[发明专利]基于指纹图谱建立的葛根汤的质量检测方法及其生产方法

权利要求书

1.一种基于指纹图谱建立的葛根汤的质量检测方法，其特征在于：步骤包括：

（1）建立简化的定性指纹图谱质谱模型，包括：

①称取10批葛根汤颗粒的适量样品，各加水50ml溶解并定容后，作为待测品溶液；

②将各待测品溶液进样分析；

③分析待测品溶液的指纹参数，选择葛根素指纹峰的出峰时间约20min，另在出峰时间约24min出现杂峰的色谱条件，建立简化的标准指纹图谱模型；

（2）取供试品颗粒约0.2g，精密称定，置50ml容量瓶中，加水溶解并定容，摇匀，滤过，取续滤液；

（3）将供试品溶液进样检测，得到色谱图；

（4）比较供试品溶液和上述定性指纹图谱模型在出峰时间约20min和约24min的流出的质谱峰以及mAU值是否一致，如果一致则进行下一步检测，如果不一致直接判定待测样品不合格；

（5）对通过质量初筛的待测样品，取待测样品滤液，加入萃取剂进行萃取，合并萃取液；

（6）将萃取液水浴蒸干，残渣用甲醇溶解作为供试品溶液；另用相同方法平行制备阳性对照和阴性对照溶液；

（7）分别吸取供试品溶液、阳性对照和阴性对照溶液，分别置于同一硅胶G薄层板上，用展开剂展开，取出；

（8）加入显色溶液，用热风加热至斑点显色清晰，并置于阳光或紫外光下检视；

（9）比较供试品、阳性对照、阴性对照的斑点，如果供试品和阳性对照在相应位置上出现相同颜色斑点，且阴性无干扰斑点，则判断供试品中含有预期与阳性对照质量相同或相近的药物成分；

其中，

对于葛根、麻黄、甘草、赤芍，以体积比为30:10:0.8的氯仿-甲醇-水为展开剂；

对于桂枝和生姜，以体积比为2:1:1的石油醚-氯仿-乙酸乙酯为展开剂，其中石油醚为60-90℃；

以及，

步骤②按照以下参数进样检测：

仪器：Agilent1100，色谱柱： Agela Venusil MP C18柱，4.6×250mm，5μm；

柱温：30℃；流速：1ml/min；检测波长：250nm；流动相：乙腈-水；

时间 乙腈（%） 水（%）

0 12 88

20 12 88

21 80 20

24 80 20

25 12 88

32 12 88。

2.根据权利要求1所述的基于指纹图谱建立的葛根汤的质量检测方法，其特征在于：步骤（4）中的判定一致的过程包括：将葛根素参照物峰相应的峰为S峰，计算各主要峰与S峰的相对保留时间和相对峰面积；其中供试品指纹图谱与标准指纹图谱的相似度不得低于0.90，且相对保留时间及相对峰面积在规定值的±10%之内，表明待测样品符合初级质量标准，如果未达到上述标准直接判定待测样品不合格。

3.根据权利要求1或2所述的基于指纹图谱建立的葛根汤的质量检测方法，其特征在于：步骤（6）中，分别将葛根、麻黄、甘草、赤芍、桂枝和生姜，加适量水，煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20ml，置分液漏斗中，分别用乙酸乙酯萃取2次，每次15ml，收集乙酸乙酯层，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为阳性对照。

4.根据权利要求1所述的基于指纹图谱建立的葛根汤的质量检测方法，其特征在于：其中步骤（7）中，分别吸取供试品溶液和麻黄、甘草、赤芍对照药材溶液各2µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以所述氯仿-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，在365nm波长下分析亮蓝色荧光斑点；或，喷以香草醛硫酸试液，105℃加热至斑点显色清晰，分析图谱中可见斑点。

5.根据权利要求1所述的基于指纹图谱建立的葛根汤的质量检测方法，其特征在于：步骤（7）中，分别吸取6-姜辣素对照品溶液、桂枝对照药材溶液和供试品溶液各2µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以所述石油醚-氯仿-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，在365nm波长下分析亮蓝色荧光斑点；或，喷以香草醛硫酸试液，105℃加热至斑点显色清晰，分析图谱中可见斑点。