[发明专利]一株狭叶牡丹根际褐球固氮菌PP30及应用

说明书

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株狭叶牡丹根际褐球固氮菌PP30及应用。通过将本申请的菌株用于解有机磷的试验中，发现此菌株可以从植酸钙中活化出的速效磷含量为4.44mg/L，对植酸钙的活化率达到76.74％。可见褐球固氮菌不仅可以发挥生物固氮的作用，还能用于降解有机磷，并且降解效果很好。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株狭叶牡丹根际褐球固氮菌PP30及应用。

背景技术

褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)，为假单胞菌目、假单胞菌科、褐球固氮菌属。特征为：细胞较大，为球杆状或杆状，菌体大小为2.0～3.0×3.0～6.0μm，常成对或八叠状排列；菌体有荚膜，周生鞭毛，能运动，革兰氏阴性。在无氮培养基上生长良好，菌苔粘稠、糊状，幼培养菌苔透明转乳白色，培养常呈褐色。常用于(1)生物固氮；(2)作为菌肥(多为联合固氮)，提高农作物产量，改善作物品质，提高作物抗逆性，降低对化学肥料的依赖性；(3)固氮酶活性测定方面。到目前为止还未见报道将褐球固氮菌用于降解有机磷方面的应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一株狭叶牡丹根际褐球固氮菌PP30及应用，不仅丰富了微生物降解有机磷的菌种，还发现了褐球固氮菌的新用途。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一株狭叶牡丹根际褐球固氮菌PP30，所述褐球固氮菌的拉丁文为Azotobacter chroococcum，16S rDNA的序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了狭叶牡丹根际褐球固氮菌PP30在降解有机磷方面的应用。

作为优选，所述有机磷为植酸钙。

本发明还提供了一种利用所述的狭叶牡丹根际褐球固氮菌PP30降解有机磷的方法，包括如下步骤：

(1)将褐球固氮菌PP30进行扩大培养，得到扩大培养的解有机磷的菌株；

(2)将得到的扩大培养的解有机磷的菌株进行处理，制成解有机磷的菌液；

(3)将解有机磷的菌液接种于有机磷液体培养基中进行培养，降解有机磷。

作为优选，步骤(1)中扩大培养的培养基为LB培养基。

作为优选，步骤(1)中扩大培养的条件为：培养温度为35～39℃，培养转速为160～200r/min，培养时间为18～22h。

作为优选，步骤(2)中所述解有机磷的菌液的OD值为0.5～0.7。

作为优选，步骤(2)中制成解有机磷菌液的溶剂为质量分数为0.8～0.9％的NaCl溶液。

作为优选，步骤(3)中的培养条件为：培养温度为35～39℃，培养转速为160～200r/min，培养时间为10～14h。

本发明提供的菌株不仅具有生物固氮的功能，还可以从植酸钙中活化出速效磷，并且活化率高，说明此褐球固氮菌还具有降解有机磷的作用。不仅丰富了微生物降解有机磷的菌种类型，还为褐球固氮菌提供了新用途。

附图说明

图1为褐球固氮菌PP30在有机磷培养基上形成的溶磷圈。

具体实施方式

本发明提供了一株狭叶牡丹根际褐球固氮菌PP30，所述褐球固氮菌的拉丁文为Azotobacter chroococcum，16S rDNA的序列如SEQ ID NO.1所示。

在本发明中，所述狭叶牡丹根际褐球固氮菌PP30，采自甘肃省农业技术推广总站的野生牡丹-狭叶牡丹根际土壤中。