[发明专利]恒温核酸扩增反应管及其应用

权利要求书

1.一种恒温核酸扩增反应管，其特征在于，所述反应管包括管体(1)、管盖(2)、和穿刺部件(3)，该穿刺部件(3)设置于管体(1)入口处内侧。

2.根据权利要求1所述的恒温核酸扩增反应管，其特征在于，所述穿刺部件(3)为空心圆锥体形状，在其圆锥侧面上设有多个孔洞(4)。

3.一种恒温核酸扩增反应管，其特征在于，所述反应管包括管体(1)、管盖(2)、和穿刺部件(3)，该穿刺部件(3)设置于管盖(2)的顶端。

4.根据权利要求3所述的恒温核酸扩增反应管，其特征在于，所述穿刺部件(3)为穿透管盖(2)顶端的钉子形部件，可于管盖(2)顶端外侧推动该穿刺部件(3)。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的恒温核酸扩增反应管，其特征在于，所述管盖(2)的开口可用封口膜密封，所述封口膜包括耐热薄膜型封口膜。

6.根据权利要求1-4中任一项所述的恒温核酸扩增反应管，其特征在于，所述管盖(2)的顶端可开设有加样口。

7.根据权利要求6所述的恒温核酸扩增反应管，其特征在于，所述管盖(2)在其底部预先密封可刺破封口膜的前提下，管盖(2)内部可加入反应液体。

8.一种应用权利要求1所述恒温核酸扩增反应管进行巢式RPA检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将第一次RPA反应的反应体系加入管盖(2)内，再用封口膜封住管盖开口，然后将其置于恒温仪中在36℃-40℃条件下进行第一次RPA反应；

在管体(1)中加入第二次RPA反应所需的除反应模板外的其它成分，待第一次RPA反应结束，将封有封口膜的管盖(2)盖入管体(1)中，穿刺部件(3)刺破管盖(2)开口处的封口膜，使管盖(2)内的第一次RPA反应产物流入管体(1)中，作为第二次RPA反应的模板；

震动混匀、离心，在荧光-恒温扩增仪中进行第二次RPA反应；

检测荧光结果。

9.一种应用权利要求1所述恒温核酸扩增反应管进行巢式RPA检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：

先将管盖(2)下面开口用封口膜密封，再从管盖(2)顶端开设的加样口，加入第一次RPA反应的反应体系，封上盖子盖紧加样口，然后将其置于恒温仪中在36℃-40℃条件下进行第一次RPA反应；

在管体(1)中加入第二次RPA反应所需的除反应模板外的其它成分，待第一次RPA反应结束，将封有封口膜的管盖(2)盖入管体(1)中，穿刺部件(3)刺破管盖(2)开口处的封口膜，使管盖(2)内的第一次RPA反应产物流入管体(1)中，作为第二次RPA反应的模板；

震动混匀、离心，在荧光-恒温扩增仪中进行第二次RPA反应；

检测荧光结果。

10.一种应用权利要求3所述恒温核酸扩增反应管进行巢式RPA检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将第一次RPA反应的反应体系加入管盖(2)内，再用封口膜封住管盖开口，然后将其置于恒温仪中进行第一次RPA反应；

在管体(1)中加入第二次RPA反应所需的除反应模板外的其它成分，待第一次RPA反应结束，将封有封口膜的管盖(2)盖入管体(1)中，推动管盖(2)顶端外侧的穿刺部件(3)尾端，使穿刺部件(3)的尖锐头部往前运动，刺破管盖(2)开口处的封口膜，使管盖(2)内的第一次RPA反应产物流入管体(1)中，作为第二次RPA反应的模板；

混合、离心，在荧光-恒温扩增仪中进行第二次RPA反应；

检测荧光结果。

11.权利要求1-4中任一项所述的恒温核酸扩增反应管在制备检测核酸的产品中的应用，所述核酸包括病毒、细菌、或动植物的核酸。