[发明专利]一种球形节杆菌PJ45及其应用

说明书

本发明属于菌株的筛选和应用领域，本发明提供了一种球形节杆菌PJ45及其应用。本发明还提供了一种降解有机磷的方法，包括：取稷山牡丹根际土样，制成细菌悬液，进行培养，然后进行纯化培养，得到纯菌株‑球形节杆菌PJ45，对其进行扩大培养，制得种子液，种子液的菌体制备成降解菌液，然后得到的降解菌液接种到有机磷固体培养基中降解有机磷。本发明从稷山牡丹根际土壤中分离到一株球形节杆菌PJ45，其具有较高的解磷能力，从植酸钙中活化出来的速效磷含量为4.84mg/L，对植酸钙的活化率达到76.18％。本发明丰富了野生解磷菌遗传资源，扩大了解磷菌全基因组育种的后备库，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及菌株的筛选和应用的技术领域，尤其涉及一种球形节杆菌PJ45及其应用。

背景技术

稷山牡丹，又名矮牡丹，是毛茛科、芍药属落叶灌木。稷山牡丹是我国特有的珍稀物种，分布于山西的稷山、永济以及陕西延安、铜川和华山，稷山牡丹是我国特有的珍稀野生牡丹品种，作为园艺牡丹的原始种之一，在分类学上具有重要地位，也是牡丹品种选育的重要遗传资源，对研究牡丹的起源、分类和演变有着重要意义，因而具有较高的科研价值。

磷的循环是一种典型的沉积循环，主要在土壤、植物和微生物之间进行，其中磷的再循环大多是在微生物的作用下进行的。微生物通过自身作用以及与其他生物协同作用将水体沉积物中难溶性的磷元素转化为可溶性的，供自身或其他生物利用。能够将难溶性磷酸盐转化为可利用态磷酸盐的微生物称为解磷微生物。目前报道的解磷细菌有芽孢杆菌属(Bacillus sp.)、沙雷氏菌属(Serratia sp.)、假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、变形杆菌属(Proteus sp)等。能够分解有机磷化合物的细菌称之为解有机磷细菌，其能够把有机磷酸盐降解转化成无机态的可溶性磷酸盐，从而增加土壤中中活性磷的含量。

有关磷细菌的研究和应用已有多年，磷细菌的种类多样性使得其解磷机制也不尽同。微生物降解有机磷的机制一般认为与微生物分泌的酶有关，解有机磷细菌通过分泌胞外磷酸酶对有机磷酸酯进行酶解。当磷元素成为微生物生长的主要限制因子时，微生物就会释放出胞外磷酸酶，将有机磷水解为有效磷，与此同时，微生物胞内碱性磷酸酶会被诱导合成并不断积累。

目前，国内对于解有机磷细菌的研究大多都来源于陆地土壤，因此对有机磷降解机制的研究也就集中于土壤微生物来源。而稷山牡丹根际解有机磷细菌的筛选鉴定现有技术中未见报道，因此，如何提供一种筛选鉴定稷山牡丹根际解有机磷细菌的方法，是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有降解有机磷能力的菌株-球形节杆菌PJ45，并对该菌株的解磷能力进行了分析。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

一株球形节杆菌PJ45，拉丁文为Arthrobacter globiformis。

优选的，该菌株16S rDNA的部分基因序列如SEQ ID NO1.所示。

本发明的另一个目的是提供一种球形节杆菌PJ45在降解有机磷的应用。

优选的，所述有机磷为植酸钙。

进一步的，本发明还提供了一种降解有机磷的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取稷山牡丹根际土样；

(2)将步骤(1)得到的土样制备成细菌悬液，将细菌悬液涂布于有机磷固体培养基培养；

(3)用接种环挑取具有溶磷圈且未发生重叠的菌落，在新的有机磷固体培养基上按照Z字形划线纯化，并进行培养，直至得到纯菌株，即，球形节杆菌PJ45；

(4)将球形节杆菌PJ45进行扩大培养，制得种子液；所述扩大培养用的培养基为LB液体培养基；