[发明专利]一株绵羊肺炎支原体及其在抗绵羊肺炎支原体制剂筛选中的应用

说明书

本发明公开了一株绵羊肺炎支原体及其在抗绵羊肺炎支原体制剂筛选中的应用，所述绵羊肺炎支原体的分类命名为绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)NJ01株，已保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2020907，保藏日期为2020年12月14日。本发明所提供的菌株NJ01培养生长速度快、滴度高，可达10¹⁰CCU/mL，在特定培养基中经复苏传代培养后，只需要10‑72h即可变色，这为抗绵羊肺炎支原体制剂的测定节约了时间，提高了效率，可用于抗支原体制剂的快速筛选等。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株绵羊肺炎支原体及其在抗绵羊肺炎支原体制剂筛选中的应用。

技术背景

羊支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae of sheep and goat,MPSG)是由绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)引起的一种绵羊和山羊慢性呼吸道传染病。该病主要以气喘为临床特征，在世界范围内广泛流行，山羊和绵羊都较易感，几乎普遍存在，给养羊业造成了重大损失。由于绵羊肺炎支原体疫苗免疫效果不佳，抗支原体药物等制剂的使用成为预防和治疗该病的重要手段。

目前，由于大量使用抗菌药物而造成的细菌耐药、疗效差或无效的现象，已成为困扰临床医生的棘手问题，通过体外药敏试验，获得药物的抗菌活性制剂对临床治疗具有重要的参考价值。从羊传染性胸膜肺炎病例分离的支原体对大环内酯类和四环素类药物产生耐药现象的报道。因此，及时测定支原体对常用抗菌药物的敏感性，对于羊支原体性肺炎的有效治疗和控制具有重要指导意义。

文献“陈朝喜等，山羊源绵羊肺炎支原体的耐药谱型分析，中国畜牧兽医2011年第38卷第1期181页”报道，通过对培养第4日和第6日的支原体分别进行药物敏感性试验，尽管第4日和第6日绵羊肺炎支原体的颜色变化单位(CCU)发生变化，但其MIC50、MIC90、MIC范围均变化不大，表明培养时间对绵羊肺炎支原体药敏试验影响不大，CCU含量在一定范围内对药物敏感性测定试验结果影响不大。文献“宋勤叶等，18种抗菌药物对绵羊肺炎支原体和丝状支原体分离株的抗菌活性，动物医学进展，2011年32卷第6期14-18页”中的第15页报道密封细胞培养板，将其置体积分数为5％CO₂培养箱中37℃培养4-14日，观察试验结果。文献“白永平，绵羊肺炎支原体的分离鉴定与敏感药物试验的研究，四川农业大学，2011”中的23页报道，随着传代的次数增加，绵羊肺炎支原体分离株的生长速度增快，由最初的10日左右缩短到3-5日。

由上述报道可见，由于绵羊肺炎支原体对营养要求苛刻，培养较为困难，且生长变色速度慢，需3-10日，阻碍了抗支原体药物和制剂的快速高效筛选。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一株生长速度快的绵羊肺炎支原体。

本发明还要解决的技术问题是提供上述绵羊肺炎支原体的应用。

为了解决上述第一个技术问题，本发明公开了一株绵羊肺炎支原体，其分类命名为绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)NJ01株，已保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国.武汉.武汉大学，邮编430072，保藏编号：CCTCC NO：M 2020907，保藏日期为2020年12月14日。该菌株是发明人于2018年12月于南京某羊场自行采集病料，经分离、纯化和鉴定，获得一株绵羊肺炎支原体。

其中，所述绵羊肺炎支原体的热应激蛋白70基因与其他绵羊肺炎支原体相似性达95.76％-98.51％，其核苷酸序列如SEQID NO：1所示。

为了解决上述第二个技术问题，本发明公开了上述绵羊肺炎支原体在评估抗绵羊肺炎支原体制剂效果或筛选抗绵羊肺炎支原体制剂中的应用。

其中，所述应用的方法为将抗绵羊肺炎支原体制剂和绵羊肺炎支原体NJ01株培养物混合后培养，观察颜色变化情况。