体；试剂RM包括缓冲液、包被肌酸激酶MM同工酶包被抗体的磁性微球、保护剂、表面活性剂、稳定剂、防腐剂；试剂R1包括缓冲液、包被碱性磷酸酶的肌酸激酶MM同工酶标记抗体、保护剂、表面活性剂、稳定剂、防腐剂。本申请试剂盒灵敏度高、特异性好、具有较高的线性范围和耐HOOK性，能够检测干滤血片、血清或尿液样本中的CKMM，适用范围更广。

技术领域

本申请涉及肌酸激酶检测技术领域，特别涉及一种特异性检测肌酸激酶同工酶的试剂盒。

背景技术

肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶，主要分布于骨骼肌与心肌，其次为脑组织，对肌酸激酶进行活性测定可以用于骨骼肌疾病及心肌疾病的诊断。肌酸激酶有4种形式的同工酶，CKMM为肌型同工酶，主要分布于骨骼肌；CKMB为心型同工酶，主要分布于心肌；CKBB为脑型同工酶，主要分布于脑组织；CKMiMi为线粒体型同工酶，主要分布于心肌和骨骼肌线粒体中。其中CKMM对于肌肉损伤及新生儿Duchenne型肌营养不良具有极大的诊断价值。

CKMM为含有2个M亚基的肌酸激酶同工酶，CKMB为含有1个M亚基，1个B亚基的肌酸激酶同工酶。如果检测CKMM试剂中抗体筛选特异性不高，会产生与CKMB中M亚基的交叉反应。即使是筛选出针对M亚基的抗体，混合检测CKMM和CKMB时也会有部分CKMB被检测出，不利于特异性的检测CKMM。所以，目前相关的肌酸激酶同工酶的检测试剂盒检测特异性不高，检测线性范围较低，不能满足临床的要求。

发明内容

针对相关的肌酸激酶同工酶检测试剂盒检测特异性不高，检测线性范围较低的问题，本申请提供一种特异性检测肌酸激酶同工酶的试剂盒。

本申请的一种特异性检测肌酸激酶同工酶的试剂盒是通过以下技术方案得以实现的。

一种特异性检测肌酸激酶同工酶的试剂盒，包括试剂R0、试剂RM和试剂R1；

所述试剂R0包括20-50mmol/L缓冲液、9g/L氯化钠、0.5-1g/L保护剂、0.05-0.1g/L防腐剂、10-100mmol/L肌酸激酶同工酶B亚基抗体；

所述试剂RM包括20-50mmol/L缓冲液、0.2-2g/L包被肌酸激酶MM同工酶包被抗体的磁性微球、0.5-10g/L保护剂、1-2g/L表面活性剂、1-10g/L稳定剂、0.05-0.1g/L防腐剂；

所述试剂R1包括20-50mmol/L缓冲液、1-20ug/ml包被碱性磷酸酶的肌酸激酶MM同工酶标记抗体、0.5-10g/L保护剂、1-2g/L表面活性剂、1-10g/L稳定剂、0.05-0.1g/L防腐剂。

通过采用上述技术方案，本申请一方面采用了更高灵敏度的化学发光检测方法，另一方面加入了专门针对CKMB B亚基的抗体对CKMB进行提前封闭阻断，可有效提高检测线性范围，提高检测的特异性和灵敏性。

具体的，由于尿液中CKMM的含量比血液中的要低，需要灵敏度更高的检测试剂盒或方法对其进行检测，所以本申请采用检测灵敏度及检测精密度较高的化学发光免疫分析法对待测样品中的CKMM进行检测，较相关的肌酸激酶同工酶检测试剂采用的荧光免疫方法，更能够满足对临床尿液样本的检测。

本申请试剂盒中含有试剂R0，试剂R0中的B亚基抗体能够特异性的阻断CKMB，在加入RM和R1试剂后，确保了M亚基抗体仅能够与样品中的CKMM结合，而不与CKMB结合，从而提高了检测的特异性，而且，通过阻断CKMB可提高检测线性范围，具有更高的线性和耐HOOK效应。